真核生物基因的转录(ppt).pdf

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1、第三节真核生物基因的转录真核生物的转录和原核转录的不同点(1)原核只有一种RNA聚合酶而真核细胞有三种聚合酶(2)启动子的结构特点不同真核有三种不同的启动子和有关的元件(3)真核的转录有很多蛋白质因子的介入顺式作用元件反式作用元件(4)真核mRNA单顺反子一一..真核真核的的RNARNA聚合酶聚合酶来源表12-2真核生物的三种RNA聚合酶的特点RNAPol位置产物相对活性对-鹅膏蕈的敏感性Pol核仁28s,18s,5.8srRNAs5070%不敏感Pol核质hnRNA,mRNA,某些SnRNA2040%高度敏感Pol核质tRNA,5SrRNA,某些SnRNAs10%片段特异中

2、等敏感表12-3转录的抑制剂ò抑制剂靶酶抑制作用利福霉素细菌全酶和亚基结合抑制起始链霉溶菌素细菌核心酶和亚基结合抑制起始放线菌素D真核Pol和DNA结合阻止延伸-鹅膏蕈真核Pol和RNAPol结合B220240Kda—与模板结合与链的起始延伸有关相B220240Kda—与模板结合与链的起始延伸有关相当于原核RNAPol的亚基C端含有羧基末端功能区CTD大亚基B140150Kda—与DNA底物和新生的RNA结合相当于原核RNAPolAPol核RNA的亚基磷酸化蛋白与DNA结合有关BC23KDaB12.6有B23B14.5B10参与酶的基本结构B16.5二二真真核生物的启核生物的

3、启动动子子启动子特征和转录因子1.RNA聚合酶I效率最高2.RNA聚合酶II3.RNA聚合酶III基因内启动子/基因外启动子1.RNApolII启动子最为复杂1有多种元件TATA框GC框CATT框OCT等2结构不恒定3它们的位置序列距离和方向都不完全相同4有的有远距离的调控元件如增强子5不直接和RNApol结合需多种转录因子真核启动子真核启动子图示图示SV40早期启动子胸苷激酶组蛋白H2B-140-120-100-80-60-40-20+1òOctCAATGCTATA类基因的启动子和调控区类基因的启动子和调控区TATA框核心元件启始子initiatorInr:一般由PCAP构

4、成Y2Y5位于-3+5可能提供RNApol识别CAATbox类启动子上游元件组成GCboxOct增强子enhencer远端调控区沉默子silencer上游激活序列upstreamactivatingseguencesUASs起始子起始子ò起始点一般没有同源序列ò第一个碱基大多为A一般由PCAPY2Y5构成称为起始子initiator,Inr).位于-3+5原核CATò帮助RNApol识别启动子ò无论TATA是否存在Inr对启动子的强度和起始位点的选择都是重要的核心元件核心元件òTATA框合又称Hogness框Goldberg-Hogness框Goldbrickò其一致序列是T

5、A9TAAAA8579385638350ò常在-25左右相当于原核的-10序列..上游启动子元件上游启动子元件UPEUPERNAPol上游转录因子结合的元件元件保守序列结合DNA的长度蛋白质因子TATAboxTATAAAA10bpTBPCAATboxGGCCAATCT22bpCTF/NF1GCboxGGGCGG20bpSP1OctamerATTTGCAT20bpOct-1OctamerATTTGCAT23bpOct-2KBGGGACTTTCC10bpNFKBATFGTGACGT20bpATFB.Lewin:GENES.1997,Table28.2核心元件上游调控元件远端调控区

6、增强子增强子enhancerenhancerò远上游序列1981farupstreamseguenceò特点1.具有远距离效应作用与位置无关2.无方向性可颠倒重复3.大大提高效率4.无物种的特异性但强度可能有变化5.具有组织的特异性2.RNApolII转录起始表12-5人类型启动子的转录因子因子分子量功能TFD(TBP,30K)TBP亚基识别TATA将聚合酶组入复合体中TAFs识别特殊启动子TFA12,19,35K稳定TFD和DNA的结合扩展保护区TFB33K结合模板链-10+10TFF38,74K大亚基具解旋酶活性RAP74,小亚基和Pol结合介导其加入复合体RNAPol1

7、0K结合复合体TFE34K()结合在Pol的前部使复合体的保护区延伸到下游57K()TFH具激酶活性可以磷酸化PolC端的CTD使Pol逸出延伸TFI120K识别Inr起始TFF/D结合TFJ在TFF后加入复合体不改变DNA的结合方式TFSRNA合成延伸22RNARNApolpol启动子启动子ò核心启动子corepromoter或核心元件coreelement位于-45到+20负责转录的起始ò上游控制元件upstream,controlelementUCE从-180延伸到-107可增加核心元件的转录起始