真核生物基因的转录

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1、第三节真核生物基因的转录一、真核生物基因转录概述(一)真核生物的转录和原核生物转录的不同点:1、原核细胞只有一种RNA聚合酶,而真核细胞有三种聚合酶;2、启动子的结构特点不同,真核基因有三种不同的启动子和有关的元件;3、真核基因的转录有很多蛋白质因子的介入。(二)真核生物RNA聚合酶(三种)类型ⅠⅡⅢ转录产物rRNA:18s,5.8s,28stRNA,5srRNA,snRNAhnRNA对鹅膏蕈碱的反应不敏感高度敏感不同物种敏感性不同(三)真核生物RNA聚合酶(RNAPolII)与模板结合;与转录起始、延伸有关与DNA、底物和新生的RNA结合负责酶的装配250KD

2、a130KDa40KDa40KDa由8~14个亚基组成,分子质量为500KDa附:真核基因在转录时RNA聚合酶需要多种转录因子的协助PolITBPTAFIs(四)转录因子1、通用因子(Generalfactor)(1)是所有启动子起始RNA合成所必须(2)与RNA聚合酶在起始位点周围形成复合体,并决定起始的位置。PolITBPTAFIsPolIII(B’’,TBP,BRF)TFIIIB2、上游因子(Upstreamfactor)(1)识别并与启动子上游元件结合(2)与上游元件结合可增加转录起始的效率UBF1上游元件Startpoint(五)启动子RNA聚合酶Ⅰ的

3、启动子:位于转录起点上游RNA聚合酶Ⅱ的启动子:位于转录起点上游RNA聚合酶III的启动子:位于转录起点下游基因内启动子二、RNA聚合酶I基因的转录(一)rRNA基因(RibosomalRNAGenes)多拷贝基因1、核心启动子(corepromoter)或核心元件:位于-45~+20,负责转录的起始。2、上游控制元件(upstreamcontrolelement):位于-180~-107,可增加转录起始的效率。(二)RNA聚合酶Ⅰ启动子人类RNAPolI的启动子上游控制元件(UCE)startpointCTCCGAGTCGNNNNNNTGGGCCGCCGG核心

4、启动子(coreelement)+20-40-110-170(三)RNAPolI的辅助因子(UBF1&SL1)1、上游结合因子(UBF1)(1)可以与UCE结合(2)可与核心元件的一段序列结合(3)两个UBF1通过蛋白-蛋白相互作用而相互结合,导致在两个结合位点间的DNA形成一个环状结构。UBF1UBF12、选择因子1(SL1)(1)组成:4个亚基a、TBP(TATA-bindingprotein):是保证RNApol准确结合到起始位点的一个关键因子b、其他的三个亚基TAF:(TBP相关因子)为RNApolI转录所需的亚基称为TAFI(2)功能:是使RNA聚合酶

5、正确的定位在起始位点。UBF1UBF1上游控制元件(UCE)startpointCTCCGAGTCGNNNNNNTGGGCCGCCGG核心启动子(coreelement)+20-40-110-170+1SL1TBPTAFIsPolITBPTAFIsRNA聚合酶I基因转录起始三、RNA聚合酶III基因的转录(一)tRNA基因的转录1、启动子----基因内启动子(1)启动子的两个保守序列:A框(5’-TGGCNNAGTGG-3’);B框(5’-GGTTCGANNCC-3’)(2)A框和B框编码的序列:A框----D-loop;B框----TψC-loop2、tRNA

6、基因转录因子(1)TFⅢC:识别boxB(2)TFⅢB:与A框上游50kb上游序列结合a、组成:TBP、BRF、B”b、功能:是RNA聚合酶Ⅲ真正的起始因子PolIIITFIIICboxBboxATFIIIB3、tRNA基因转录的起始(二)5SrRNA基因的转录1、5SrRNA基因:特点:串连排列,形成基因簇(是唯一单独被转录的rRNA亚基)2、启动子:C框;A框3、转录因子:(1)TFIIIA:结合位点为Cbox。(2)TFIIIC(3)TFIIIB:TBP+BRF+B//4、5srRNA基因转录的起始boxAboxCTFIIIATFIIICTFIIIBPol

7、III(B’’,TBP,BRF)四、RNA聚合酶II基因的转录(一)RNA聚合酶II的启动子1、组成:核心启动子(corepromoter):TATA盒(Hognessbox):-25~-35bp上游启动子(upstreampromoterelement,UPE)CAAT盒:-70~-80区GC盒:-80~-110区-20-40-60-80-100GCCACACCCGGCCAATCATATAAGCCAATTATA2、核心启动子(corepromoter):(1)TATA盒(Hognessbox):a、位置:-25~-35bpb、序列特征:富含AT,5’-TATA

8、(A/T)A(A/T)-

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