单宁对高原鼠兔脂代谢的影响.pdf

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1、YangZhouUniversityM．S．MasterDissertationTheeffectofTanninsonthelipidsmetabolismofplateaupikas(Ochotonacurzoniae)Candidate：WeiJiangAdvisor：Prof．ShengmeiMajor：CellbiologyCollegeofBioscience&Biotechnology,YangzhouUniversityMay,2012————————————————!塑鳖L堂皇堡

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5、I『fI¨Jfl__-『l●¨『_I_ll--1Y2257784单宁对高原鼠兔脂代谢的影响摘要在青藏高原强紫外、高海拔、低氧、寒冷

6、及干旱等极端环境中，多种植物均具有较高水平的酚类次生化合物，且酚类次生化合物水平因季节而不同。高原鼠兔是生长在青藏高原高寒草甸生态系统的一种优势植食性小哺乳动物。许多研究表明，植物通过提高其体内次生化合物如单宁的含量来抑制植食性动物的捕食作用，而动物会进化出相应的措施与之适应。为进一步阐明高原动植物间的协同进化，本研究通过在野外捕捉不同月份(5、6、7及8月)的高原鼠兔，或给予高原鼠兔不同时间(0、1、4及8d)不同剂量(0、10、20及40mg／kgBW，分别为对照组、低剂量组、中剂量组和高剂量

7、组)的单宁酸后，测定其血清中总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、磷脂(PL)、游离脂肪酸(FFA)及高密度脂蛋白胆固醇(HDL．C)的含量，并克隆胆固醇合成关键酶HMG．CoA还原酶的部分cDNA序列，利用Realtime．PCR分析HMG．CoA还原酶mRNA表达的变化和WesternBlotting分析其酶含量的变化。研究结果如下：1、克隆获得的高原鼠兔HMG．CoA还原酶基因的部分cDNA序列长798bp，编码266个氨基酸残基。将这一序列与已经公布的家兔、大鼠、小鼠及人的氨基酸序列进行同源

8、性分析比对，结果显示：高原鼠兔HMG．CoA还原酶与家兔、大鼠、小鼠及人的同源性分别为99．6％、98．9％、99．2％及99．2％。2、单宁酸对高原鼠兔血清中的各种脂类有不同的影响。给予低剂量单宁酸1d后，血清TC水平无变化。但给予低剂量及中剂量4d后，TC水平显著高于对照。8d后，仅低剂量使TC增加。在给予中、高剂量单宁酸1d后HDL．C水平显著高于对照，处理4d后仅高剂量使其水平显著升高，而8d后，低、中剂量却使其水平显著降低。对TG而言，中、高剂量单宁酸1d及高剂量4d均使其含量降低，但8

9、d后，各剂量均使其含量增加。高剂量单宁酸在ld及4d后也使血清PL显著低于对照，其它处理无明显影响。FFA的变化最为明显，除了低剂量处理1d不引起FFA变化外，其它所有处理均使其水平明显降低。3、低中剂量单宁酸短时间处理可使肝脏HMG．CoA还原酶水平及其mRNA表达量增加，但高剂量却使其含量降低。扬州大学硕士学位论文4、在野外生存条件下，高原鼠兔体内的各种脂类有不同的季节特点。II●一与5月份相比，高原鼠兔血清中TC水平在7、8月份均显著降低；HDL．C在6月份显著降低，在8月份显著升高，呈现出

10、先降低后升高的趋势；而TG在6月份显著升高，呈现出先升高后降低的趋势；PL在7月份达到最高。5、在野外生存条件下，高原鼠兔肝脏HMG．CoA还原酶的表达也呈现季节性变化。HMG．CoA还原酶含量及其mRNA表达量在6月份显著高于5月份水平；在7月份及8月份又显著降低。综上所述，单宁影响高原鼠兔的脂类代谢，较低剂量单宁可使高原鼠兔胆固醇合成关键酶HMG．CoA还原酶的表达及胆固醇含量增加，而高剂量的单宁却抑制HMG．CoA还原酶的表达，降低胆固醇水平；自然条件下高原植物中较低水平单宁能使高原鼠兔胆固

11、醇合成关键酶HMG．CoA还原酶的表达提高，但食物中较高水平单宁却抑制HMG．CoA还原酶的表达。这些结果将为阐明高原鼠兔与其取食植物间的协同进化提供理论依据。关键词：单宁；高原鼠兔；HMG．CoA还原酶；总胆固醇；脂代谢蒋巍：单宁酸对高原鼠兔脂代谢的影响TheeffectofTanninsonthelipidsmetabolismofplateaupikas(Ochotonacurzoniae)AbstractAvarietyofplantsintheQinghai-Tibeta