体外诊断试剂培训.ppt

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1、体外诊断产品的生产监管北京市医疗器械检验所主要内容体外诊断产品的种类体外诊断产品生产的基本原理生化类产品免疫类产品分子类和血液类溯源性问题体外诊断作用“医生的眼睛”预测和诊断功能，如：血细胞抗体（肝炎、艾滋、IGE）基因（唐氏、小儿耳聋、遗传缺陷基因BRCA1）。疗效和健康监测，如：代谢物（血糖）标志物（AFP、PSA、HPV）蛋白、微量元素（白蛋白、Ca);体外诊断产品的类别体外诊断根据风险分3类：III类：致病性病原体抗原、抗体以及核酸、人类基因检测、肿瘤标志物、血型、组织配型、变态反应（过敏原）等；II类：除III、I类，如：蛋白质、糖类、酯类、酶类、维生素、无机离子、激素等；I类

2、：微生物培养基（不用于微生物鉴别和药敏试验）、样本处理用产品，如溶血剂、稀释液、染色液等。体外诊断产品的类别体外诊断专业分类:生化、免疫、分子生物学、微生物、体液等,临床使用超过千种。生化：生物化学反应或免疫反应(生化仪的项目），酶类、糖类、脂类、蛋白、无机元素、肝功能、肾功等指标。免疫：抗原与抗体相结合的特异性反应，传染性疾病、内分泌、肿瘤、药物检测、血型鉴定等。分子诊断：分子生物学方法检测患者体内遗传物质的结构或表达水平的变化，主要用于肝炎、性病、优生优育、遗传病基因、肿瘤等检测。体外诊断产品的类别微生物：通过培养鉴别细菌等微生物的方法。血液学：通过电阻抗、激光和高能电磁波等技术检测

3、血液中血细胞的数量和分类的方法。生化类产品基本方法生化分析仪反应的一般称为生化试剂两点法、终点法、速率法、比浊法两点法：测定酶反应开始后某一时间内(t1到t2)产物或底物浓度的总变化量以求取酶反应初速度的方法。终点法：通过测定酶反应开始到反应达到平衡时产物或底物浓度总变化量，以求出酶活力的方法，亦称平衡法。速率法：是指连续测定(每15秒~1分钟监测一次)酶反应过程中某一反应产物或底物的浓度随时间的变化来求出酶反应的初速度的方法，即连续监测法。透射比浊法透射比浊法可用于测定产生浊度反应的项目。生化类产品基本方法终点法常用的有总胆红素（氧化法或重氮法）、结合胆红素（氧化法或重氮法）、血清总蛋

4、白（双缩脲法）、血清白蛋白（溴甲酚氯法）、总胆汁酸（酶法）、葡萄糖（葡萄糖氧化酶法）、尿酸（尿酸酶法）、总胆固醇（胆固醇氧化酶法）、甘油三酯（磷酸甘油氧化酶酶法）、高密度脂蛋白胆固醇（直接测定法）、钙（偶氮砷Ⅲ法）、磷（紫外法）、镁（二甲苯胺蓝法）。两点法：苦味酸法测定肌酐采用此法速率法对于酶活性测定，如丙氨酸氨基转移酶、天冬氨酸氨基转移酶、乳酸脱氢酶、碱性磷酸酶、γ谷氨氨酰基转移酶、淀粉酶和肌酸激酶等。一些代谢物酶法测定的项目如己糖激酶法测定葡萄糖、脲酶偶联法测定尿素等，也可用连续监测法。（7个酶加葡萄糖、尿素）免疫比浊法载脂蛋白、免疫球蛋白、补体、抗“O”、类风湿因子，以及血清中的其

5、他蛋白质如前白蛋白、结合珠蛋白、转铁蛋白等均可用此法。(蛋白）生化类产品说明书生化分析仪说明书除法规相关规定外，还至少包括：适用机型反应温度（37度）主波长、次波长孵育时间（终点法或两点法）延迟时间（连续监测法）、连续监测时间在延迟时间之后即开始，一般为60～120s不少于4个吸光度检测点（3个吸光度变化值）；加样量校准液个数（非线性必须两个以上）等。标准液个数的原因校准液个数浓度校准曲线线性好并通过坐标零点的，可采用一个校准液；线性好但不通过坐标零点，应使用两个校准液；对于校准曲线呈非线性者，必须使用两个以上校准液。每一个校准液都要有一个合适的浓度。吸光度浓度105600030008生

6、化类产品基本原理氧化反应:还原反应：生化类产品质量风险点分析原材料(辅酶I)（进货检验记录或生产记录中，应包括辅酶空白吸光度的检验记录，且不同的类别符合下述特点）还原性辅酶I主要用于下降反应，当还原性辅酶I质量出现问题时，试剂的空白吸光度降低，导致试剂测量结果的不确定度变大，测量的灵敏度也随之降低，测量线性范围变小。氧化性辅酶I主要用于上升反应，当氧化性辅酶I质量出现问题时，试剂的空白吸光度升高，导致试剂测量结果的不确定度变大，测量的灵敏度也随之降低，测量线性范围变小。生化类产品质量技术风险点分析生产记录中应包括试剂用水的电导率、PH值及微生物检验记录酶反应水（PH）离子电导率微生物培养

7、基温度温控系统生化类产品质量风险点分析留样每批是否留样留样检验记录，根据标准留样检验真实性，检查企业文件规定检验周期原料辅酶空白吸光度水同上纯物质（底物）检查纯度标识，或色谱的检测结果记录设备生化仪定期测试记录分光光度计定期计量电导率仪定期计量分装设备清洗记录储存环境检查冷柜或冷库的温度记录，酶类试剂2-8度，标准物质-20度免疫类产品基本原理Elisa反应的基本原理（酶标仪、发光仪等）将含有已知抗体的抗血清吸附在微量滴定板上的小孔