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1、应用荧光原位杂交技术进行产前诊断的可行性探讨江苏医药2000年第11期第26卷论著作者：许争峰王迅美潘淑娟张锡然陈宜峰单位：许争峰（南京市鼓楼医院210008）；王迅美（南京市鼓楼医院210008）；潘测疔（南京师范大学生物系）；张锡然（南京师范大学生物系）；陈宜峰（南京师范大学生物系）关键词：荧光原位杂交产前诊断染色体异常【摘要】目的探讨荧光原位杂交技术（FISH）应用于绒毛及羊水间期细胞进行产前诊断的可行性。方法应用18、X号染色体着丝粒探针及21号染色体特定区域探针，分别对绒毛及羊水间期细胞进行荧光原位杂交，并与中期分裂相进行比较分析。结果绒毛及羊水
2、间期细胞均出现了杂交信号，尤以绒毛细胞杂交比率高，信号强；常染色体探针出现3个及1个杂交点的比率约为1%和6%,X染色体探针出现3点的比例也在1%左右。结论荧光原位杂交技术对检出染色休非整倍体有较强的特异性，同时也为染色体非整倍体的检出提供了诊断依据。FISH技术应用于产前诊断具有快速、简便、灵敏的优点，有较人的临床应用价值。AstudyonthefeasibilityofprenataidiagnosisbyusinginterphasefluorescenceinsituhybridizationXUZhengfeng,WANGXunmei,PANSh
3、ujuan,etal.(NanjingGulouHospital,210008)[Abstract]ObjectiveToevaluatethepossibilityoffluorescenceinsituhybridization(FISH)inprenataldiagnosis・MethodsItwaspreformedonunculturedamniocytesandchorionicvilluscellsbyusing18andXa-satelliteprobesand21-specificrepeatedsequencesprobe•Result
4、sTwotypesofcellscanproducehybridizationsignals・Itgivesthemostspecificsingnalformesenchymalchorionicvilli.TheresuItsofautosomeprobesshowedabout1%trisignalsand6%monosignaIsinnormalchorionicvilliandamniocytecells・TheresultsofXchromosomealsoshowedaverylowtrisignalrate(about1%)innormal
5、fetals・ConclusionThesecanprovidereferencesfordiagnosisofmonosomyandtrisomyofautosomesandtrisomyormultisomyofXchromosome・Comparedwithtraditionalcellgeneticmethod,interphaseFISH,iseasyandrapid,soitusefulinclinicaldiagnosis.［Keywords】InterphaseFISHPrenataldiagnosisChromosomeabnorma1.
6、染色体异常的产前诊断传统采用绒毛及羊水细胞进行培养，然后进行细胞遗传学分析，这一过程费时费力，培养周期长，并易感染而导致培养失败。1986年，Cremer与Licher等分别证实了荧光原位杂交（FISH）技术应用于间期核检测染色体非整倍体的可行性［1,2］,从而开辟了间期细胞遗传学研究的新领域。国外己有实验室将这一技术应用于遗传病的产前诊断上［3］。我们选用18、X染色体着丝粒探针及21号染色体特定域探针，分别对绒毛及羊水间期细胞进行了原位杂交，并结合中期核染色体分析，以探讨FISH技术在产前诊断中应用的可行性。材料与方法一、标本制备1.绒毛标本制备取人工
7、流产孕龄为39〜80天的绒毛组织约50mg,共71例。解剖镜下仔细剔除蜕膜及其它污染物，置于胶原酶溶液（终浓度250IU/ml）中消化15min,加入适量生理盐水洗涤，离心，0.075M氯化钾低渗（加入秋水仙素，终浓度0.1Lig/ml）40min,甲醇：冰醋酸（3：1）固定，气干，部分标本镜检后划定杂交区域，37°C老化过夜，部分标本作染色体分析。57例在B超引导下行羊膜腔穿刺，取羊水35ml,10ml经1000rpm离心10min,0.075M氯化钾低渗30min,固定，气干，镜检划定杂交区域，37°C老化过夜。剩余25ml进行培养，约10天后按常规方
8、法收获细胞进行染色体分析。二、原位杂交1・探十地高辛标记的18、X
