布病作业指导书范文.doc

《布病作业指导书范文.doc》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在应用文档-天天文库。

1、布病作业指导书范文　　布病作业指导书微生物操作方法　　一、平板凝集试验（PAT）　　1、备一方形洁净的玻璃板，划成25个方格（或更多），横数5格、纵数5格，第一列各格写下血清号码。　　2、用0.1毫升吸管按下列剂量加受检血清于任何一行的各格中第一格0.08毫升，第二格0.04毫升，第三格0.02毫升，第四格0.01毫升。　　如吸管不多，可于分注每份血清完毕后，在2-3个盛有生理盐水的杯中清洗六次以上，然后可用于吸注另一份血清。　　3、加平板凝集反应抗原0.03毫升于各血清格中，用牙签或细铁丝混合，由血清量最小的格混起。　　第份血清用一根牙签，用后集中烧毁。　　若用细铁丝时，每份血清混合后用酒

2、精棉球擦净，然后再用作另一份血清。　　4、混匀后将玻璃板置于酒精灯火焰或凝集反应箱上，均匀加温，使其达到30℃左右，5分钟内记录反应结果。　　5、每次试验用阴、阳血清各1份作对照。　　6、按下列标准用加号记录反应强度++++出现大的凝集片或小的粒状物，液体完全透明，100%凝集。　　+++有明显的凝集片，液体几乎完全透明，75%凝集。　　++有可见的凝集片，液体不甚透明，50%凝集。　　+液体混浊，只有少量粒状物，25%凝集。　　-液体均匀混浊。　　二、试管凝集试验（SAT）　　1、血清稀释及加入抗原每份血清用10支小试管，第一管加入2.3毫升生理盐水，第二管不加，第三管至第九管各加0.5毫

3、升。　　用1毫升吸管吸取受检血清0.2毫升，加入第一管中，并混匀。　　以该吸管吸取混合液分别加入第二和第三管，每管0.5毫升。　　经该吸管将第三管混合液混匀，并吸取0.5毫升加入第四管，混匀，从第四管吸取0.5毫升加入第五管，依次加到第九管。　　从第九管吸取0.5毫升弃去。　　第十管作抗原对照。　　从第二管起血清稀释度分别为112.　　5、　　125、　　150、　　1100、　　1200、　　1400、　　1800、11600...。　　2、加入抗原方法是先以生理盐水将抗原原液作110稀释，从第二管起每管加0.5毫升，血清稀释度从第二管起依次为　　125、　　150、　　1100、　　12

4、00、　　1400、　　1800、　　11600、13200...。　　3、全部试验管充分振荡后置37度温箱中20-22小时，取出后放室温2小时，然后判定结果。　　4、结果判定++++等于完全凝集，上层液100%清亮。　　+++等于几乎完全凝集，上层液75%清亮。　　++等于显著凝集，液体50%清亮。　　+等于有凝集出现，液体25%清亮。　　-等于无凝集，液体不清亮。　　三、平板和试管凝集反应的关系0.08毫升血清量出现反应相当于试管法125的血清稀释度，0.04毫升相当于150，0.02毫升相当于1100，0.01毫升相当于1200。　　四、判定平板凝集试验（PAT）0.02毫升血清量++

5、以上凝集现象判断为阳性。　　试管凝集试验（SAT）血清滴度1100++以上凝集现象判断为阳性。　　　　内容仅供参考