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时间:2020-03-16
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1、荷叶提取物降脂机理的研究 近年来,由高脂造成的多种疾病困扰很多人,人们开始寻求可以缓解高脂膳食。荷叶出现在很多具有减肥降脂功能的中药单复方制剂中,药食同源,那么荷叶能否降脂呢? 材料与方法 试验原料及处理。荷叶原料,粉碎机粉碎,过80目筛子。 实验方法。 (1)胆酸盐标准曲线 配制0.3mmol/L的胆酸钠、牛磺胆酸钠和甘氨胆酸钠溶液,做母液备用,取上述各溶液0、0.1、0.5、1.0、1.5、2.0和2.5mL到10mL的容量瓶中,加入磷酸缓冲溶液至2.5mL,再加入60%的硫酸溶液至10mL,在水浴锅中水浴20min后冰浴5min,在3
2、87nm处测定吸光度。以胆酸盐的浓度为横坐标,吸光度值为纵坐标,绘制胆酸盐的标准曲线。 (2)荷叶中的黄酮、生物碱与胆酸盐结合能力的比较 ①体外模拟内环境及与胆酸盐的结合的方法 取一定量的样品,加入1mL0.01mol/L的盐酸溶液,在培养箱中消化1h,用氢氧化钠溶液调节pH到6.3,然后加入4mL10mg/mL的胰酶,在培养箱中消化1h。在各个样品中分别加入4mL胆酸盐溶液,用培养箱振荡1h。转入离心管中,离心20min。取上清液胆酸盐进行分析。 ②PVPP去除荷叶黄酮后与胆酸盐的结合能力 分别称取0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0
3、g的PVPP,加入20mL荷叶浸提液,培养箱中振荡30min,转入离心管中,离心20min。取上清液进行体外内环境模拟与胆酸盐的结合。 ③石油醚去除荷叶生物碱后与胆酸盐的结合能力 在荷叶浸提液中加入等量的石油醚,萃取1h,收集萃取后的荷叶浸提液,重复三次得到一次、两次和三次处理液。取1mL上述处理液进行模拟与胆酸盐的结合。 结果与分析 三种胆酸盐的标准曲线回归方程 胆酸钠:y=11.80x+0.004R2=0.998 牛磺胆酸钠:y=17.66x+0.007R2=0.997 甘氨胆酸钠:y=15.62x+0.012R2=0.997 荷叶
4、中黄酮及生物碱与胆酸盐结合能力比较的结果与分析。 (1)荷叶粉末、荷叶水浸提液与胆酸盐的结合能力比较 荷叶粉末和荷叶水浸提液均能结合三种胆酸钠,但是荷叶水浸提液的结合能力强,荷叶具有一定降脂作用。 (2)PPVP去除荷叶黄酮后与胆酸盐结合能力的影响 荷叶浸提液中黄酮含量越高,其结合胆酸盐的能力越强,黄酮会影响胆酸盐在体内的代谢,从而起到降脂的作用。 (3)石油醚去除荷叶生物碱后与胆酸盐的结合能力 荷叶碱对荷叶浸提液结合胆酸盐的能力具有一定的良性影响,但是没有黄酮显著。 荷叶提取物对脂肪酸合酶抑制率的研究。 (1)脂肪酶活性的测定 加入
5、荷叶提取物的样品耗碱量明显减少,这证明了荷叶提取物对于脂肪酸合酶的活性是具备抑制作用的。 (2)荷叶黄酮与荷叶碱对脂肪酸合酶活性的影响 ①PPVP去除荷叶黄酮后对脂肪酸合酶活性的影响 氢氧化钠的消耗量随着荷叶黄酮的量减少而增加,荷叶黄酮抑制脂肪酸合酶的活性,荷叶黄酮的量越多,对脂肪酸合酶活性的抑制能力越强。 ②石油醚去除荷叶碱后对脂肪酸合酶活性的影响 经过石油醚萃取的样品的耗碱量低,可得荷叶生物碱影响脂肪酸合酶的活性。 研究表明荷?~黄酮是荷叶提取物具备降脂作用的主要因素,其机理为加强人体结合胆酸盐的能力和抑制FAS的活性,荷叶生物碱对荷叶
6、提取物的降脂作用也具备影响,但影响并不显著。
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