荷叶提取物降脂机理的研究.doc

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1、荷叶提取物降脂机理的研究　　近年来，由高脂造成的多种疾病困扰很多人，人们开始寻求可以缓解高脂膳食。荷叶出现在很多具有减肥降脂功能的中药单复方制剂中，药食同源，那么荷叶能否降脂呢？　　材料与方法　　试验原料及处理。荷叶原料，粉碎机粉碎，过80目筛子。　　实验方法。　　（1）胆酸盐标准曲线　　配制0.3mmol/L的胆酸钠、牛磺胆酸钠和甘氨胆酸钠溶液，做母液备用，取上述各溶液0、0.1、0.5、1.0、1.5、2.0和2.5mL到10mL的容量瓶中，加入磷酸缓冲溶液至2.5mL，再加入60%的硫酸溶液至10mL，在水浴锅中水浴20min后冰浴5min，在3

2、87nm处测定吸光度。以胆酸盐的浓度为横坐标，吸光度值为纵坐标，绘制胆酸盐的标准曲线。　　（2）荷叶中的黄酮、生物碱与胆酸盐结合能力的比较　　①体外模拟内环境及与胆酸盐的结合的方法　　取一定量的样品，加入1mL0.01mol/L的盐酸溶液，在培养箱中消化1h，用氢氧化钠溶液调节pH到6.3，然后加入4mL10mg/mL的胰酶，在培养箱中消化1h。在各个样品中分别加入4mL胆酸盐溶液，用培养箱振荡1h。转入离心管中，离心20min。取上清液胆酸盐进行分析。　　②PVPP去除荷叶黄酮后与胆酸盐的结合能力　　分别称取0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0

3、g的PVPP，加入20mL荷叶浸提液，培养箱中振荡30min，转入离心管中，离心20min。取上清液进行体外内环境模拟与胆酸盐的结合。　　③石油醚去除荷叶生物碱后与胆酸盐的结合能力　　在荷叶浸提液中加入等量的石油醚，萃取1h，收集萃取后的荷叶浸提液，重复三次得到一次、两次和三次处理液。取1mL上述处理液进行模拟与胆酸盐的结合。　　结果与分析　　三种胆酸盐的标准曲线回归方程　　胆酸钠：y=11.80x+0.004R2=0.998　　牛磺胆酸钠：y=17.66x+0.007R2=0.997　　甘氨胆酸钠：y=15.62x+0.012R2=0.997　　荷叶

4、中黄酮及生物碱与胆酸盐结合能力比较的结果与分析。　　（1）荷叶粉末、荷叶水浸提液与胆酸盐的结合能力比较　　荷叶粉末和荷叶水浸提液均能结合三种胆酸钠，但是荷叶水浸提液的结合能力强，荷叶具有一定降脂作用。　　（2）PPVP去除荷叶黄酮后与胆酸盐结合能力的影响　　荷叶浸提液中黄酮含量越高，其结合胆酸盐的能力越强，黄酮会影响胆酸盐在体内的代谢，从而起到降脂的作用。　　（3）石油醚去除荷叶生物碱后与胆酸盐的结合能力　　荷叶碱对荷叶浸提液结合胆酸盐的能力具有一定的良性影响，但是没有黄酮显著。　　荷叶提取物对脂肪酸合酶抑制率的研究。　　（1）脂肪酶活性的测定　　加入

5、荷叶提取物的样品耗碱量明显减少，这证明了荷叶提取物对于脂肪酸合酶的活性是具备抑制作用的。　　（2）荷叶黄酮与荷叶碱对脂肪酸合酶活性的影响　　①PPVP去除荷叶黄酮后对脂肪酸合酶活性的影响　　氢氧化钠的消耗量随着荷叶黄酮的量减少而增加，荷叶黄酮抑制脂肪酸合酶的活性，荷叶黄酮的量越多，对脂肪酸合酶活性的抑制能力越强。　　②石油醚去除荷叶碱后对脂肪酸合酶活性的影响　　经过石油醚萃取的样品的耗碱量低，可得荷叶生物碱影响脂肪酸合酶的活性。　　研究表明荷?~黄酮是荷叶提取物具备降脂作用的主要因素，其机理为加强人体结合胆酸盐的能力和抑制FAS的活性，荷叶生物碱对荷叶

6、提取物的降脂作用也具备影响，但影响并不显著。