丁香提取物抗菌机理的研究

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1、882009,Vol.30,No.03食品科学※基础研究丁香提取物抗菌机理的研究张慧芸1,2,孔保华2,*(1.河南科技大学食品与生物工程学院,河南洛阳471003,2.东北农业大学食品学院,黑龙江哈尔滨150030)摘要:本实验对丁香提取物的抗菌机理做一些初步的研究和探索。丁香提取物作用于大肠杆菌和单增李斯特菌后,检测细菌细胞ATP含量、K+和Na+含量、细胞裂解率的变化,结合透射电子显微镜图,分析丁香提取物的抑菌机理。结果表明,丁香提取物快速杀死大肠杆菌和单增李斯特菌的原因主要是破坏了其细胞膜。关键词:丁香

2、提取物;抗菌机理;大肠杆菌;单增李斯特菌StudyonAntibacterialMechanismofCloveExtractZHANGHui-yun1,2,KONGBao-hua2,*(1.CollegeofFoodandBioengineering,HenanUniversityofScienceandTechnology,Luoyang471003,China;2.CollegeofFoodScience,NortheastAgriculturalUniversity,Harbin150030,China

3、)Abstract:ThemodeofantibacterialactionofcloveextractagainstListeriamonocytogenesandE.coliwasstudied.IntracellularATPcontent,K+andNa+effluxandcelllysisweremeasuredandcelldamagewasvisualizedusingfluorescenceandtransmissionelectronmicroscopy.Inconclusion,thecel

4、ldeathofListeriamonocytogenesandE.colistrainscausedbyofcloveextractresultsfromcellmembranedamage.Keywords:cloveextract;antibacterialmechanism;E.coli;Listeriamonocytogenes中图分类号:R284.2文献标识码:A文章编号:1002-6630(2009)03-0088-04从天然产物中提取有关抗菌活性物质报道较多,但丁香购自哈尔滨市宝丰药店。有关它们

5、的抗菌机理的研究却很少[1]。李巧如等通过研单增李斯特菌L.monocytogenes(NICPBP54002)和大究丁香提取物与各类抗菌素间的相互作用来探讨其抗菌肠杆菌E.coli(ATCC25922)东北农业大学畜产品加工实机理,推测丁香提取物的抗菌机理可能是与氨基糖苷类验室。竞争性地抑制蛋白质的合成[2];孙峋等对迷迭香酸的抗营养肉汤和琼脂培养基用于培养大肠杆菌(37℃);TSB-YE菌机理进行研究,发现迷迭香酸可改变细菌细胞膜的通(胰酪胨大豆酵母浸膏肉汤)和TSA-YE(胰酪胨大豆酵母浸膏透性,导致还原

6、糖和蛋白质的渗漏而影响细胞代谢,通琼脂)培养基用于培养单增李斯特菌(37℃)。过抑制DNA聚合酶的活性而影DNA复制,从而发挥了丁香提取物的制备方法如下,首先将丁香于45℃鼓抑菌作用[3]。天然产物的抗菌机理多种多样,主要是基风干燥箱中烘干,超微细粉碎机捣碎后,称取50g粉碎于多种高选择性的效果,包括物理的、物理化学的和干粉于500ml烧瓶中,加入400ml95%食用酒精,置55生物化学的机理,通常是几种因素产生的积累效应。本℃恒温摇床(100r/min)12h,用WhatmanNo.2滤纸过滤,实验将在这方面

7、做一些初步的研究和探索。丁香提取物残渣加入200ml食用酒精重提12h后过滤。合并滤液在旋作用于大肠杆菌和单增李斯特菌后,检测细菌细胞ATP转蒸发仪(50℃)中浓缩,取出浓缩液进行真空干燥(40℃、含量、K+和Na+含量、细胞裂解率的变化,结合透射0.07MPa)得到丁香提取物,保存于-20℃冰箱中待用。电子显微镜图,分析丁香提取物的抑菌机理。1.2方法1.2.1ATP测定1材料与方法ATP的测定参照张东声[4]、Siragusa[5]和Naghmouchi[6]1.1材料与试剂方法,并稍加修改对数生长期的大肠

8、杆菌于1480×g离收稿日期:2008-01-09基金项目:国家公益性行业(农业)科研专项经费项目(2008326001)作者简介:张慧芸(1977-),女,讲师,博士,研究方向为畜产品加工。E-mail:zhanghuiyun21@163.com*通讯作者:孔保华(1963-),女,教授,研究方向为畜产品加工。E-mail:kongbh63@hotmail.com※基础研究食品科学2

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