祛斑养颜阿胶黄精丸治疗黄褐斑的实验研究.doc

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1、祛斑养颜阿胶黄精丸治疗黄褐斑的实验研究摘要目的：探讨祛斑养颜阿胶黄精丸治疗黄褐斑的疗效和作用机制。方法：根据文献采用黄体酮肌注法复制黄褐斑实验动物模型，随机分为6组：正常对照组、模型对照组、祛斑养颜阿胶黄精丸3个剂量组、3％氢醌阳性对照组，每组10只。动物皮肤局部分别外涂药物，连续30天。第31天，颈椎脱臼处死小鼠，背部去毛，迅速取肝组织及涂药部位的皮肤组织，测定SOO活性及MDA含量，并对皮肤组织进行HE染色及免疫组化橐色进行组织形态观察。结果：用药组均能使动物皮肤及肝组织MDA含量降低，SOD含量升高；但祛斑霜组较阳性组更明显，二者差异显著(P<0．05)。治疗组的病理组织形态学

2、改变均较模型组明显改善。结论：祛斑养颜阿胶黄精丸对黄褐斑有明显治疗作用。动物健康3月龄纯系昆明种雌性小鼠60只，体重25—359，华中科技大学同济医学院实验动物学部提供。动物养条件：每组小鼠按组别分笼饲养。在自然条件相同的情况下，常规饲食饮水，保持自然光照，无不良因素影响，饲养1周适应实验环境后开始进行实验，试荆硫化钠(NaS)：海凌峰化学试剂有限公可，临用前配成10％水溶液。超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)试剂盒：主要仪器DY89一Ⅱ型电动玻璃匀浆机：宁波新兰生物科技股份有限公司。系统生物显微镜：OLYMPUS；BX50F4北航病理图像分析系统。实验方法模型制作参照过伟峰

3、等¨．2’黄褐斑实验动物模型复制方法。小鼠2．5％戊巴比妥钠麻醉后，以0．4％的黄体酮注射液按0．029／l【g剂量小鼠后肢肌肉注射，每周6次，连续4周。正常组按O．029／kg肌肉注射灭菌注射用水。，2．2动物分组及给药取健康雌性小鼠60只，3个剂量组，随机分为6组，每组lO只。正常组、模型组、祛斑养颜霜3个剂量组(O．15、0．3、0．69／g)、3％氢醌阳性对照组(0．69／祛斑养颜阿胶黄精丸3个剂量治疗组分别在小鼠口服阿胶黄精丸，一日三次，连续用药30天。照组于造模当日开始，时间和疗程同祛斑养颜阿胶黄精丸治疗组。观察指标及检测用药30天后，颈椎脱臼处死小鼠，背部去毛，迅速取肝

4、组织及涂药部位的皮肤组织各2块，其中一块用冰冷的生理盐水冲洗，除去血液，滤纸吸干，切取肝脏及皮肤各0．59，分别放入2．Oml预冷生理盐水的烧杯中剪碎组织，再倒人试管中，以高速分散器lOt／rain匀浆两次，每次10秒；再以3500r／rain转速离心15分钟，取上清液。采用黄嘌呤氧化酶法，按试剂盒检测说明书方法测定SOD；采用硫代巴比妥酸法，按试剂盒检测说明书方法测定MDA值。同时，分离小鼠背部皮肤，取去毛的皮肤组织一块(2emx1cm左右)，10％多聚甲醛固定，常规石蜡包埋，切片，既染色，常规组织病理检测，光镜观察，计数上皮增生、真皮血管数及真皮炎细胞数；免疫组化染色，观察黑色素

5、细胞染色和数目(阳性细胞：无，计O分；<15％，计0．5分，<30％，计1分；>30％计2分)。讨论，黄褐斑中医称为。肝斑”，属祖国医学“黎黑斑”或“面尘”范畴。一般认为本病发生与肝、脾、肾三脏关系密切HJ。中医理论认为。肺主皮毛”，如《素问·六节脏象论>云：肺者、气之本、魄之处也，其华在毛，其充在皮，指出肺在体合皮毛。肺的功能正常时，肺阴充盈，肺气清宁，津液充足，才能敷布得行，使皮肤新陈代谢产物排出体外，使肌肤洁净，自然焕发光泽。故从古至今有许多医家、名方都有从肺论治，我们认为中医学色效相关、人与天地相应的理论是中医治疗学的特色之一，肺主皮毛，与白色对应，这正是我们组方的法则。祛班

6、养颜阿胶黄精丸具有润肌肤、去肝、驻颜悦色的作用。病理组织学观察显示其能明显改善组织细胞的病理改变，减轻上皮细胞增生，减轻真皮层小血管扩张，减少炎细胞数目；免疫组化检测显示其可明显减少上皮层内黑色素阳性细胞数及光密度。表明祛斑养颜阿胶黄精丸具有祛斑美白作用。