胰腺癌组织中热休克蛋白90α表达和临床意义.doc

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1、胰腺癌组织中热休克蛋白90a表达和临床［摘要］目的探讨胰腺癌组织中热休克蛋白(HSP90a)表达水平及临床意义，旨在探讨HSP90a在胰腺癌发生、发展中的作用机制。方法采用Elivsion免疫组织化学法检测40例胰腺癌和32例胰腺炎组织及30例癌旁组织标本中HSP90a蛋白的阳性表达情况，并分析40例胰腺癌组织的临床病理特征。结果胰腺癌、胰腺炎和癌旁组织中HSP90a蛋白的阳性表达率分别为70.0%、2&0%.16.7%,胰腺癌组织中HSP90a蛋白的阳性表达率明显高于胰腺炎组织及癌旁组织(P0.05)o

2、结论HSP90a参与了胰腺癌的发生、发展过程，其表达与胰腺癌的浸润、转移等恶性生物学行为关系密切，可作为判断胰腺癌预后的指标之一。［关键词］胰腺癌；热休克蛋白90a；免疫组织化学法;胰腺炎；临床病理特征［中图分类号］R735.9［文献标识码］A［文章编号］1673-7210(2013)05(c)-0066-03热休克蛋白(heatshockprotein,HSP)是一类进化上高度保守的细胞应激蛋白家族［1］,热休克蛋白90a(heatshockprotein90a,HSP90a)是HSP的亚型之一，研究证

3、实，其被发现在多种恶性肿瘤中出现异常表达，与肿瘤的发生、发展关系密切[2],研究发现，许多肿瘤细胞中如肾癌、胃癌、肝癌等组织中HSP90a表达均明显高于癌旁组织[3-4]o因此，探讨HSP90a在肿瘤中的发生机制成为当前研究的热点。本研究应用免疫组化方法检测胰腺癌、胰腺炎及癌旁组织中HSP90a的阳性表达情况，旨在探讨HSP90a在胰腺癌发生、发展中的作用机制，从而为胰腺癌的治疗及研究提供一定的理论依据。1资料与方法1.1一般资料选择2007年12月〜2012年12月在河南大学淮河医院普外科所获得的胰腺癌

4、组织标本40例，所有患者术前均经病理学检查确诊，均签署知情同意书。40例胰腺癌患者中，男22例，女18例；年龄49〜76岁，平均（58.4±7.2）岁。组织分化程度：高分化15例，中低分化25例；根据UICC标准TNM分期：I期7例，II期10例，III期14例，IV期9例。淋巴结转移情况：有淋巴结转移26例，无淋巴结转移14例。另选择癌旁正常组织30例为对照组，其中男16例，女14例，年龄46〜78岁；以及取同期胰腺炎组织32例，其中男18例，女14例，年龄48〜75岁；各组基线资料比较差异无统计学意义

5、（P>0.05）,具有可比性。1.2免疫组化方法1.2.1试剂采用Elivsion免疫组织化学法检测HSP90a蛋白的表达，Elivsion试剂盒、DAB显色试剂盒以及兔抗人HSP9a单克隆抗体均购自北京中山生物技术有限公司。操作程序按说明书进行。阴性对照以PBS替代一抗，用已知阳性标本作阳性对照。1.2.2具体操作步骤石蜡切片脱蜡，酒精梯度水化。将切片浸于沸腾的柠檬酸缓冲液中，温度保持在989以上，持续10〜20min；置室温冷却20min。用3%H202处理5min；PBS冲洗3次，每次3mino滴加

6、所需抗体，4匸冰箱内过夜。PBS冲洗3次，每次3min；甩干PBS液，加羊抗小鼠抗体同辣根过氧化物酶(HRP)复合物(B液)，室温放置30min,DAB显色，苏木精复染、梯度酒精脱水、二甲苯透明、中性树胶封片。1.3结果判断HSP90a免疫阳性物质定位于细胞质，凡细胞质出现明显的棕黄色颗粒者为阳性细胞。在每个标本随机选取400倍视野观察、计算阳性细胞数，参照Kapitanovic标准[5],釆用双评分半定量积分法进行评分：每个视野的染色得分为靶细胞阳性表达率与表达强度得分的乘积。0分为(-)；1〜4分为(

7、+)；5〜8分为(++)；>9分为(+++),取该标本5个视野的染色得分均值。1.4统计学方法全部数据的处理均采用SPSS12.0统计学软件进行分析，率的比较采用x2检验或精确概率法，以P0.05)o见表1O2.2胰腺癌组织中HSP90a蛋白表达的临床病理特征分析胰腺癌组织中HSP90a蛋白表达与胰腺癌患者的TNM分期、分化程度、淋巴结转移以及是否远处转移有关，差异有统计学意义(P0.05)o见表2。3讨论生物细胞在受热或其他理化因素作用下，可以合成高度保守的热休克蛋白,通常又称为应激蛋白(stressp

8、rotein),根据其同源程度及分子量大小可分为Hspll0、Hsp90、Hsp70、Hsp60、小分子Hsp(22〜23ku)及泛素等。Hsp在细胞代谢、信息传递、生长分化等过程中具有重要的调控作用，还参与肿瘤的发生发展，并与其生物学行为关系密切。热休克蛋白(heatshockprotein,HSP)通常与具有不同功能的多种蛋白质在细胞中形成复合体调节靶蛋白的活性和功能，但又不参与靶蛋白的组成，因此热休克蛋白又被认为是一种“