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时间:2020-03-15
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1、生物化学复习题第二章1、P61(3)指出下面pH条件下,各蛋白质在电场中向哪个方向移动,即正极,负极,还是保持原点? (1)胃蛋白酶(pI 1.0),在pH 5.0; (2)血清清蛋白(pI 4.9),在pH 6.0; (3)α-脂蛋白(pI 5.8),在pH 5.0和pH 9.0; 解答:(1)胃蛋白酶pI 1.0<环境pH 5.0,带负电荷,向正极移动; (2)血清清蛋白pI 4.9<环境pH 6.0,带负电荷,向正极移动; (3)α-脂蛋白pI 5.8>环境pH 5.0,带正电荷,向负极移动;
2、 α-脂蛋白pI 5.8<环境pH 9.0,带负电荷,向正极移动。 2、P614.何谓蛋白质的变性与沉淀?二者在本质上有何区别? 解答:蛋白质变性的概念:天然蛋白质受物理或化学因素的影响后,使其失去原有的生物活性,并伴随着物理化学性质的改变,这种作用称为蛋白质的变性。 变性的本质:分子中各种次级键断裂,使其空间构象从紧密有序的状态变成松散无序的状态,一级结构不破坏。 蛋白质变性后的表现:①?生物学活性消失; ②?理化性质改变:溶解度下降,黏度增加,紫外吸收增加,侧链反应增强,对酶的作用敏感,易被水解。
3、 蛋白质由于带有电荷和水膜,因此在水溶液中形成稳定的胶体。如果在蛋白质溶液中加入适当的试剂,破坏了蛋白质的水膜或中和了蛋白质的电荷,则蛋白质胶体溶液就不稳定而出现沉淀现象。沉淀机理:破坏蛋白质的水化膜,中和表面的净电荷。 蛋白质的沉淀可以分为两类: (1)可逆的沉淀:蛋白质的结构未发生显著的变化,除去引起沉淀的因素,蛋白质仍能溶于原来的溶剂中,并保持天然性质。如盐析或低温下的乙醇(或丙酮)短时间作用蛋白质。 (2)不可逆沉淀:蛋白质分子内部结构发生重大改变,蛋白质变性而沉淀,不再能溶于原溶剂。如加热引起蛋白质
4、沉淀,与重金属或某些酸类的反应都属于此类。 蛋白质变性后,有时由于维持溶液稳定的条件仍然存在,并不析出。因此变性蛋白质并不一定都表现为沉淀,而沉淀的蛋白质也未必都已经变性。、3、简述蛋白质的一、二、三、四级结构,并简述蛋白质二级结构的类型。蛋白质的四级结构★★★ 由两条以上具有独立三级结构的多肽链通过非共价键相互结合而成一定空间结构的聚合体,称为蛋白质的四级结构。只由一条多肽链构成,或由两条以上多肽链通过共价键连接而成的蛋白质,都不是具有四级结构,如胰岛素。构成四级结构中,每条具有独立三级结构的多肽链称为亚基。这些亚
5、基的结构可以是相同的,也可以不同。亚基间的聚合力也是依赖于盐键、氢键、疏水键作用和范德瓦力。但以前两者为主。各亚基常以α、β、γ、δ等命名,如血红蛋白A由两个α亚基和两个β亚基组成,常以α2β2表示。 蛋白质分子的一、二、三、四级结构对比★★★ 概念特点结构中的键及力一级结构指蛋白质分子中多肽链的氨基酸排列顺序。 一级结构是由基因上遗传密码的排列顺序决定的。 肽键主要是共价键,还有二硫键。 稳定二级结构的主要因素是氢键。另外还有肽键。 二级结构指多肽链中主链原子在各局部空间的排列分布状况,而不涉及各R侧链的空间排布。 主
6、要形式包括螺旋结构、B折叠和B转角等。基本单位是肽键平面或称酰胺平面。 三级结构是指上述蛋白质的α-螺旋、β-折叠以及线状等二级结构受侧链和各主链构象单元间的相互作用,从而进一步卷曲、折叠成具有一定规律性的三度空间结构。 三级结构包括每一条肽链内全部二级结构的总和及所有侧基原子的空间排布和它们相互作用的关系。 除了主键肽键外,还有副键,如氢键、盐键、疏水键和二硫键等以及范德瓦力的作用。 四级结构是指由两条以上具有独立三级结构的多肽链通过非共价键相互结合而成一定空间结构的聚合体。 四级结构中每条具有独立三级结构的多肽链称为亚
7、基。 非共价键。其中亚基中有盐键、氢键、疏水键作用和范德瓦力。但以前两者为主。 第三章1、P101(12)、12.什么是DNA变性?DNA变性后理化性质有何变化? 解答:DNA双链转化成单链的过程称变性。引起DNA变性的因素很多,如高温、超声波、强酸、强碱、有机溶剂和某些化学试剂(如尿素,酰胺)等都能引起变性。 DNA变性后的理化性质变化主要有:① 天然DNA分子的双螺旋结构解链变成单链的无规则线团,生物学活性丧失;② 天然的线型DNA分子直径与长度之比可达1∶10,其水溶液具有很大的黏度。变性后,发生了螺旋-线团转
8、变,黏度显著降低;③ 在氯化铯溶液中进行密度梯度离心,变性后的DNA浮力密度大大增加,故沉降系数S增加;④ DNA变性后,碱基的有序堆积被破坏,碱基被暴露出来,因此,紫外吸收值明显增加,产生所谓增色效应。⑤ DNA分子具旋光性,旋光方向为右旋。由于DNA分子的高度不对称性,因此旋光性很强,其[a] =
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