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时间:2020-03-14
《DNA复制与转录、翻译、PCR的区别.doc》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在行业资料-天天文库。
1、DNA复制(细胞内复制)转录翻译PCR技术(体外DNA复制技术)概念DNA复制是指DNA双链在细胞分裂以前进行的复制过程,复制的结果是一条双链变成两条一样的双链(如果复制过程正常的话),每条双链都与原来的双链一样DNA分子首先解开双链以DNA的一条链为模板按照碱基互补配对原则合成RNA的过程以mRNA为模板,以tRNA为运载工具.合成具有一定氨基酸顺序的蛋白质的过程K
2、S
3、5UPCR技术是一项在生物体外复制特定DNA片段的核酸合成技术。场所细胞核、线粒体、叶绿体细胞核、线粒体、叶绿体K
4、S
5、5U细胞质(核糖体)K
6、S
7、5U体外原料4种
8、游离脱氧核苷酸4种游离核糖核苷酸K
9、S
10、5U20种游离氨基酸K
11、S
12、5U4种游离脱氧核苷酸模板DNA分子中的两条链DNA中的一条链K
13、S
14、5UmRNAK
15、S
16、5U目的基因(或目的基因的两条链)酶解旋酶、DNA聚合酶等(DNA连接酶)K
17、S
18、5U(解旋酶、RNA聚合酶等不要求氨基酰tRNA合成酶、氨肽酶等K
19、S
20、5U耐热DNA聚合酶(Taq酶)能量ATPATPATP不需要ATP,能量来自外界加热过程1、解旋:在解旋酶作用下,利用ATP释放的能量解开双螺旋;2、在DNA聚合酶的作用下,按照碱基互补配对原则,把游离的脱氧核苷酸连接到模板链上
21、,并使脱氧核苷酸之间过磷酸二酯键连接;3、沿着模板链不断延伸,最终形成两个一模一样的DNA分子。1、解旋:在解旋酶作用下,利用ATP释放的能量解开双螺旋;2、以解开的一条DNA链为模板,按碱基互补配对原则,游离的核糖核苷酸与脱氧核苷酸配对,3、核糖核苷酸间通过磷酸二酯键连接成RNA(mRNA,tRNA,rRNA)mRNA从核孔进入细胞质,与核糖体结合,从起始密码子(AUG)开始翻译。tRNA一端携带氨基酸进入核糖体.另一端的反密码子与mRNA上的密码子配对,两氨基酸间形成肽键。核糖体继续沿mRNA移动,每次移动一个密码子,至终止密码结
22、束,肽链形成1、变性:即加热至高温使得目的基因的双链打开(解旋,但不需要解旋酶);2、退火(复性):降温使得解开的两条链分别与引物结合;3、延伸:在Taq酶的作用下,按碱基互补配对原则,脱氧核苷酸之间过磷酸二酯键连接成新链。重复上述三步,就能获得大量的目的基因。模板去向复制后,模板链与新形成的子链形成双螺旋结构转录后,模板链与非模板链重新形成双螺旋结构分解成核糖核苷酸扩增后,模板链与新合成的子链形成具有双螺旋结构的目的基因特点1、边解旋边复制;2、半保留复制边解旋边转录一条mRNA可与多个核糖体结合翻译成多条相同的多肽链1、半保留复制
23、;2、快速大量复制产物形成两个完整的DNA分子三种单链RNA蛋白质(多肽链)短时间内形成大量的目的基因整理:李秀志编号:DNA复制、转录、翻译以及PCR技术比较二、在基因过程的各种检测和鉴定:1、标记基因:为了检测目的基因(目的基因表达载体)是否导入受体细胞;2、用DNA分子杂交法:检测目的基因是否插到染色体DNA上(工具:基因探针)3、用DNA分子杂交法:检测目的基因是否转录出mRNA(工具:基因探针);4、用抗原—抗体杂交法:检测mRNA是否翻译出蛋白质;5、鉴定:个体水平鉴定:比如抗虫实验。
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