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时间:2020-03-14
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1、小条训练课题3酵母细胞的固定化1.固定化酶常采用化学结合法和物理吸附法,而固定化细胞则常采用包埋法。2.制备固定化酵母细胞的基本步骤是:酵母细胞的活化―→配制CaCl2溶液―→配制海藻酸钠溶液―→海藻酸钠与酵母细胞混合―→固定化酵母细胞。3.配制海藻酸钠溶液浓度过高,则难以形成凝胶珠;若浓度过低,则固定的酵母细胞少,影响实验效果。4.配制海藻酸钠溶液应小火加热或间断加热。5.固定化酶和固定化细胞技术既实现了对酶的重复利用,降低了成本,又提高了产品质量。1.酶能加快化学反应速率,但溶液中的酶难以回收,不能利用。要想既降
2、低生产成本,又不影响产品质量,该如何解决这一问题?2.固定化酶和固定化细胞一般采用什么方法?为什么?3.从操作角度来考虑,你认为固定化酶技术与固定化细胞技术哪一种方法更容易?哪一种方法对酶活性的影响更小?4.固定化细胞固定的是一种酶还是一系列酶?如果想将微生物的发酵过程变成连续的酶反应,应该选择哪种方法?5.如果反应物是大分子物质,又应该采用哪种方法?为什么?[特别提醒](1)固定化细胞使用的都是活细胞,在反应时需要适宜的生存条件。(2)由于被固定的细胞保证了完整性,酶的环境改变较小,所以对酶活性影响不大。6、制备固
3、化酵母细胞的步骤有哪些?7.在配制海藻酸钠溶液时,用小火加热并不断搅拌的目的是什么?-3-小条训练7.为什么海藻酸钠溶液要冷却后才能加入酵母细胞?9.将凝胶珠在CaCl2溶液中浸泡30min的作用是什么?[例1]下列关于固定化酶和固定化细胞的叙述,正确的是( )A.固定化细胞技术在多步连续催化反应方面优势明显B.在固定化酶的应用中,要控制好pH、温度和溶解氧C.利用固定化酶降解水体中有机磷农药,需提供适宜的营养条件D.利用固定化酵母细胞进行发酵,糖类的作用只是作为反应底物[例2].下列关于固定化酶技术的说法,正确的
4、是( )A.固定化酶技术就是固定反应物,使酶依附着载体围绕反应物旋转的技术B.固定化酶的优势在于能催化一系列的酶促反应C.固定化酶中的酶无法重复利用D.固定化酶是将酶固定在一定空间的技术解析:选D 固定化酶是利用物理或化学方法将酶固定在一定空间内的技术,其优点是酶被固定在一定装置内可重复利用,不足是无法催化一系列酶促反应。2.分析下图,与用海藻酸钠作载体制备固定化酵母细胞相似的是( )解析:选D A是吸附法,B是化学结合法,C、D是包埋法,C一般是将酶包埋在细微网格里,D是将酶包埋在凝胶中。制备固定化酵母细胞采用
5、包埋法,即将酵母菌包埋在海藻酸钠制成的凝胶中,与D相似。[例3].下列说法错误的是( )A.固定化酶和固定化细胞的技术方法包括包埋法、化学结合法和物理吸附法B.固定化酶更适合采用化学结合法和物理吸附法C.由于细胞个大,而酶分子很小,因此细胞多采用物理吸附法固定D.反应物是大分子物质时应采用固定化酶解析:选C 由于细胞个大,酶分子很小,个大的细胞难以被吸附或结合,而个小的酶容易从包埋材料中漏出。因此,细胞多采用包埋法固定,酶更适合采用化学结合法和物理吸附法固定。[例4]下列有关固定化酶和固定化细胞的叙述,正确的是(
6、 )-3-小条训练A.可用包埋法制备固定化酵母细胞B.反应产物对固定化酶的活性没有影响C.葡萄糖异构酶在固定前后专一性不同D.固定化细胞可以催化各种反应底物的一系列反应归纳拓展[例5]根据下面制备固定化酵母细胞实验的流程回答问题:酵母细胞活化→配制CaCl2溶液→配制海藻酸钠溶液→海藻酸钠溶液与酵母细胞混合→固定化酵母细胞(1)在________状态下,微生物处于休眠状态。活化就是让处于休眠状态的微生物恢复________状态。活化前应选择足够大的容器,因为酵母细胞活化时________________。(2)影响实
7、验成败的关键步骤是________________________________________。(3)如果海藻酸钠浓度过低,形成的凝胶珠所包埋的酵母细胞数目________。(4)观察形成的凝胶珠的颜色和形状:如果颜色过浅,说明______________;如果形成的凝胶珠不是圆形或椭圆形,说明________________________________________。(5)制备固定化酶不宜用包埋法,为什么?__________________________________________________
8、_______________________________________________________。易错提醒(1)选用的干酵母要具有较强的活性,而且物种要单一。(2)溶解CaCl2时勿用自来水,以免杂质离子影响实验结果。(3)固定化酵母细胞时,应将海藻酸钠与酵母细胞的混合液用注射器缓慢滴加到CaCl2溶液中,而不是注射,以免影响凝胶
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