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时间:2020-03-14
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1、特种蛋白市场中心1免疫比浊法检测抗链球菌2免疫比浊法检测抗链球菌【项目简介】A组链球菌的代谢产物之一,可以溶解人红细胞,具有很强的抗原性。【抗链球菌溶血素O】机体因咽炎、扁桃体炎、猩红热、丹毒、脓皮病、风湿热等感染A组链球菌后,可产生链球菌溶血素O抗体,即“Anti-StreptolysinO(ASO)”。。3【反应原理】样本中的ASO与超敏化的抗ASO抗体胶乳颗粒试剂反应,形成免疫复合物,在波长570nm处检测其浊度变化,其变化程度与样本中的ASO含量成正比。4【试剂构成】试剂1(R1):氨基乙酸缓冲液试剂2(R2):乳胶颗粒
2、超敏化的链球菌素O胶乳颗粒0.12w/v%5【样本指标】新鲜血清。样本稳定性:2~8℃保存稳定2天;-20℃保存更长时间。样本中胆红素≤60μmol/L、血红蛋白≤12mg/dL、肝素≤20IU/mL、EDTA≤300μM时未观察到明显干扰。6【操作方法】1.用去离子水将ASO校准液按倍比稀释,以水为零点,建立工作曲线。校准品另购,建议使用RANDOX或其它有溯源性的校准品。稀释方法如下:12345原液:水水1:31:12:1原液浓度0.00X/4X/22X/3X72.参数设置(biobase):主/副波长:578nm/700n
3、m比色杯光径:1.0cm温度:37℃分析类型:终点法3.自动分析:自动化生化分析仪操作程序的设置按手工操作法的设置,根据各实验室拥有的分析仪型号及操作说明书而设置。4..适合仪器:BIOBASE系列分立式全自动生化分析仪、日立、OLYMPUS东芝等全自动生化分析仪【计算方式】样本ΔA样本ASO浓度=×标准浓度标准ΔA8R1:试剂1R1:100µlS:校准品或U:样品3µl预孵预时间延迟时间读数时间5min1min4min读取吸光度A1读取吸光度A2计算ΔA操作过程R2:试剂2R2:170µl9【性能指标】1.试剂空白吸光度≤1.
4、0000,(570nm,lcm光径)。2.精密度:重复性≤10%,批间相对极差R≤10%。3.准确度:相对偏差为≤10%。4.线性范围:0~1200IU/mL,r≥0.990。5.稳定性:本试剂在2℃~8℃、无腐蚀性气体的避光环境中贮存12个月。10【参考范围】小于166IU/mL【临床意义】用于检测人体血清中抗链球菌溶血素O(ASO)的含量。机体被链球菌感染后可产生抗链球菌溶血素O抗体,(ASO)此抗体是链球菌的外毒素。检测ASO有助于诊断由溶血性链球菌引起的疾病如类风湿、急性肾小球疾病、猩红热和扁桃体炎等疾病。11【注意事项
5、】1.试剂含有叠氮化钠(有毒性),误入眼、口中或沾染到皮肤上请立即用水彻底冲洗,必要时到医院就诊。叠氮化钠可以和铜、铅等金属发生强烈的反应生成叠氮化金属,故废弃时请充分稀释废液和冲洗排水管,以免在排水管中有残留。2.不同批号试剂不能混用,更换试剂批号时,请重新定标!3.试剂开封后应按指定方法密闭储存。4.接触过检测标本的试管等器具应按医疗废弃物处理办法进行处置。12【参考文献】[1]全国临床检验操作规程(NationalGuidetoClinicalLaboratoryProcedures)(第3版)(ThirdEdition)
6、——中华人民共和国卫生部医政司,叶应抚、王毓三、申子瑜。[2]《现代临床生化检验学》,张秀明、李健斋。[3]《实用医学检验学》,朱忠勇。13免疫比浊法检测C反应蛋白14免疫比浊法检测C反应蛋白【项目简介】C反应蛋白(C-reactiveprotein,CRP),1930年Tillet和Francis在急性大叶性肺炎患者血清中发现能在钙离子存在时与肺炎球菌C多糖起沉淀反应而得名,是人类重要的急性期反应蛋白,急性期浓度可升高上千倍,循环中的CRP半衰期为19小时。人类CRP是由肝脏产生,由五个相同的亚基依靠非共价键形成的环状五聚体,
7、这一特征性结构使其归类于五聚素(一组具有免疫防御特性的钙结合蛋白)家族。低等动物同样存在CRP,如在鲎、河蚌等中也发现过,但并不一定起急性期反应蛋白的作用。CRP特征反应是能在钙离子存在的条件下特异性结合磷酸胆碱基团。通过与配体(凋亡与坏死的细胞,或入侵的细菌、真菌、寄生虫等的磷酰胆碱)结合,激活补体和单核吞噬细胞系统,将载有配体的病理物质或病原体清除。识别外来物质,激活补体系统。增强条理作用,增强吞噬细胞吞噬作用与血小板激活因子(RAF)结合,降低炎症反应。与染色体结合,消除坏死组织里的细胞DNA。。15【反应原理】样本中的C
8、RP与超敏化的抗CRP抗体胶乳颗粒试剂反应,形成免疫复合物,在波长570nm处检测其浊度变化,其变化程度与样本中的CRP含量成正比。16【试剂构成】试剂1(R1):氨基乙酸缓冲液试剂2(R2):乳胶颗粒超敏化的CRP抗体液0.20w/v%17【样本指标】新鲜血清
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