蝴蝶兰的组织培养研究.doc

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1、蝴蝶兰的组织培养研究【摘要】自古以来，人们都有发现美、欣赏美的艺术追求。花卉等具有“美”的特质的植物理所当然的成为了养殖、欣赏的对象。在儿十年以前，我国人民尚徘徊在生存的边缘，无暇追求美丽事物，随着我国社会经济的发展，人们生活水平的也逐渐提升，人们越来越重视生活中的美。花卉作为人们欣赏美的载体，不论是各类庆典、宴会，还是环境绿化建设等都是不可或缺的。蝴蝶兰的花形奇特，类似蝴蝶，色彩艳丽鲜明，花期持久，是最适合作为观赏植物的花种之一。【关键词】蝴蝶兰组织培养培育材料培育方法激素配方蝴蝶兰具有极高的观赏价值和经济价值，是当今国际上商业价值最大的热带兰花之一。但因为蝴蝶兰

2、属于单茎性气生兰，其再生能力不强，卩、I耍进行分株繁殖显得界常困难。蝴蝶兰的种子十分细小，在一般的自然条件下很难发芽，这也导致其增殖系数极低。虽然其有较高的观赏价值，但是因为不易养殖，所以在市场上的蝴蝶兰显得极为珍贵。为了提高蝴蝶兰的繁殖力，相关的专家人员利用组织培养法进行蝴蝶兰的快速繁殖，并取得了成功。蝴蝶兰的组织培养程序为：选取外植体一一诱导形成不定芽一一增殖不定芽一一分化小植株一一生根壮苗培养一一温室移栽。这整个程序都是根据蝴蝶兰的牛长习性而设计的，对蝴蝶兰的培育有着显著效果，解决了以前在蝴蝶兰工厂化快速繁殖中遇到的技术问题，增加了蝴蝶兰的成活率。本文就蝴蝶兰

3、的组培方案进行了分析，首先阐述了蝴蝶兰组织培育中必须耍准备的材料，然后阐述了蝴蝶兰组织培育的方法。期望通过本文的分析，能够让读者对蝴蝶兰的组培方案有更加深刻的认识。1蝴蝶兰组织培育中必须要准备的材料在蝴蝶兰组织培育中可以作为外植体的有蝴蝶兰的嫩茎、花梗、叶片、茎段、茎尖等。必须要确保所取外植体的原蝴蝶兰没有虫害、没有病害，生长状态要极好。本文所选蝴蝶兰是口瓣红唇蝴蝶兰。若取花梗作为材料,则要剪去上端无须的花桢，剪成长度为五至十厘米的小段。若取叶片为材料，则要先取花梗进行诱导，当获得蝴蝶兰无菌苗后，待其成长为2叶苗时，再取其叶片或是茎尖作为培育材料。2蝴蝶兰组织培育的

4、方法2.1不同外植体的消毒不同外植体的消毒可分为三个步骤，下面就对这三个步骤进行仔细分析。(1)第一步：在取得蝴蝶兰的培育材料以后，需耍先对其进行清理,去除多余的部分，将主要的部分清洗干净。然后将材料剪成适当大小，以能放入灭菌容器中的大小为宜。将剪好的培育材料放在水龙头下冲洗，冲洗的时间要根据材料的清洁程度而定，可能是几分钟，也可能是几小时。在污染严重的情况下，流水清洗是最有效的清洁方式。在清洗的过程中，可以适当加入少量的洗衣粉，洗衣粉能够很容易的去除附着在材料上的污物，尤其是脂质性的污物。再用自来水将洗衣粉水清洗干净。为了使清洗的效果更好，还可以适当的加入表面活性

5、物质一一“吐温”。(1)第二步：培育材料的表面浸润灭菌。首先要准备好灭菌的器械,比如玻璃棒、烧杯、无菌水、70%酒精、消毒液等等。先在烧杯中倒入消毒溶液，并加几滴消毒助剂Tween-80,在消毒的过程中要不断的用玻璃棒进行轻轻搅动，这样有助于消毒液与培育材料的充分接触，能够驱除气泡,使消毒更为彻底。在设计的消毒时间结束之前的一到两分钟，就可以将消毒液慢慢倾入另一个烧杯，切记不要将材料也倒入另一个烧杯。在消毒液倒完以后，立即注入无菌水进行涮洗，涮洗结束以后，再用自来水冲洗30~60mino接着在超净工作台上，将已经切割好的材料用准备好的酒精清洗半分钟时间，再用无菌水进

6、行冲洗，完成以后，如果所取材料是叶片，则将其放入0.l%HgCT溶液中浸泡八到十二分钟左右的时间，再用无菌水冲洗五到八次；如果所取材料是花梗，则将其放入0.l%HgCI溶液屮浸泡十到二十分钟，再使用无菌水冲洗三到五次。（3）第三步：使用无菌水涮洗。无菌水涮洗的主要冃的是免除消毒剂对材料细胞的副作用，在使用无菌水涮洗的过程中，必须要坚持涮洗五到十次，每次清洗都要确保持续时间在30s以上。其中必须要注意的儿点:1）在酒精屮浸泡的时间要短，避免因浸泡过久导致材料失绿；2）对于老熟材料，比如种子等，要在酒精中浸泡久一点；3）升汞的渗透力较弱，可以多浸泡一些时间；4）在消毒液

7、中加入浓度在0.08%〜012%之间的Tween-20或是Tween-80,能够降低植物材料表面的张力，使消毒效果更加明显。2.2培养基激素配方初代培养的目的是为了诱导类不定芽（PLB）或丛生芽，基本培养基为2/3MS培养基。在培养基中均要加入蔗糖、琼脂、碳粉等，蔗糖的加入量为20mg.L-1,琼脂的加入量为5mg.L-1,碳粉的加入量为ACl.Omg.IT。接种之后，将其放入暗培养室25-30小时，再改为光照培养，此时温度应该控制在23~25°C之间，口光灯照明的强度为2000Lux,光照时间设定为10h/do其具体配方如下表1所示。一般情况下，30小时以后，