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1、IHSS定性提取方法称取过2mm筛风干土样100g加入玻璃瓶(2.5L玻璃瓶①)中,按土水比1:1加入1mol/L的HCl(如仍冒泡则按1:2),放置1h,用0.1mol/L的HCl调至最终土水比1:10.室温摇动玻璃瓶1h(10min/次),将混合液倒入大离心管中,低速离心,上清液(FA1)倒入FA瓶(2.5L塑料瓶)中备用.(1D)碱提步骤：用0.1mol/L的NaOH将沉淀冲到玻璃瓶①中,并调至最终土水比1:10，用1mol/L的NaOH调节pH=13~14,立即充氮气(1min)并盖严.保持氮气条件下(盖严)摇动玻璃瓶,1h或0.
2、5h一次,持续12h后静置过夜.次日低速离心,上清液倒入HE(HA+FA2)瓶(2.5L玻璃瓶②)中,用6mol/L的HCl将HE瓶中液体酸化(pH=1.0).碱提步骤(下划线)重复3次.重复3次后将沉淀水洗至适当容器中,50℃烘干,以提取Hu备用(Hu提取完毕).絮凝步骤：第三次酸化后的HE放置12~16h,用虹吸法将上清液(FA2)吸入FA瓶,之后低速离心,上清液为FA2(虹吸残留),将上清液倒入FA瓶中(FA提取完毕),沉淀为HA.氮气条件下在大离心管中用最少量(记录所用体积)0.1mol/L的KOH溶解HA,之后用适量1mol/L
3、的KOH调节pH=13~14.加入计算好的固体KCl(KCl用量见附表1),使K+浓度为0.3mol/L(如无絮凝则需微量添加),静置1h后,将溶液移至高速离心管,高速离心,保留上清液,弃掉悬浮物.酸洗步骤：搅拌条件下用6mol/L的HCl调节上清液pH=1.0,放置12~16h,高速离心后弃掉上清液.在高速离心管中用30ml的HCl(0.1mol/L)+HF(0.3mol/L)【8.3mLHCl+24.87mLHF→1000mL】浸泡HA,室温下振荡过夜后高速离心,弃掉上清液.酸洗步骤(斜体)重复3次.必要的话，洗至灰分含量小于1%.用
4、水将沉淀搅拌成泥状,之后电渗析直到蒸馏水中无Cl-(AgNO3检测),冻干备用(HA提取纯化完毕).注解注1:①和②为玻璃瓶组号注2:室温条件为25℃注3:低速离心为4000r/min,15min,离心管为大离心管,250ml注4:高速离心为11000g,15min,离心管为高速离心管,30ml所需药品1、盐酸HCl:0.1mol/L（8.3mL→1000mL）,1mol/L,6mol/L（500ml→1000mL）2、氢氧化钠NaOH:0.1mol/L,1mol/L3、固体KCl4、氢氧化钾KOH:0.1mol/L（5.6g→1000m
5、L）5、氢氟酸HF:0.3mol/L（24.87mL→1000mL）HCl(0.1mol/L)+HF(0.3mol/L)【8.3mLHCl+24.87mLHF→1000mL】附表10.1MKOH=0.4L0.1MKOH=0.5L0.1MKOH=0.6L0.1MKOH=0.7L1MKOH(L)KCl(g)1MKOH(L)KCl(g)1MKOH(L)KCl(g)1MKOH(L)KCl(g)0.0104.0880.0105.2080.0106.3280.0107.4480.0203.6960.0204.8160.0205.9360.0207.0
6、560.0303.3040.0304.4240.0305.5440.0306.6640.0402.9120.0404.0320.0405.1520.0406.2720.0502.5200.0503.6400.0504.7600.0505.8800.0602.1280.0603.2480.0604.3680.0605.4880.0701.7360.0702.8560.0703.9760.0705.0960.0801.3440.0802.4640.0803.5840.0804.7040.0900.9520.0902.0720.0903.192
7、0.0904.3120.1000.5600.1001.6800.1002.8000.1003.9200.1100.1680.1101.2880.1102.4080.1103.5280.1200.8960.1202.0160.1203.1360.1300.5040.1301.6240.1302.7440.1400.1120.1401.2320.1402.3520.1500.8400.1501.9600.1600.4480.1601.5680.1700.0560.1701.1760.1800.7840.1900.3920.2000.000（1
8、）将粗HM烘半干、称重，均匀分成4份，置于离心管（100mL）中，加入0.5%(v/v)的HF-HCI混合液约50ml,用玻璃棒搅匀,在恒温（水浴）振荡机上振荡12小时(25℃,145-175
