Ric8蛋白等在寡孢节丛孢中的功能初步研究.pdf

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1、分类号０９３密级公开ＵＤＣ编号《若Ａ聲巧女研《４緣化俗Ａ胚目Ｒｉｃ８巧白等在真巧巧丛抱中的功能巧步研究、，）省部共建云南生物资源保护学院（所、中Ｉ：与利用国家軍点巧验室微生物学专业名称研巧生姓名冯会华学号１２０１３０００９１５导师姓名杨金奎职称硏究员２０１６年５月论文独创性声明及使用授权本论文是作者在导师指导下取得的研究成果。除了文中特别加Ｌ：Ａ标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研巧成果，不存在副窃或

2、抄袭行为一。与作者同工作的同志对本研究所做的任何贡献均己在论文中作了明确的说明并表示了谢意。现就论文的使用对云南大学授权如下：学校有权保留本论文（含电子版），也可Ｗ采用影印、缩印或其他复制手段保存论文；学校有权公布论文的全部或部分内容，可将论文用于查飼或借阅服务；学校有权向有关机构送交学位论文用于学术规范审查、社会监督或评奖；学校有权将学位论文的全部或部分内容录入有关数据库用于检索服务。（内部或保密的论文在解密后应遵循此规定）么〇＇＞寺＇１叛日心？研究生签名；导师签名：

3、期：云韵大学禪ｉ；毕歧途了摘要本论文Ｗ前期研巧寡抱节丛袍ＲＧＳ１转录组数据中表达量有显著差异的５个基因ＡＯＬｓ０００８３ｇｌ２７、ＡＯＬｓ００００７ｇｌ７８、ＡＯＬｓ０００８０ｇ４１２、ＡＯＬｓ０００７６ｌ８、＿＿ｇ＿＿ＡＯＬｓ００２１５ｇ３３８Ｒｉｃ８为研究对象，利用同源重组技术得到５个基因的敲除突＿（）变菌株，通过比较野生型菌株与敲除菌株在表型和生理生化特征上的差异来研究一其在寡抱节化抱中的所起到的作用。其中，Ｒｉｃ８蛋白是个保守的鸟嚷吟交换，ｃ８因子，主要存在于动物和

4、真菌中在植物中还没有被报道。Ｒｉ蛋白是Ｇ蛋白一ｏ。ｃ８信号通路中的个组成部分，通过正调控Ｇｔ亚基来控制下游的信号通路Ｒｉ蛋白在许多丝状真菌的生长发育中有着重要的作用，然而在捕食线虫真菌中的功Ｒ一能还未见报导ｉｃ８５个基因的功能进行了个。本文对寡袍节丛抱基因组中等初步的研究和探讨。主要研究结果：１Ｌ０８３ｌ２７ｌｒｔ．ＡＯｓ００与ＡＯＬｓ００００７７８为Ｇａｓ＾ｌｉｋｅｏｅｉｎ，它们含有功ｇ＿ｇｐ＿能未知的ＤＵ巧口９结构域（ＩＰＲ０２１４７６。ＡＯＬｓ０００８０ｇ４１２含有

5、两个）＿－ＡＯＬＣａｒｂｏｈｄｒａｔｅｂｉｎ出ｎｇＷＳＣＩＰＲ００２８８９结构域。ｓ０００７６ｇｌ８蛋白含有２０２ｙ（）＿个氨基酸ｅｒｒｏｓｃａｎ。ＡＯＬｓ００２１５３３８，通过Ｉｎｔ没有预测到保守的结构域蛋白ｐ＿ｇ含有Ｇｕａｎｉｎｅｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅｅｘｃｈａｎｅｆａｃｔｏｒ（Ｒｉｃ８）ＩＰＲ０１９３１８结构域。聚类分析ｇ（）－ｌＡＯＬ表明ａｓｌＵｋｅｒｏｔｅｉｎＡＯＬｓ０００８３２７ｓ００００７ｌ７８在产生粘性捕食，Ｇ和ｇ器ｐ＿ｇ＿官的寡袍节丛抱和坚粘抱

6、单顶抱中有显著的扩增现象。２－．通过酵母法和虹扣Ｓｉｏｎ法进行载体构建，得到了５个蛋白编码基因的阳ｅｍｂ一性转化子。通过ＰＣＲＷ及Ｓｏｕｔｈｌｏｔ进行反复验证之后，分别选取其中的个阳性转化子，进行表型和生理生化等方面的研究，来初步探究这五个基因在寡抱节化抱生长发育中的功能。３．对敲除苗株进行表型Ｗ及生理生化等方面的比较，结果表明，Ｒｉｃ８蛋白参与了菌丝的生长与分化、产抱、捕器形成及抗逆性等途径的调控，其中对捕器形成。、产抱数量Ｗ及抗逆性的影响最大其余四个敲除菌株对生长速率和抗逆性

7、的影响不大，但Ｗ上基因的敲除，导致菌株的产袍数量显著下降，同时捕食器官Ｉ五南大学顿±毕业论义形成的数量和杀线虫能为也明显下降。本文的创新点：本研巧构建了寡抱节丛抱中的Ｒｉｃ８等五个蛋白编码基因的敲除突变株，进一步的分析表明Ｒｉｃ８等五个蛋白对寡袍节丛抱的生长、产抱、抗逆性、产捕器和杀线虫的活性等有不同程度的影响。关键词：寡跑节化抱，Ｒｉｃ８蛋白，基因敲除，突变菌株，捕食器官，表型分析１五南大学硬；毕业论文乂ｂｓ化ａｃｔ虹ｔｈｉｓｓｔｕｄｙ，ｆｉｖｅ

8、ｅｎｅｓ（ＡＯＬ＿ｓ０００８３ｇ１２７，ＡＯＬｓ００００７ｌ７８，ｇ＿ｇＡＯＬｓ０００８０４１２ＡＯＬｓ０００７６ｌ８ａｎｄＡＯＬｓ００２１５３３８ｉｎＡｒｔｈｒｏｂｏｔｒｙｓ，＿）＿ｇｇ＿ｇｏｌｉｇｏｓｐｏｒａｗｈｉｃｈｈａｄｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｓｉｎｔｈｅＲＧＳｌｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｏｍｉｃａｎａｌｙｓｉｓｗｅｒｅｃｈｏｓ