辅酶Q10对慢性应激大鼠实验性牙周炎牙龈组织MMP-9和血清CTX-1表达的影响.pdf

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1、授予单位代码10089学号或申请号13808HebeiMedicalUniversity在职科学学位辅酶Qio对慢性应激大鼠实验性牙周炎牙龈组织MMP-9和血清CTX-1表达的影响学位申请人:崔栓龙导师:薛毅教授专业:口腔临床医学二级学院:白求恩国际和平医院2015年3月河北医科大学学位论文使用授权及知识产权归属承诺本学位论文在导师(或指导小组)的指导下,由本人独立完成。本学位论文研究所获得的研究成果,其知识产权归河北医科大学所有。河北医科大学有权对本学位论文进行交流、公开和使用。凡发表与学位论文主要内容相关的论文,第一署名为单位河北医科大学,试验材料、原始数

2、据、申报的专利等知识产权均归河北医科大学所有。否则,承担相应法律责任。研究生签名师签笔级学院领导.'I^河北医科大学研究生学位论文独创性声明本论文是在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果,除了文中特别加以标注和致谢等内容外,太中不包含其他人已经发表或撰写的研究成果,指导教师对此进行了审定。本论文由本人独立撰写,文责自负。研究生签名ti导师签章年/y月W日目录中文摘要……………………………………………………………………1英文摘要……………………………………………………………………4研究论文辅酶Q10对慢性应激大鼠实验性牙周炎牙龈组织MMP-9和血清CTX-1

3、表达的影响前言……………………………………………………………………8材料与方法……………………………………………………………8结果……………………………………………………………………14附图……………………………………………………………………16附表……………………………………………………………………21讨论……………………………………………………………………23结论……………………………………………………………………28参考文献………………………………………………………………29综述慢性应激、辅酶Q10与牙周炎……………………………………33致谢………………

4、…………………………………………………………41个人简历……………………………………………………………………42中文摘要辅酶Q10对慢性应激大鼠实验性牙周炎牙龈组织MMP-9和血清CTX-I表达的影响摘要目的:通过建立大鼠慢性应激模型,用辅酶Q10进行干预,观测大鼠实验性牙周炎发病过程,通过免疫组化的方法,对大鼠牙龈组织中基质金属蛋白酶(matrixmetalloproteinasesMMPs)、和酶联免疫吸附试验的方法对大鼠血清中Ⅰ型胶原交联羧基末端肽(C-terminaltypeIcollagentelopeptide,CTX-I)进行测定,探讨辅酶Q10

5、对慢性应激大鼠实验性牙周炎发病过程的影响,为辅酶Q10临床应用提供基础资料。方法:200g左右健康清洁级雄性Wistar大鼠48只,随机分成3组:空白牙周炎组(N组)、慢性应激牙周炎组(C组)及慢性应激辅酶Q10牙周炎(CQ组)。N组正常喂养,正常饮水;C组给予蒸馏水灌胃和不同的慢性应激;CQ组给辅酶Q10灌胃和不同的慢性应激;慢性应激和辅酶Q10给药6周后,每组的右侧下颌第一磨牙做实验性牙周炎模型,左侧做自身对照,且C组继续给予蒸馏水灌胃和不同的慢性应激,CQ组继续给辅酶Q10灌胃和不同的慢性应激。慢性应激模型的建立:采用随机数的方法将七种刺激随机安排到每周

6、内,每日上午进行应激处理,每日1种刺激。七种刺激方式分别为:①束缚1h;②冲水1h;③禁食24h;④电子驱鼠器1h;⑤泡水1h;⑥禁水24h;⑦潮湿垫料24h。牙周炎模型的建立:以丝线结扎+黏性高糖饮食+饮自身粪便水法复制大鼠牙周炎模型。牙位是右侧下颌第一磨牙,每隔一天检查一次大鼠口腔情况,如果丝线有松动或脱落情况,重新进行结扎。分别于大鼠实验性牙周炎造模后的0、2、4、6周末的上午8点(且前一天禁食)观察测量N组、C组、CQ组的龈袋或牙周袋,对其进行检测并行统计学分析。随机选出四只处死,心脏取血,酶联免疫吸附法检测CTX-1并进行统计学分析;迅速取下下颌第一

7、磨牙的牙龈,在10%多聚甲醛液中进行固定,经过一系列处理后做成切片:1中文摘要HE染色,400倍显微镜下观察组织学有何变化;天狼猩红染色,观察胶原纤维的情况;抗原修复后行免疫组化染色,光镜下观察,并对牙周组织中MMP-9进行测定和统计学分析。结果:1慢性应激动物模型的建立C组与CQ组给予慢性刺激2周后出现倦怠和体重增长缓慢现象,两组间有差异(P>0.05),C组、CQ组分别与N组比较,到第4周、第6周末体重差异更加显著(P=0.000)。2牙周炎动物模型的建立C组、N组、CQ组大鼠的左侧牙周组织在整个实验过程中都没有明显变化,右侧牙周组织在观测的2、4、6周平

8、均牙周探诊深度出现了不同程度的变化:在

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