常见蓝藻毒素结构.ppt

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1、常见蓝藻毒素结构节球藻毒素微囊藻毒素鱼腥藻毒素束丝藻毒素蓝藻毒素毒性分类肝毒素神经毒素皮疹毒素anatoxin-a、anatoxin-a(s)、saxitoxin和neosaxitoxin，前两者主要由淡水蓝藻产生，后两种还可由某些海洋藻类产生微囊藻毒素和节球藻毒素是分布最广泛的两种肝毒素；拟筒孢藻毒素能以渐进的方式损伤包括肝脏在内的大多数器官包括鞘丝藻毒素-a等主要发现于海洋蓝藻鞘丝藻中，皮疹毒素可能是蛋白激酶C的活化剂，具有促肿瘤作用。目前在淡水水体中还没有发现这类毒素神经毒素致死事件的报道主要发生在

2、北美，而肝毒素的危害是全球性的微囊藻毒素出现频率最高、范围最广，造成危害最严重已报道MC异构体的种类接近80种微囊藻毒素在水环境中可能的迁移、归趋途径生物降解(细菌等)水体稀释水中悬浮物或沉降物吸附热分解光降解生物放大生物积累微囊藻毒素威胁人类健康的主要途径Microcystins地表水地下水微囊藻毒素经口腹腔注射肝脏性腺蛋白磷酸酶（PP）1和2A抑制细胞代谢紊乱遗传毒性微囊藻毒素对动物的毒性微囊藻毒素的主要靶器官是肝脏，同时具有致癌、致畸作用微囊藻毒素的限制值世界卫生组织于（WHO）1997年召开会议

3、订定相关藻类毒素的建议规范，并于1998年初公布藻类毒素（Microcystin-LR）于饮用水水质中不得超过1微克/升（μg/L）。截至目前为止，巴西、加拿大、波兰、捷克、西班牙、法国、中国等国，在饮用水水质标准已规范微囊藻毒素最大限值。通过在小鼠身上的长达13周的实验研究中得出未观察到有害作用剂量（NOAEL）的量为40μg／kg体重／d，可计算出每日可容忍摄入量（TDI）的量为0．04μg／kg体重／d。按人体的标准体重60kg，每天饮水2L计算，每日最大容许摄入浓度为1μg/LHPLC:能准确检测

4、各种毒素异构体,重现性好，检测限为0.1g/mL。但该法检测时需MC标样，分析单个样品耗时较长。ELISA:基于单克隆抗体技术发展的免疫检测技术。需要的样品量少，前处理简单，该方法灵敏度很高,检测限达到100pg/mL，但线性范围窄，易出现假阳性结果。PPI:基于MC对PP有抑制作用而建立的体外测试方法，检测限80pg，得到的结果是MC总量。常用检测方法生物毒性实验：粗略确认MC的分析技术。操作比较简单，但灵敏度低、专一性差。微囊藻毒素的检测方法LC/MS:按照离子的荷质比不同，来分离不同分子量的分子，

5、能准确定量各种异构体，检测限低，灵敏度高，但仪器昂贵。样品采集和运输保存－藻样25号浮游生物网富集13号网过滤浮游动物离心，去掉碎屑等杂质700目筛网或筛绢布富集藻样4℃保存样品瓶敞口通气运输实验室处理样品采集和运输保存－水样取深度0m和0.5m处水样等量混合玻璃瓶保存取底泥面以上0.1m范围内水样离心，去除杂质GF/C滤膜过滤，去除藻类表层水样底层水样运输实验室处理冰冻保存样品采集和运输保存－泥样Peterson采泥器采集塑料袋保存柱状采泥器采集冷冻真空冷冻干燥表层泥样分层泥样运输实验室处理冰冻保存样品

6、采集和运输保存－水生动植物样水生植物封口袋保存水生动物物种鉴定真空冷冻干燥根、茎、叶等肝、肾、肌肉等运输实验室处理解剖冰冻保存不同基质样品中微囊藻毒素的分析体系－生物样品藻细胞及水产品等基质样品中微囊藻毒素的分析流程图藻细胞、水产品、生物组织样品离心，取上清液5%乙酸或80%甲醇等溶剂提取3次，离心SPE分离纯化，20％甲醇预淋洗，90％甲醇洗脱浓缩残留物HPLC，ELISA，LC/MS，PPIA，MMPB测定纯水或甲醇定容，贮存与-20℃，待测土壤和底泥样品中微囊藻毒素的检测流程土壤、底泥样品离心，取上

7、清液EDTA－Na2P2O8提取，超声波400w，10分钟，3次SPE分离纯化，20％甲醇预淋洗，90％甲醇洗脱浓缩致干HPLC，ELISA，LC/MS测定纯水或甲醇定容，贮存与-20℃，待测水样中微囊藻毒素的检测流程1－5升水样0.45um滤膜过滤SPE富集、分离纯化，20％甲醇预淋洗，90％甲醇洗脱浓缩致干HPLC测定纯水或甲醇定容，贮存与-20℃，待测ELISALC/MS测定GB/T20466-2006不同基质样品中微囊藻毒素的分析体系－水、泥样品水环境中微囊藻毒素污染的常用控制对策毒素污染的控制策

8、略控制水体中溶解态毒素的含量控制蓝藻生物量细胞结合态毒素絮凝--沉淀法使用杀藻剂机械收集水华粘土滤床过滤活性炭吸附紫外光降解化学氧化剂微囊藻毒素标样品ELISA检测试剂盒《水中微囊藻毒素的测定》GB/T20466-2006PCR检测试剂盒主持制定一项国家标准微囊藻毒素研究相关成果