蛋白质的二级结构主要有哪些类型.doc

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1、1.蛋白质的二级结构主要有哪些类型,其特点如何?答:α-右手螺旋,β-折叠,无规卷曲,U型回折(β-转角)<1>α-右手螺旋α-螺旋为右手螺旋,每一圈含有3.6个aa残基(或肽平面),每一圈高5.4Å,即每一个aa残基上升1.5Å,旋转了100度,直径为5Å,2个二面角(ф,ψ)=(-570,-480)。维持α-右手螺旋的力量是螺旋内氢键,它产生于一个肽平面的C=O与相邻一圈的在空间上邻近的另一个肽平面的N-H之间,它的方向平行于螺旋轴,每个氢键串起的长度为3.6个肽平面或3.6个aa残基,被氢键串起来的这个环上含有13个原子,故α-右

2、手螺旋也被称为3.613螺旋。Pro破坏α-螺旋。<2>β-折叠肽链在空间的走向为锯齿折叠状,二面角(ф,ψ)=(-119℃,+113℃)。维持β-折叠的力量是折叠间的氢键,它产生于一个肽平面的C=O与相邻肽链的在空间上邻近的另一个肽平面的N-H之间,两条肽链上的肽平面互相平行,有平行式和反平行式两种,<3>U型回折:也叫β-转角,肽链在某处回折1800所形成的结构。这个结构包括的长度为4个aa残基,其中的第三个为Gly,稳定该结构的力量是第一和第四个aa残基之间形成的氢键。<4>无规卷曲:无固定的走向,但也不是任意变动的,它的2个二面

3、角(ф,ψ)有个变化范围。论述04蛋白质简述蛋白质一级结构的分析方法。第一步:前期准备,第二步:肽链的端点测定,第三步:每条肽链aa顺序的测定,第四步:二硫键位置的确定。l<1>第一步:前期准备l分离纯化蛋白质:纯度要达到97%以上。l蛋白质分子量的测定:用于判断分子的大小,估计肽链的数目,有渗透压法、凝胶电泳法(聚丙烯酰胺、SDS)、凝胶过滤法、超离心法等laa组成的测定:用于最后核对,氨基酸自动分析仪。l肽链拆分:非共价键的如氢键、离子键、疏水键、范德华力4种,可用尿素或盐酸胍等有机溶液来拆分。共价键的仅二硫键1种,可用巯基乙醇、碘

4、代乙酸、过甲酸来拆分。l<2>第二步:肽链的端点测定lN端测定:Sanger法,DNFB→DNP-肽→水解→乙醚萃取→层析鉴定。lEdman法,PITC→PTC-肽→PTH-aa→层析鉴定。lC端测定:肼解法。l<3>第三步:每条肽链aa顺序的测定事先要将蛋白质打断成多肽甚至寡肽,再上机分析,而且要2套以上,便于以后拼接。l常用的工具酶和特异性试剂有:l胰蛋白酶:-(Arg、Lys)↓-。产物为C端Arg、Lys的肽链。l糜蛋白酶:表示为-(Trp、Tyr、Phe)↓-。lCNBr:-Met↓-。<4>第四步:二硫键位置的确定包括链内和

5、链间二硫键的位置,用对角线电泳来测,这项工作在AA序测定完毕后进行。在肽链未拆分的情况下用胃蛋白酶水解之,可以得到被二硫键连着的多肽产物。先进行第一向电泳,将产物分开。再用巯基乙醇处理,将二硫键打断。最后进行第二向电泳,条件与第一向电泳完全相同。选取偏离对角线的样品(多肽或寡肽),它们就是含二硫键的片段,上机测aa顺序,根据已测出的蛋白质的aa顺序,把这些片段进行定位,就能找到二硫键的位置。3.以B-DNA和tRNA为例叙述核酸的二级结构模型。答:一.Watson-Creck的DNA二级结构模型(B-DNA,线状DNA,自然选择):美国

6、Watson、英国Creck提出:<1>DNA分子是由2条DNA单链互相缠绕而成,2条链反向平行(一条链为5’→3’,另一条链为3’→5’),空间走向为右手螺旋<2>2条链靠链间的H键结合,H键的产生于碱基之间,符合碱基配对原则:A=T,G=C。右手螺旋的维持力主要是碱基堆积力,其次是氢键。<3>DNA的骨架为磷酸和脱氧核糖,在分子外面,戊糖平面∥螺旋轴,DNA的侧链基团是碱基,在分子内部,碱基平面⊥螺旋轴。螺距34Å,直径20Å,10bp/圈。分子有一条宽沟称为大沟,还有一条窄沟叫小沟,复制和转录的有关酶就是付在大沟之处的。<4>遗传

7、信息储存在DNA分子的bp序中。<5>意义:能够解释DNA的一切物理化学性质;实现了DNA的结构与生物功能之间的统一:精确的自我复制。二.RNA的二级结构模型RNA的二级结构通式:茎环结构:RNA局部双螺旋,符合A-DNA模型。tRNA的二级结构模型三叶草模型:AA臂:其3’端具有CCA-OH序列。功能:携带AA二氢尿嘧啶环:含有二氢尿嘧啶,稀有碱基反密码环:具有反密码子,可以和mRNA上的密码子配对,将携带的AA送到恰当的位置额外环:显示tRNA特异性的地方,是tRNA分类的依据。TψC环:含有稀有碱基T(本应该在DNA中的)、假尿苷

8、ψ用化学渗透学说阐述氧化磷酸化的机制<1>要求线粒体的内膜封闭完好,呼吸链中的电子载体和质子载体在线粒体的内膜上按照顺序交替排列<2>质子载体有质子泵的功能,它利用电子传递的能量将线粒体内的H+泵到线粒体外

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