生物 51《DNA的粗提取与鉴定》教案（新人教版选修1）高二.doc

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1、DNA的粗提取与鉴定教学目标：1、知识与能力目标理解DNA的理化特性及根据H理化特性而提取和鉴定的原理，初步掌握DXA的粗提取和鉴定方法，理解相关溶液的作用机理，培养学生的分析能力，通过实验使学生能够简述科学探究的基本过程。2、情感态度与价值目标通过探索培养科学的怀疑精神和创新精神；通过实验结果，学生树立生命物质性的观点。教学重点：提取DNA的相关原理和步骤教学难点：提取DNA的相关原理和步骤教学过程：开门见山：讲解木实验的目的是提取DNA和DNA的鉴定，其屮提取DNA是木实验的重点和难点。提出问题：“DNA主要存在于什么结构上

2、？”“如何提取DNA?”“选什么材料好？”达成共识：1、造适宜材料：选动物细胞，易打破细胞结构2、破坏细胞膜、核膜结构，得核物质。3、将DNA与蛋白质等物质分开，得DNA4、去掉DNA屮杂质，提纯DNA。探究实验原理：屏幕展示表格1NaC12mol/LNaClO.14mol/LNaC10.015mol/LDNA蛋门质表格2DNA蛋白质杂质95%酒精不同浓度的NaCl溶液可溶解或析出DNAo95%洒精可提取DNA。填表1：NaC12mol/LNaClO.4mol/LNaClO.015mol/LDNA最大最小变大蛋白质解聚最大变小填

3、表2：DNA蛋白质杂质95%酒精不溶可溶可溶通过对实验原理的预习，表格的比较，使学生明确了备溶液的川途，保证理解实验。请学生代表简述DNA提取实验步骤投煤展示实验设计思路：鸡血细胞液①aDA释放②bDNA与蛋白质的分离③cDA析出④dDNA浓缩(提纯)获得鸡血细胞核物质：提核物质一溶解一析岀一溶解一析岀实验步骤:方法步骤加入物质目的1.制备鸡血细胞柠樣酸钠溶液①2.提取鸡血细胞的细胞核物质20mL蒸驚水②3•溶解细胞核內的DNA2mol/L的NaCl溶液40mL③4•析出含DNA的黏稠物蒸醫水④5.滤取含DNA的黏稠物⑤6•

4、将DNA的黏稠物再溶解2mol/L的NaCl溶液20mL7.过滤含DNA的NaCl溶液一⑦&提取含有杂质较少的DNA冷却的95%的酒精50mL⑧9.DNA的鉴定A：(1)向试管中加入0.015mol/L的NaCl溶液5mL(2)加入DN仝(3)加入4mL二苯胺试剂B：(1)向试管中加入0.015moVL的NaCl溶液5mL(2)加入4mL二苯胺试剂⑨引导学生讨论、冋忆并冋答目的①~⑨。%1防止血凝。%1加速血细胞破裂。%1溶解DNAo%1使2mol/L的NaCl溶液稀释至0.14mol/L,促DNA最大限度地析出。%1使含DNA

5、的黏稠物被留在纱布上。%1使含DNA的黏稠物尽可能多地溶于溶液屮。%1除去含DNA的滤液屮的杂质。%1提取DNAo%1A：岀现蓝色。B：无变化讨论与结论：投影给出如下讨论提纲，供学生讨论。（1）DXA粗提取过稈屮的关键是哪儿步？（2）提取鸡血中的.DNA时,为什么要除去血液中的上清液?（3）DNA的肓径约为2nm,实验屮出现的丝状物的粗细是否表示一个DNA分了育径的大小？学生分组进行讨论并发表讨论结果。教师对讨论进行全程指导，并与学生一起归纳总结。（Da.提取鸡血细胞的核物质。应用低渗原理和机械搅拌，可得到最大量的DYA。b.析

6、出DNA黏稠物。加蒸锚水要慢，搅拌要轻。c.沉淀DNA时，必须用冷酒精。（2）提取DNA,去除杂质是关键。由于上清液是血液屮的血•浆部分，不含DNA,所以要除去（含蛋白质）。（3）实验屮出现的丝状物是肉眼可以观察到的，这种丝状物的育径要比DNA分了的育径2nm大许多倍，所以实验中出现的丝状物并不表示一个DNA分子一的直径。实验结论：细胞中有DNA,DNA遇二苯胺试剂在沸水浴中变蓝色。教学目标巩固1.实验屮步骤1和步骤3都需要加入蒸锢水，两次加入的作用相同吗？为什么？2.实验中NaCl的物质的量浓度为2mol/L和0.14mol/

7、L对DNA有何影响？3.DNA遇二苯胺（沸水浴）会染成A.砖红色B.橘黄色C.紫色D.蓝色补充知识：1.鉴定DNA的其他方法用紫外灯照射法鉴定DNA效果很好。具体鉴定方法如下。1・配制染色剂。用蒸懾水配制刀分Z五的漠化乙锭（EB）溶液。2.将玻璃棒上缠绕的白色絮状物抹于蜡纸上，再滴一滴EB溶液染色。3.将蜡纸放在紫外灯（260nm）下照射（暗室屮），可见橙红色的萤光（DNA的紫外吸收高峰在280nm处）。2、DNA粗提取与鉴定的另一种方法1.材料用具新鲜菜花（或蒜黄、菠菜）。衆料烧杯,量筒,玻璃棒，尼龙纱布,陶瓷研钵，试管，试管

8、架,试管夹,漏斗，酒精灯，石棉网，三角架，火柴，刀片，天平。研磨液，体积分数为95%的酒精溶液，二苯胺试剂，蒸镭水。1.方法步骤A.DNA的粗提取（1）准备材料：将新鲜菜花和体积分数为95%的酒精溶液放入冰箱冷冻室，至少24小时。（2）取材：称取30g菜花，去梗