51DNA的粗提取与鉴定学案人教版选修1

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1、5.1DNA的粗提取与鉴定学案人教版选修1［课题目标］1、通过尝试对植物或动物组织中的DNA进行粗提取，了解DNA的物理化学性质。2、理解DNA粗提取与鉴定的原理［课题重点难点］DNA的粗提取和鉴定方法［基础知识］1.提取DNA的方法提取生物大分子的基本思路是o对于DNA的粗提取而言，就是要利用、等在物理和化学性质方面的差异，提取DNA,去除其他成分。1)DNA的溶解性DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的屮溶解度不同，利用这一特点，选择适当的盐浓度就能使充分溶解，而使杂质沉淀，或者相反，以达到分离目的。图5—1是DN

2、A在NaCl溶液中的溶解度曲线，请根据曲线图思考：%1在什么浓度下，DNA的溶解度最小？DNA在NaCl溶液中的溶解度是如何变化的？%1如何通过控制NaCl溶液的浓度使DNA在盐溶液中溶解或析出？此外，DNA不溶于溶液，但是细胞中的某些蛋白质则溶于酒精。利用这一原理，可以将DA与蛋白质进一步的分离。2)DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性蛋白酶能水解,但是对没有影响。大多数蛋白质不能忍受60—80T的高温，而DNA在以上才会变性。洗涤剂能够瓦解,但对DNA没有影响。3)DNA的鉴定在条件下，DNA遇会被染成色，因此二苯

3、胺可以作为鉴定DNA的试剂。1.实验设计1）实验材料的选取凡是含有的生物材料都可以考虑，但是使用的牛物组织，成功的可能性更大。在下面的牛物材料中选取适合的实验材料：鱼卵、猪肝、菜花（花椰菜）、香蕉、鸡血、哺乳动物的红细胞、獗猴桃、洋葱、豌豆、菠菜、在液体培养基的大肠杆菌思考：哺乳动物的红细胞的特点？2）破碎细胞，获取含DNA的滤液动物细胞的破碎比较容易，以鸡血细胞为例，在鸡血细胞液中加入一定量的,同时用搅拌，过滤后收集滤液即可。如果实骑材料是植物细胞，需要先用溶解细胞膜。例如，提取洋葱的DNA时，在切碎的洋葱中加入一

4、定的和,进行充分的搅拌和研磨，过滤后收集研磨液。思考：%1为什么加入蒸镭水能使鸡血细胞破裂？%1加入洗涤剂和食盐的作用分别是什么？%1如果研磨不充分，会对实验结果产生怎样的影响?%1此步骤获得的滤液中可能含有哪些细胞成分？3）去除滤液中的杂质阅读课本的三个方案。思考：为什么反复地溶解与析出DNA,能够去除杂质？方案二与方案三的原理有什么不同？4）DNA的析出与鉴定将处理后的溶液过滤，加入与滤液体积、冷却的—，静置,溶液中会出现,这就是粗提取的DNAo用玻璃棒搅拌，卷起丝状物，并用滤纸吸取上面的水分。取两支20ml的试

5、管，各加入物质的量浓度为的NqCI溶液5ml,将丝状物放入其中一支试管中，用玻璃棒搅拌，使丝状物溶解。然后，向两支试管屮各加入4ml的。混合均匀后，将试管置于屮加热5min,待试管冷却后，比较两支试管溶液颜色的变化，看看溶解有DNA的溶液是否变。1.操作提示以血液为实验材料时，每100ml血液屮需要加入3g,防止O加入洗涤剂后，动作要、,否则容易产生大量的泡沫，不利于后续步骤地操作。加入酒精和用玻璃棒搅拌时，动作要,以免，导致DNA分子不能形成絮状沉淀。二苯胺试剂要,否则会影响鉴定的效果。4・结果分析与评价［课堂总结

6、、点评］—►实验原理—>DNA在不同浓度NaCl溶液屮溶解度不同DNA的粗提取与鉴定DNA与其他细胞成分在酒精中溶解度不同DNA和蛋白质对酶、高温和洗涤剂耐受性不同DNA与二苯胺呈现蓝色反应―►DNA粗提取一►选择适宜材料一►破碎细胞DNA的纯化<—DNA的溶解和析出—►鉴定DNA—►与二苯胺混合，沸水浴，呈现蓝色反应［典型典例］1、不同浓度的NaCl溶液在本实验中的作用，叙述错误的是（）A.2mol/LNaCl溶液是溶解含DNA的核物质、溶解含DNA的粘稠物B.0.14mol/LNaCl溶液是析出DNA分子C.2m

7、ol/LNaCl溶液做DNA鉴定时使用D・2mol/LNaCl溶液中DNA的溶解度最低2、下列可以作为D"A粗提取与鉴定的实验材料的是（）A.人的全血B.鸡的全血C.鸡的血细胞液D.西瓜的汁液3、DNA遇二苯胺（沸水屮），会被染成（）A.砖红色B.红色C.紫色D.蓝色4、从细胞核中提取核物质所用的提取液是（）A.NaCl溶液B・酒精C.蒸馆水D.柠檬酸钠5、在“DNA粗提取与鉴定”的实验屮，将提取获得的含DNA的粘稠物（还含有许多物质）分别处理如下：第一，放入0.14mol/L的NaCl溶液中，搅拌后过滤，得滤液A和

8、粘稠物a。第二，放入2mol/L的NqCI溶液中，搅拌后过滤，得滤液B和粘稠物b。第三，放入冷却的95%的酒精溶液中，搅拌后过滤，得滤液C和粘稠物c。以上过程获得的滤液和粘稠物质屮，因含DNA少而可以丢弃的是。参考答案:1、D2、C3、D4、C5、A、b、C