江苏高考生物复习专题十一生物技术实践考点31微生物的利用及在传统发酵技术中的应用学案.doc

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1、考点31　微生物的利用及在传统发酵技术中的应用[直击考纲]　1.微生物的分离和培养(B)。2.某种微生物数量的测定(C)。3.微生物的应用(B)。4.酶在洗涤等方面的应用(B)。5.制备和应用固相化酶(A)。6.发酵食品加工的基本方法(A)。7.实验：(1)探究酶在洗涤方面的作用(c)；(2)酵母细胞的固定化技术(b)；(3)腐乳的制作(a)；(4)果酒和果醋的制作(b)；(5)微生物的分离与培养(b)；(6)DNA的粗提取与鉴定(b)。1．微生物的培养10(1)无菌技术：主要包括消毒和灭菌。①消毒方法：常用煮沸消毒法、巴氏消毒法。②常用灭菌方法：灼烧灭菌—

2、—接种环、接种针等金属器具；干热灭菌——主要针对玻璃器皿等；高压蒸汽灭菌——主要针对培养基等。(2)倒平板操作操作过程如图所示，操作时要待培养基冷却至50℃左右时，在酒精灯火焰附近进行。制备固体培养基最后要将平板倒置，其主要目的是防止培养皿皿盖上的水珠滴入培养基造成污染。(3)平板划线操作(4)稀释涂布平板法：先将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。在稀释度足够高的菌液里，聚集在一起的微生物将被分散成单个细胞，从而能在培养基表面形成单个菌落。如图所示：2．某种微生物的分离与计数(1)分离——选择培养基①培

3、养基中加入青霉素可以分离出酵母菌和霉菌。②培养基中加入高浓度的食盐可得到金黄色葡萄球菌。③培养基中缺乏氮源时，可以分离得到固氮微生物。10④当培养基的某种营养成分为特定化学成分时，也具有分离效果。⑤改变微生物的培养条件，也可以达到分离微生物的目的，如将培养基放在高温环境中培养能得到耐高温的微生物。(2)计数①土壤中分解尿素的细菌的分离与计数a．筛选菌株：利用以尿素为唯一氮源的选择培养基筛选菌株。b．计数方法：活菌计数法和显微镜直接计数法。前者为了增强实验的说服力和准确性，需设置重复组，一般选择菌落数在30～300的平板进行计数。c．过程：土壤取样→样品的稀释

4、→微生物的培养与观察。②分解纤维素的微生物的分离a．实验原理即：可根据是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。b．流程：土壤取样→选择培养→梯度稀释→涂布平板→挑选菌落。(3)鉴定方法鉴定分解尿素的细菌含酚红指示剂的以尿素为唯一氮源的培养基→细菌→指示剂变红，则该菌能分解尿素鉴定纤维素分解菌3.微生物在传统发酵技术中的应用项目果酒和果醋的制作腐乳制作作用菌类果酒：酵母菌果醋：醋酸菌毛霉10原理①酵母菌在无氧条件下将葡萄糖氧化成乙醇；②醋酸菌在有氧条件下将乙醇氧化为醋酸毛霉将蛋白质、脂肪分解成小分子有机物原料选择新鲜葡萄(或苹果)豆腐实验流程→冲洗―→榨汁→→↓　　

5、　↓果酒　　果醋让豆腐上长出毛霉→加盐腌制→加卤汤装瓶→密封腌制操作注意事项①材料选择与处理；②防止发酵液污染，控制好发酵条件①材料用量；②防止杂菌污染；③控制温度及酒精含量共同点都是天然的发酵，利用了微生物新陈代谢过程中代谢产物的作用或直接获取代谢产物题组一　微生物的培养和利用1．苯酚及其衍生物广泛存在于工业废水中，对环境有严重危害。某学校科研小组准备依据如图操作步骤，从处理废水的活性污泥中分离筛选出苯酚高效降解菌株。据图回答下列问题：(1)甲图中苯酚降解菌的富集培养基应含有蛋白胨、K2HPO4、MgSO4、苯酚和水，其中可作为碳源的有__________

6、____。10(2)将采集到的样品接种培养，苯酚用量应随转接次数增加而逐渐________，以达到获得苯酚高效降解菌的目的。应采用______________法来进行该菌种的计数与分离，统计的菌落数往往比活菌的实际数目要__________________________________________。(3)制备平板培养基时除了需要水、碳源、氮源、无机盐和特殊营养物质外，还必须添加________。培养基的灭菌方法为____________________。(4)乙图为连续划线法示意图，在该图中________(填序号)区域最易获得单菌落。如需要长期保存该

7、菌种，应采用甘油管藏的方法，保存温度为________。答案　(1)蛋白胨、苯酚　(2)增加(升高)　稀释涂布平板　小　(3)琼脂(凝固剂)　高压蒸汽灭菌　(4)③　－20℃解析　微生物培养基一般都含有水、碳源、氮源、无机盐，此外还要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。对异养微生物来说，含C、N的化合物既是碳源，也是氮源，即有些化合物作为营养要素成分时并不是起单一方面的作用。微生物常见的接种方法有：①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种、划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，

8、最后可能形成单个菌落；②稀释涂布平板法：将待分离的菌