欢迎来到天天文库
浏览记录
ID:50468886
大小:72.15 KB
页数:1页
时间:2020-03-09
《FITC蛋白标记方法.doc》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在教育资源-天天文库。
1、FITC蛋白标记方法1.溶液准备:0.15mol/LNaCl溶液,配法,称取8.775gNaCl溶解于1L水中,0.15mol/LNaHCO3-Na2CO3,PH9.0缓冲液,配法,取(1.59%)Na2CO310ml,(1.26%)NaHCO390ml,调PH到9.02.蛋白溶解液:按V0.15mol/LNaCl:V0.15mol/LNaHCO3-Na2CO3=9:1,溶解蛋白,使蛋白的终浓度为10mg/ml。3.加入荧光素,加入的荧光素的质量按m蛋白:m荧光素=50~80mg:1mg,称取完成后加入事先配好的蛋白溶解液中,于4℃生化培养箱中,摇床混匀过夜。注意加
2、入荧光素后需要避光。4.将混匀后的溶液转移到Millpore超滤管中,超滤管中滤膜可以拦截分子量大于3KD的分子,配平后以5000g的转速于日立高速离心机(型号?)离心至无荧光素滤出为止。大约需离3次,每次离心需2-3h。5.离心结束后,将超滤管中的标记液倒入用锡箔纸包裹的塑料管中,不加叠氮钠于4℃保存。参考文献:MMP-3ContributetoNigrostriatalDopaminergicNeuronalLoss,BBBDamage,andNeuroinflammationinanMPTPMouseModelofParkinson’sDisease.
此文档下载收益归作者所有