动物细胞培养.ppt

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1、细胞工程应用的原理和方法研究的水平研究的目的细胞生物学和分子生物学细胞整体水平或细胞器水平按照人们的意愿来改变细胞内的遗传物质或获得细胞产品概念分类动物细胞工程植物细胞工程温故：复习回顾：植物细胞工程采用的技术手段有哪些？其理论基础是什么？所采用技术的理论基础植物细胞工程通常采用的技术手段植物组织培养植物体细胞杂交植物细胞全能性植物细胞工程常用的技术手段有哪些？这些技术的理论基础是什么？植物组织培养植物体细胞杂交植物细胞的全能性动物细胞全能性如何？动物细胞工程2．2．1动物细胞培养和核移植技术动物细

2、胞工程通常采用的技术手段动物细胞培养动物细胞融合单克隆抗体动物细胞核移植是其他动物细胞工程技术的基础。动物细胞工程常用的技术手段有哪些？动物细胞培养、动物细胞核移植、动物细胞融合、单克隆抗体动物细胞培养技术是其他动物细胞工程技术的基础。植物细胞工程常用的技术手段有:植物组织培养、植物体细胞杂交提问：1、动物细胞培养的概念是什么？该技术实施的原理是什么？从动物机体中取出相关组织，将它分散成单个细胞，然后在适宜的培养基中，让这些细胞生长和繁殖。原理是细胞增殖（有丝分裂）。聚焦一、动物细胞培养过程1.动物

3、细胞的培养过程幼龄动物取动物器官和组织剪碎组织胰蛋白酶处理细胞培养单个细胞动物细胞培养技术是其他动物细胞工程技术的基础接触抑制：细胞在贴壁生长过程中，随着细胞分裂，数量不断增加，最后形成一个单层，此时细胞间相互接触，细胞分裂和生长停止，数量不再增加。50代以后失去接触抑制接触抑制动物细胞生长特性部分细胞突变，获得不死性，向癌细胞方向发展，糖蛋白减少。为什么要对取出的动物组织进行处理，使细胞分散？分散的单个细胞容易摄取所需的营养，排出代谢废物；而用大块组织培养时，内部细胞的营养供应和代谢废物的排出都较

4、困难。聚焦一、动物细胞培养过程用胰蛋白酶对动物组织进行处理是因为细胞间的物质主要是什么？用胃蛋白酶可以吗？细胞间的物质主要是蛋白质（胶原纤维）。胃蛋白酶作用的适宜pH约为2，当pH大于6时，胃蛋白酶就会失去活性。胰蛋白酶作用的适宜环境pH为7.2～8.4。多数动物细胞培养的适宜pH为7.2～7.4。聚焦一、动物细胞培养过程胰蛋白酶真的不会把细胞消化掉吗？为什么？胰蛋白酶除了可以消化细胞间的蛋白外，长时间的作用也会消化细胞膜蛋白，对细胞有损伤作用，因此必须控制好胰蛋白酶的消化时间。聚焦一、动物细胞培养

5、过程5、为什么选用动物胚胎或幼龄个体的器官或组织做动物细胞培养材料？动物胚胎或幼龄动物的组织、器官，它们的细胞分化程度低，增殖能力强，分裂旺盛，容易培养。聚焦一、动物细胞培养过程简述动物细胞培养的操作过程分离组织（低幼动物）分散细胞（胰蛋白酶）原代培养（细胞增殖）传代培养（细胞增殖）分装聚焦一、动物细胞培养过程小结过程：幼龄动物或胚胎的组织、器官细胞悬浮液（单个细胞）胰蛋白酶动物组织细胞间隙中含有一定量的弹性纤维等蛋白质，将细胞网络起来形成具有一定弹性和韧性的组织和器官。（分解弹性纤维）10代细胞原

6、代培养50代细胞传代培养细胞株无限传代细胞系遗传物质未改变遗传物质改变接触抑制剪碎聚焦一、动物细胞培养过程动物细胞培养不能最终培养成生物体细胞株：从原代培养细胞群中筛选出进行传代培养的细胞，能传到40-50代，其遗传物质没有发生变化。细胞系：传到40-50代后有部分细胞遗传物质发生了变化，带有癌变的特点，可能在培养条件下无限制的传代下去，这种传代细胞称为细胞系。1、无菌、无毒的环境动物细胞培养的条件添加一定量的抗生素定期更换培养液培养液和培养器具无菌处理动物细胞培养的条件1、无菌、无毒的环境2、营养

7、补充合成培养基中缺乏的物质葡萄糖、氨基酸、无机盐、微量元素、促生长因子、动物血清、血浆等培养基的不同是动物细胞培养和植物组织培养最重要的区别动物细胞培养的条件1、无菌、无毒的环境2、营养3、温度和PH36.5+0.5度PH为7.2-7.4动物细胞培养的条件1、无菌、无毒的环境2、营养3、温度和PH4、气体环境：O2和CO2（95%空气和5%CO2）2、为什么选用动物胚胎或幼龄个体的器官或组织做动物细胞培养材料？1、较植物组培培养基有何独特之处？独特之处有：1、液体培养基2、成分中有动物血清等这些组织

8、或器官上的细胞生命力旺盛，分裂能力强聚焦三、动物细胞培养的应用1、获得细胞产物，如蛋白质生物制品－病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体等2、获得烧伤病人植皮所需的细胞3、获得细胞用于检测有毒物质4、为治疗及预防疾病提供理论依据。1、在动物细胞培养过程中遗传物质发生改变的细胞（　）A．细胞系B．细胞株C．原代细胞D．传代细胞2、动物细胞工程技术的基础是（　）A.动物细胞融合B.单克隆抗体C.胚胎移植D.动物细胞培养AD3.动物细胞培养与植物细胞培养的重要区别在于A.培养基不同B