生物实验技术：第九章 照相与显微照相.ppt

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1、第九章显微摄影技术第一节照相机的结构和应用第二节感光片的冲洗、印相与放大第三节显微摄影第四节数字显微摄影系统（一般了解）第一节照相机的结构和应用第九章机械相机、单反相机与普通数码相机工作原理镜头光圈快门取景器和测距器景深表暗箱（一）镜头：焦距（f）：摄影时，焦距的长度与成像的大小成正比（物距相同时），与景深成反比决定了相机性能高低第九章一、照相机的结构镜头的分类：据焦距长度1.标准镜头：镜头焦距=所用底片对角线50mm（75/80）2.广角镜头（短焦距镜头）：镜头焦距<所用底片对角线3.远摄镜头（望远镜头）：镜头焦距＞所用底片对角线4.变焦镜头：第一节照相机的结构和应用第九章（二）光圈作用

2、：控制镜头通光量；调节景深范围大小光圈系数（F系数）：=焦距/通光孔径注意：镜头上光圈系数数值越大，通光量越小。相邻两级光圈前一级比后一级的通光量大一倍。感光力：第一节照相机的结构和应用第九章1.7，2.8，4，5.6，8，11，16，22（三）快门作用：控制曝光时间镜间快门焦点平面快门快门速度：BT注意：（1）相邻的两级快门速度，前一级比后一级曝光量大1倍（2）摄影时，快门速度与光圈系数要配合使用（3）同一个曝光量，光圈系数与快门速度的配合可有几种不同的组合。如：16，1/60s；11，1/125s；8，1/250s第一节照相机的结构和应用第九章1，2，4，8，15，30，60，125，

3、250……倒数（四）取景器和测距器连动测距器调焦前调焦后1.重影式调焦后2.截影式调焦前全视场聚焦截影式调焦区微棱镜聚焦区调焦方式：3.菲涅尔全视场聚焦屏调焦4.毛玻璃取景屏调焦第一节照相机的结构和应用第九章（五）景深表距离标尺景深标尺焦距、景深、光圈的关系：１．摄影距离一定时，光圈越小，景深越大２．光圈一定时，被摄物越远，景深长，反之，景深短３．同一物距时，镜头焦距长短与景深成反比第一节照相机的结构和应用第九章（六）暗箱第一节照相机的结构和应用第九章二、与摄影有关的几个名词１．景深：观察到的景物的深度。被摄景物清晰的前后距离。２．反差：景物的明暗差别和影像的黑白色调差别３．倒易律与倒易律

4、失效总曝光量=光强度（照度）曝光时间第一节照相机的结构和应用第九章三、使用照相机的基本常识1.平直端正、持稳、测距准确2.近距离拍摄时，加近摄圈或近摄镜3.慢速度拍摄时（长于1/30秒），要用三角架显微摄影时，用快门线4.遵守操作程序，先卷片再按快门第一节照相机的结构和应用第九章一、感光片的分类与结构（一）感光片的分类1.据使用相机的型号：135,1202.据用途负片：彩色、黑白正片（拷贝片）反转片3.据感色性能色盲片分色片全色片第二节感光片的冲洗、显印与放大4.据感光速度特慢速（＜GB8°）、慢速（GB14°）、中速（GB17°）、快速（GB21°）、特快速（＞GB24°）感光片的感光

5、度每相差3°，感光速度就相差1倍，曝光时间要相应快、慢相差1倍，或光圈大、小相差1级。红橙黄绿青兰紫色盲片分色片全色片（二）感光片的结构保护层：结合层（特殊化学胶液）乳剂层：片基（醋酸纤维）防光晕层厚1~2µm透明胶膜明胶+卤化银（AgBr+AgI）银盐颗粒越细分布越均匀成像质量越好彩色感光片：银盐颗粒细分布均匀三原色平衡第二节感光片的冲洗、显印与放大第九章二、感光片的冲洗（一）感光片冲洗中常用药品及其性能1.软水剂:EDTA二钠；六偏磷酸钠2.显影剂：米吐尔；对苯二酚；菲尼酮3.保护剂:无水亚硫酸钠；亚硫酸氢钠4.促进剂：无水碳酸钠；硼砂5.抑制剂：溴化钾；苯胼三氮唑6.坚膜剂：钾明矾；

6、铬明矾7.定影剂：硫代硫酸钠（大苏打）8.中和剂：醋酸；硼酸第二节感光片的冲洗、显印与放大第九章（二）感光片的冲洗程序1.显影:感光的卤化银银D-76显影液（感光片）温水750ml米吐尔2g无水亚硫酸钠100g对苯二酚5g硼砂2g加水至1000mlD-72显影液（感光纸）温水500ml米吐尔3.1g无水亚硫酸钠45g对苯二酚12g无水碳酸钠67.5g溴化钾1.9g加水至1000ml（18-20℃），显影时间根据厂家推荐第二节感光片的冲洗、显印与放大2.停影(停显）:28%冰醋酸24ml，蒸馏水500ml20-30s3.定影:溶解掉未感光的卤化银酸性坚膜定影液Ｆ-5（20℃）4.水洗干燥温水

7、600ml硫代硫酸钠240g无水亚硫酸钠15g醋酸（28%）48ml硼酸7.5g钾矾15g加水至1000ml第二节感光片的冲洗、显印与放大第九章（二）感光片的冲洗程序三、印相底片上的负影像感光纸上的正影像第二节感光片的冲洗、显印与放大第九章（一）感光纸的构造纸基结合层乳剂层保护层AgCl（印相）AgBr（放大）AgCl+AgBr（两用）（二）感光纸的性质与选择感光纸的号数：小→大反差：弱→强纸性：软→硬印相与放大根据底片