galectin 3和e cadherin蛋白在胃癌中的表达及其意义.doc

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1、GaIectin一3和E一cadherin蛋白在胃癌中的表达及苴音义[摘要]目的探讨Galectin-3和E-cadherin蛋白在胃癌中的表达及其意义。方法选择60例胃癌组织标本,采用免疫组化方法检测胃癌组织中Galectin-3和E-cadherin蛋白的表达情况,同时选择60例正常胃黏膜检测Galectin-3和E-cadherin蛋白的表达情况作为对照。结果胃癌组织Galectin-3阳性表达率高于正常胃黏膜组织(P<0.01),E-cadherin蛋白阳性表达率低于正常胃黏膜组织(卩〈0.01)。分化程度越高、浸润程度越浅、淋巴结无转移的胃癌组

2、织E-cadherin蛋白阳性率越高(P<0.01)o浸润程度越深、淋巴结有转移的胃癌组织Galectin-3的阳性表达率越高(P

3、是临床常见的恶性肿瘤,近年来死于胃癌的患者呈逐年上升的趋势。癌症的发生与多种因索相关,而胃癌的侵袭以及转移是导致患者死亡的主耍原因之一。Galectin-3是一种凝集素,参与多种生理以及病理过程,其在细胞生长、凋亡、粘附以及新生血管形成、肿瘤细胞转移和浸润中均发挥重要的作用。E-cadherin蛋白是一类介导细胞间同质粘附的钙依赖性跨膜糖蛋白,其表达与恶性肿瘤的分化程度、侵袭力、转移呈负相关,与预后呈正相关[1]。木研究探讨胃癌组织中Galectin-3及E-cadherin蛋白的表达,分析其在胃癌的发生、发展中的作用。1资料与方法1.1一般资料选择20

4、10-2012年在我院手术治疗切除的胃癌组织标本60例,其屮男28例,女32例,年龄31〜66岁,平均(53・1±18・4)岁。肿瘤直径〈4cm者25例,^4cm者35例。肿瘤浸润深度:黏膜及黏膜下层(T1+T2)者8例,肌层及浆膜层(T3+T4)者52例。淋巴结转移:有32例,无28例。分化程度:高分化及中分化29例,低分化31例。同时取手术切除组织正常切缘的正常胃黏膜组织作为对照组。1・2检测方法采用免疫组化法对胃癌黏膜组织以及正常胃黏膜组织中Galectin-3及E-cadherin蛋白表达进行检测。Galectin-3兔抗人单克隆抗体由上海研生生

5、物技术科技有限公司提供,E-cadherin兔抗人单克隆抗体由上海研生生物技术科技有限公司提供。标本甲醛固定、石蜡包埋、连续4zn切片。清洗玻片后烤干,浓硫酸中浸泡24h,冲洗后烘干,多聚拉氨酸进行放脱片处理,烤干,备用。切片,梯度酒精脱水、水洗。3%的过氧化氢溶液室温下孵育15min,以封闭内源性过氧化物酶的活性。水冲洗后,PBS缓冲液洗涤3次。将切片置丁•枸扌缘酸缓冲液中,微波炉内高火烘烤5min,中高火烘烤8min,冷却至室温。然后自來水冲洗,蒸憾水冲洗,PBS缓冲液洗涤3次。甩干,加入封闭血清,在37°C下孵育15mino倒去血清,滴加一抗或者一

6、抗的工作液,37°C,孵育2hoPBS缓冲液洗涤3次。加二抗工作液,37°C,孵育20min,卩BS缓冲液洗涤3次。加DAB显色液,有表达后立即终止显色。1.3免疫组化结果判定1.3.1Galectin-3结果判定位于上皮细胞的胞浆内,棕黄色颗粒。判断结果[2]:每张切片随机观察5个视野,统计阳性细胞数,取平均阳性率记分。0分:<5%;1分:5%〜24%;2分25%〜49%;3分:50%〜74%;4分:375%。染色强度:0分:无着色;1分:淡黄色;2分:黄色或者棕黄色;3分:褐色或者棕褐色。阳性细胞率得分+染色强的得分3〜6分者为染色阳性。1.3.2E

7、-cadherin蛋白结果判定在正常组织内位于上皮细胞的细胞膜上,在癌组织中位于细胞浆和细胞膜中。染色呈一致的棕黄色颗粒。染色阳性判断标准与Galectin-3结果判定相同。1.4观察指标比较胃癌组织与正常胃黏膜组织中Galectin-3及E-cadherin蛋白表达阳性率。统计患者的一般资料以及临床资料,分析不同临床病理参数与Galectin-3及E-cadherin蛋白表达阳性率的关系。1.5统计学分析采用SPSS12.0统计学软件对数据进行相关统计学分析。计数资料采用x2检验,卩〈0.05为差异有统计学意义。2结果2.1胃癌组织与正常胃黏膜组织中G

8、alectin-3及E-cadherin蛋白表达情况Galectin-3位于上皮

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