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《沉默UVRAG基因对二烯丙基二硫诱导K562细胞中caspase3的表达.pdf》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。
1、R51UDC610~-510555~±~1lli~X(~~~{l))JL~WkUVRAG~~~t_::;J)fi~~_::;;_,t*~K562~ll1JJ~'fcaspase3a~.RUi201545}].tJ,f~tUNIVERSITYOFSOUTHCHINA)JLJ~UVRAG~~_xt..::.;1;$-~~-=-zJ.Lik~K562~~tfcaspase3~.Rl!.i~X1-fI~A1:~jktz£~±11:12£@1,mi¥::A*~1~tt~~~WOOA2:W&~,~~ff~W,M$**mam$~~~¥#~ffl~±
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5、胞发生凋亡及自噬之间的相互关系。方法1）K562细胞培养体系进行细胞培养。不同浓度20mg/L、40mg/L、80mg/LDADS作用K562细胞12小时后提取细胞蛋白，采用蛋白印迹技术（WesternBlotting）检测凋亡相关基因caspase-3的表达。2）将构建成功并筛选出最有效干扰抑制UVRAG基因的siRNA序列片段采用lipofectamineTM2000脂质体转染法转染白血病K562细胞24小时，利用QT-PCR检测UVRAGmRNA的表达水平以此观察干扰效果。3）将转染成功的白血病K562细胞以40mg/LDADS
6、处理12小时，采用蛋白印迹技术检测凋亡相关基因caspase-3的表达。结果1.以不同浓度的DADS(20、40、80mg/L)处理K562细胞12h后，通过westernbloting检测到：与空白组相比，DADS药物处理组凋亡相关基因caspase-3的蛋白表达量呈增多的趋势（P<0.05）,但药物处理组之间的差异不明显（P>0.05）。2.QT-PCR显示：与空白组、阴性对照组及阳性对照组相比，沉默UVRAG基因后mRNA的产物明显下降，证实了沉默UVRAG基因的小干扰实验成功，而40mg/LDADS药物处理小干扰后的K562细
7、胞12h，mRNA的产物下降更明显。3.将40mg/LDADS处理小干扰成功的K562细胞12小时提取细胞蛋白，通过westernbloting检测到：与空白组相比，沉默UVRAG后K562细胞中凋亡相关基因caspase-3的蛋白表达量明显减少（P<0.05）。结论1.提示了DADS所诱导的细胞自噬依赖于细胞内固有的UVRAG基因的表达水平。2.抑制UVRAG介导的自噬可能也抑制DADS诱导K562细胞发生凋亡。关键词：二烯丙基二硫；K562细胞；凋亡；抗紫外线相关基因；半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3ITHEEXPRESSIONOFCAS
8、PASE3INLEUKEMIAK562CELLTHROUGHSILENCEUVRAGINDUCEDDIALLYLDISULFIDEName:xiaoyanfang(pediatrics)Directorby:yinxia
