药品微生物检验基础知识.ppt

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1、微生物检验技术基础知识制剂中心药检室张文20160225目录一、微生物基本介绍二、培养基三、菌种四、微生物限度检查法一、微生物基本介绍1、微生物的定义微生物是一些形体微小，以单细胞或简单多细胞、甚至是没有细胞结构的形式存在的低等生物的统称。2、微生物的分类微生物的主要分类单位：域、界、门、纲、目、科、属、种、变种、亚种（小种）、型、菌株（品系）“种”是最本的分类单位，例：大肠埃希菌一、微生物基本介绍3、微生物的特点体形微小；结构简单；生长繁殖快；种类繁多，分布广，适应性强。包括：细菌、酵母菌、霉菌、放线菌、立克次氏体、支原体和病毒等。一、微生物基本介绍4.1细菌药典收录的有代表性的常见细菌

2、有1大肠埃希菌2金黄色葡萄球菌3枯草芽孢杆菌4生孢梭菌5铜绿假单胞菌1大肠埃希菌大肠埃希氏菌（Escherichiacoli）通常被称为大肠杆菌，是Escherich在1885年发现的，在相当长的一段时间内一直被当作正常肠道菌群的组成部分认为是非致病菌。一般多不致病，为人和动物肠道中的常居菌，在一定条件下可引起肠道外感染。某些血清型菌株的致病性强，引起腹泻，统称致病性大肠杆菌。人体感染致病EHEC后，会发生严重的痉挛性腹痛和反复发作的出血性腹泻，同时伴有发热、呕吐等表现，多为EHEC产生的毒素所致。2金黄色葡萄球菌金黄色葡萄球菌是人类化脓感染中最常见的病原菌，可引起局部化脓感染，也可引起肺

3、炎、伪膜性肠炎、心包炎等，甚至败血症、脓毒症等全身感染。金黄色葡萄球菌(Staphylococcusaureus)是人类的一种重要病原菌，隶属于葡萄球菌属有“嗜肉菌"的别称，是革兰氏阳性菌的代表，可引起许多严重感染。2金黄色葡萄球菌典型的金黄色葡萄球菌为球型，直径0.8μm左右，显微镜下排列成葡萄串状。3枯草芽孢杆菌枯草芽胞杆菌，是芽胞杆菌属的一种。单个细胞0.7～0.8×2～3微米，着色均匀。无荚膜，周生鞭毛，能运动。革兰氏阳性菌，芽孢0.6～0.9×1.0～1.5微米，椭圆到柱状，位于菌体中央或稍偏，芽孢形成后菌体不膨大。菌落表面粗糙不透明，污白色或微黄色，在液体培养基中生长时，常形成

4、皱醭。需氧菌。4生孢梭菌生孢梭菌（Clostridium sporogenes）又译产孢梭菌，能够产生孢子，革兰氏染色阳性，以周生鞭运动，严格厌氧的梭菌。5铜绿假单胞菌铜绿假单胞菌的学名是Pseudomonasaeruginosa，绿脓假单胞菌属为革兰染色阴性需氧菌，存在于土壤、尘埃、水和少数人体肠道中，亦可暂时寄生于皮肤，主要寄生在肛门、生殖器部位、腋窝和外耳道等处。在正常情况下一般不致病，当机体抵抗力低下时可致病，还可引起病人死亡。细菌鉴别革兰氏染色格兰仕阳性菌例如：金黄色葡萄球菌，也称“金葡菌”，细胞壁含90%的肽聚糖和10%的磷壁酸。其肽聚糖的网状结构比革兰氏阴性菌致密，染色时结晶

5、紫附着后不被酒精脱色故而呈现紫色革兰氏阴性菌例如:大肠埃希菌的细胞壁肽聚糖层薄、交联度差，脂类含量高，所以紫色复合物被酒精冲掉然后附着了沙黄的红色。革兰氏染色革兰氏染色法一般包括初染、媒染、脱色、复染等四个步骤，具体操作方法是：1）涂片固定。2）草酸铵结晶紫染1分钟。3）自来水冲洗。4）加碘液覆盖涂面染约1分钟。5）水洗，用吸水纸吸去水分。6）加95%酒精数滴，并轻轻摇动进行脱色，20秒后水洗，吸去水分。7）蕃红染色液（稀）染1分钟后，自来水冲洗。干燥，镜检。染色结果革兰氏阳性菌呈蓝紫色，革兰氏阴性菌呈红色。染色结果革兰氏阳性菌呈蓝紫色，革兰氏阴性菌呈红色一、微生物基本介绍4.2真菌（包括

6、酵母菌和霉菌）1黑曲霉菌2白色念珠菌1黑曲霉菌黑曲霉，半知菌亚门，丝孢纲，丝孢目，丛梗孢科，曲霉属真菌中的一个常见种。广泛分布于世界各地的粮食、植物性产品和土壤中。2白色念珠菌白色念珠菌沙氏葡萄糖琼脂白色念珠菌白色念珠菌（Moniliaalbican或canidiaAlbicans），是一种真菌，通常存在于正常人口腔，上呼吸道，肠道及阴道，是医学全身性真菌感染病的重要途径，可以引起心膜炎、肺炎、尿布疹、鹅口疮、阴道炎、脑膜炎、及败血症。白色念珠菌右图：白色念珠菌在该批念珠菌显色对照培养基表面培养48小时的生长形态。左图：白色念珠菌在该批念珠菌显色对照培养基表面培养24小时的生长形态；一、微

7、生物基本介绍5、微生物与我们每张人民币带细菌：900万个；人体体表及体内存在大量的微生物；皮肤表面：平均10万个细菌/平方厘米；口腔“细菌种类超过500种；肠道：微生物总量达100万亿；（未清洗的手）（清洗过的手）一、微生物基本介绍二、培养基1、培养基的制备培养基的配制：按处方配制，使用按处方生产的符合规定的脱水培养基二、培养基配制时注意：不得使用结块或颜色发生改变的脱水培养基；常用的溶剂是纯化水、蒸馏水，避免使用自来水