基因工程的工具——酶与载体.ppt

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1、基因工程的工具学习目标：1.能说出基因工程的概念2、举例说出基因工程的工具基因工程的概念：基因工程的别名操作环境操作对象操作水平基本过程DNA重组技术生物体外基因DNA分子水平剪切→拼接→导入→表达基因工程培育抗虫棉的简要过程：普通棉花(无抗虫特性)苏云金芽孢杆菌提取抗虫基因加以修饰改造棉花细胞(含抗虫基因)棉花植株(有抗虫特性)提取导入加以修饰改造导入培育抗虫棉的过程中需要哪些工具呢？AAGCCATTGGTC氢键磷酸二酯键1.2.T磷酸二酯键1234512345A一、限制性核酸内切酶1.来源：2.特点：3.结果：微生物(例：大肠杆菌）（1）识别特定的脱

2、氧核苷酸序列（2）在特定的位点切割磷酸二酯键。能被限制性内切酶特异性识别的切割部位一般具有回文序列：在切割部位，一条链正向读的碱基顺序与另一条链反向读的顺序完全一致2.作用特点——断开特定部位的磷酸二酯键限制酶的识别序列——回文序列限制性核酸内切酶作用过程点击播放二.DNA连接酶1.连接酶的作用：2.连接的部位：将互补配对的两个黏性末端连接起来，使之成为一个完整的DNA分子。磷酸二酯键，不是氢键。DNA连接酶的作用过程点击播放【学以致用】1、下列黏性末端属于同一种限制性核酸内切酶切割而成的是()A.①②B.①③C.①④D.②③B三.基因工程的载体——质粒

3、具备的条件①复制区,即含复制原点。②含标记基因,主要是抗性基因.③目的基因插入位点,即限制性核酸内切酶切割位点.常用的载体：质粒能复制并带着插入的目的基因一起复制有切割位点有标记基因的存在，可用含氨苄青霉素的培养基鉴别课堂练习1.质粒是基因工程最常用的载体,有关质粒的说法正确的是()A.质粒不仅存在于细菌中,某些病毒也具有B.细菌的基因只存在于质粒上C.质粒为小型环状DNA分子,存在于拟核外的细胞溶胶中D.质粒是基因工程中的重要工具酶之一C2.下图为DNA分子的某一片段,其中①②③分别表示某种酶的作用部位,则相应的酶依次是()A.DNA连接酶、限制性核酸

4、内切酶、解旋酶B.限制性核酸内切酶、解旋酶、DNA连接酶C.解旋酶、限制性核酸内切酶、DNA连接酶D.限制性核酸内切酶、DNA连接酶、解旋酶C3、思考题基因工程中,需使用特定的限制性核酸内切酶切割目的基因和质粒,便于重组和筛选。已知限制性核酸内切酶Ⅰ的识别序列和切点是—G↓GATCC—，限制性核酸内切酶性内切酶Ⅱ的识别序列和切点是—↓GATC—。根据图示判断下列操作正确的是()A.目的基因和质粒均用限制性核酸内切酶Ⅱ切割B.目的基因和质粒均用限制性核酸内切酶Ⅰ切割C.质粒用限制性核酸内切酶Ⅱ切割,目的基因用限制性内切酶Ⅰ切割D.质粒用限制性核酸内切酶Ⅰ切

5、割,目的基因用限制性内切酶Ⅱ切割D再见多谢！