农残检测步骤.doc

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1、农残速测步骤一、试剂配制缓冲液:将一包缓冲剂倒入510ml蒸馏水中搅拌溶解。酶:倒入10ml缓冲液至瓶中,摇匀溶解。显色剂:倒入10ml缓冲液至瓶中,摇匀溶解。底物:加入10ml蒸馏水至瓶中,摇匀溶解。试剂配制好后放入冰箱冷藏,保质期为3个月。二、仪器预热及空白对照。提前将仪器开机预热,此过程一般10分钟。登陆账号和密码均为000000。预热结束后点空白对照,观察每个通道显示的光强度,在10000-40000则光源正常。三、样品制备、提取1、将样品剪至1cm左右大小,称取2g样品至样品瓶中。块茎类称4g。2、加入10ml缓冲液振荡1-2分钟,放置10-15分钟备用。若液体浑浊或

2、杂质较多,则过滤后备用。三、加试剂1、每个样品提取液分别吸取2.5ml至刻度试管中,另取一只试管加入2.5ml缓冲液代替样品作为空白对照。2、加入100ul酶、100ul显色剂到各试管中,混匀反应15分钟。若室温低于25℃,需37℃水浴下反应。3、加入100ul底物至各试管中,摇匀。四、上机比色1、将试管中液体倒入比色皿,放入速测仪检测通道。第一通道放入空白对照,其余通道放入样品溶液。(毛玻璃面对准自己。)2、关上盖子,点击“试剂对照”--开始,等待3分钟即可。五、结果1、通过数据管理可查看和打印结果。2、若抑制率大于50%,则结果判定为阳性。出现阳性时需复测1-2次,若仍为阳

3、性,方可下结论。六、注意1、葱、蒜、萝卜、韭菜、芹菜、香菜、茭白、蘑菇及番茄汁液中,含有对酶有影响的植物次生物质,容易产生假阳性。处理这类样品时,可采取整株(体)蔬菜浸提或采用表面测定法。2、对一些含叶绿素较高的蔬菜(缓冲液浸提后,明显颜色较深的样品),也可采取整株(体)蔬菜浸提的方法,减少色素的干扰。

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