农残检测方法.doc

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1、农残检测方法1.农残试剂配置缓冲溶液：取一包缓冲剂，加入500ml蒸馏水，溶解搅拌均匀，密闭、避光、阴凉处保存。显色剂：取显色剂一瓶，加入15ml缓冲溶液溶解，4℃冰箱中保存。底物：取底物一瓶，加入15ml蒸馏水溶解，4℃冰箱中保存。乙酰胆碱酯酶：取乙酰胆碱酯酶一瓶，用3ml缓冲溶液溶解，4℃冰箱中保存。注：因农残试剂生产厂家众多，使用时请以试剂说明书为准！2.样品处理选取有代表性的蔬菜样品，擦掉样品表面泥土，剪成1cm见方碎片，取样品1g，放入烧杯或提取瓶中，加入5ml缓冲溶液，振荡1min～2min，倒出提取液，静置3min～5min，待用。注意：样品不可用水冲洗，应擦去表面泥土等杂物后取

2、样。为了保证取样具有代表性，叶菜一般取来自不同植株叶片的叶尖部样本，果菜从不同个体的表皮处取样。3.对照溶液测试在提取瓶中加入2.5ml缓冲溶液，再加入100ul酶液、100ul显色剂，摇匀后于37℃放置15分钟(每批样品的控制时间必须一致)。15分钟后再加入100μL底物摇匀,此时检液开始显色反应,应立即倒入1cm比色皿，放入仪器比色池中，将仪器调到测量界面,按操作指示面板按键区的“对照”按钮，仪器开始做对照。3分钟后仪器自动对照完成，对照完成后将对照样取出，保持仪器界面不变。注意：对照测试必须在第一通道进行，对照测试△A应＞0.3，若对照测试的结果小于以上数值时，仪器会自动提示“对照错误”

3、，须重新做对照，以保证测量结果的准确性。(对照测试△A<0.3的原因：一是酶的活性不够，二是反应温度太低。)4.样品溶液测试另取干净的提取瓶，放入2.5ml样品提取液，加入100ul酶液、100ul显色剂，摇匀后于37℃放置15分钟(放置的时间与对照液放置的时间必须一致)。15分钟后再加入100μL底物摇匀,此时检液开始显色反应,应立即倒入1cm比色皿，放入仪器比色池中，按操作指示面板按键区的“测量”按钮开始测量，3分钟后仪器测量完成，显示测量结果。结果以酶被抑制的程度（抑制率）表示，当蔬菜样品提取液对酶的抑制率≥50%时，表示蔬菜中有高剂量有机磷或氨基甲酸酯类农药存在，样品为阳性结果，阳性结

4、果的样品需要重复检验2次以上。对阳性结果的样品，可用其它方法进一步确定具体农药品种和含量。5.说明葱、蒜、萝卜、韭菜、芹菜、香菜、茭白、蘑菇及番茄汁液中，含有对酶有影响的植物次生物质，容易产生假阳性。处理这类样品时，可采取整株（体）蔬菜浸提。对一些含叶绿素较高的蔬菜，也可采取整株（体）蔬菜浸提的方法，减少色素的干扰。甲醛检测方法1.试剂配置甲醛试剂（一）甲醛试剂（二）：将甲醛试剂（二）①加少量热水溶解，再加入甲醛试剂（二）②，冷却后定容于50ml容量瓶注意：所有试剂均需避光、低温（冰箱4℃）保存！甲醛试剂（一）有腐蚀性；配制好的甲醛试剂（二）可使用一个月。2.样品处理准确称取0.2g样品放入哈

5、希管中，加入5滴甲醛试剂（一）和10ml蒸馏水，混匀后盖紧瓶盖，放入沸水中加热5min，取出冷却至室温，用0.45μm微孔滤膜过滤，以除去悬浮颗粒，此为待测溶液。3.空白取蒸馏水10ml于10ml比色管中，加入甲醛试剂（二）1ml，混合均匀，放入恒温水浴锅中50℃加热15分钟，取出冷却至室温，移入1cm比色皿中，放入仪器相应比色池中，按操作指示面板区的“对照”键进行对照，对照完成后，仪器会自动记录对照结果，并在显示屏下方显示为“对照测量完成”。4.测量移取处理好的样品溶液5ml于10ml比色管中，加入蒸馏水定容至10ml，然后再加入甲醛试剂（二）1ml，混合均匀，放入恒温水浴锅中50℃加热15

6、分钟，取出冷却至室温，移入1cm比色皿中，放入已经做过对照的仪器通道中按操作提示面板区的“测量”键进行测量，测量完成后，仪器自动显示样品中甲醛浓度值X（mg/kg）。吊白块检测方法1.试剂配置吊白块试剂（一）吊白块试剂（二）：将吊白块试剂（二）①加少量热水溶解，再加入吊白块试剂（二）②，冷却后定容于50ml容量瓶注意：所有试剂均需避光、低温（冰箱4℃）保存！吊白块试剂（一）有腐蚀性；配制好的吊白块试剂（二）可使用一个月。2.样品处理准确称取0.2g样品放入哈希管中，加入5滴吊白块试剂（一）和10ml蒸馏水，混匀后盖紧瓶盖，放入沸水中加热5min，取出冷却至室温，用0.45μm微孔滤膜过滤，以除

7、去悬浮颗粒,此为待测溶液。3.空白取10ml蒸馏水于10ml比色管中，加入吊白块试剂（二）1ml，混合均匀，放入恒温水浴锅中50℃加热15分钟，取出冷却至室温，移入1cm比色皿中，放入仪器相应比色池中，按操作指示面板区的“对照”键进行对照，对照完成后，仪器会自动记录对照结果，并在显示屏下方显示为“对照测量完成”。4.测量移取处理好的样品溶液5ml于10ml比色管中，加入蒸馏水定容至10ml，然后再