探讨实时荧光定量PCR 在不孕不育患者诊断和治疗中作用.doc

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时间:2020-03-04

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1、探讨实时荧光定量PCR在不孕不育患者诊断和治疗中作用摘耍:目的用实时荧光泄量PCR(FQ-PCR)泄量检测不孕不育患者解JK支原体(UU)、沙眼衣原体(CT)基I大I,观察UU、CT感染情况与不孕不育的关系,探讨实时荧光圧量PCR在不孕不育患者诊断和治疗屮作用.方法采用FQ-PCR技术检测标本402份.结果UU阳性率是32.8%,其屮男性UU阳性率是21.4%,女性UU阳性率是44.3%.CT阳性率是16.2%,其中男性CT率是11.4%,女性CT率是20.9%.UU感染率在男性、女性患者有极显着牲差异(P<0.01),而CT感染率在性别之间有显着件差异(P>0.

2、05).结论解JK支原体(UU)、沙眼衣原体(CT)是引起男女不育的主要原因之一,实时荧光定量卩CR检测UU、CT基因具有操作简单、反应时间短、重复性好、结果客观准确、敢感性和特异性好等优点,英结果对临床诊断、治疗有一定指导意义.关键词:不育;沙眼衣原体;解服支原体;实时荧光定量Abstract:Objective:TodetectquantitativelythegeneofUreaplasinurealyticum(UU)andChlamydiatrachomatis(CT)Infertilitybytechnologyoffluorescencequanti

3、tativepolymerasechainreaction(FQ-PCR),tounderstandfurtherinfectionsconditionoflJUandCT,andtoprovideclinicaltreatmentevidencetothedisease.Methods:Detection402specimentsbytechnologyofFQ-PCR.Results:thepositiveofUUwas32.8%ofallthese;malepositivewas21.4%,andfemalewas44.3%.thepositiveofCTw

4、as16.2%ofallthese;maleposiaivewas11.4%,andfemalewas20.9%.InfectiousratesofIHJ、CThadobviousstatisticsdifferencebetweenmalesandfemales.Conclusion:ThefluorescencequantitativePCRassaysshowedadvantageswhichwerenuiinpu1atedsinipIy,time-saving,moreextra,moresensitiveandmorespectificindetecti

5、ngCTandUU.FQ-PCRhaddirectivemeaningfordagnosisandtreatmcat.Keywords:Fertility;UU;CT;FQ-PCR不育夫妇在近儿年来增多的态势,而英中病原微生物是引起育龄夫妇不育的重耍原因之一;在引起不育众多的病原体中,男、女双方非淋菌性尿道炎(NGU)感染引起的不孕不育是页学界普遍关注的问题之一;而非淋菌性廉道炎(NGU)中的主耍病原体沙眼衣原体(CT)、解JK支原体(UU),在世界范尉内.英流行和传播呈丄升趋势[1].I大1此,UU和CT感染的诊断和治疗必须引起我们高度的垂视.目丽,人多数页院采

6、用病原体培养、免疫学检测或常规PCR等方法进行检测,我们采用实时荧光定量PCR方法检测不育患者病原菌基I大I,取得较好效果,现报道如下.资料与方法1.标本来源:标本2009年1月至2011年12月在本院不育专科门诊就诊的结婚两年以上、夫妻性生活正常、未避孕而未孕夫妇共201対,其屮男性年龄23至45岁,平均32.5岁;女性年龄21岁至40岁,平均28.1岁.对照组是从本院体检随机抽取冇」E常生育能力夫妇,经临床医生详细体格检査无井淋菌性尿道炎症状且无不良性生活史抽取30对作对照,英屮男性年龄24至48岁,平均35.2岁;女性年龄21岁至41岁,平均29.2岁.2.

7、仪器:本实验采用美国罗氏公司实时口动荧光定量DNA扩增仪.3.FQ-PCR试剂盒:本实验UU、CT试剂盒均为广州中山大学达安基因股份有限公司产品.1.方法(1)标本取材方法:用常规消毒棉签插入宫颈口或尿道口捻转并停留数秒•如果男性尿道口分泌物过少,则进行前列腺按摩术,取前列腺液2-3滴.收取了标本的棉签放人无菌试管内,加入1毫升生理盐水,震荡洗涤.(2)试剂盒使用方法:将标本洗涤液12000rpm离心5miri去上淸液,采用常规碱裂解法提取UU、(:T-DNA.各反应管放人罗氏口动荧光定量PCR检测仪,按下列条件扩增:93aC5min预变性,然后按93oC45s-

8、55°C1

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