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时间:2020-03-03
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1、V10级现代分子生物学期末复习刘康现代分子生物学复习知识点1.DNA的双螺旋模型特点:螺旋直径2nm,相邻碱基平面垂直距离0.34nm,螺旋结构每隔10个碱基对(basepair,bp)重复一次,间隔为3.4nm。其意义:该模型揭示了DNA作为遗传物质的稳定性特征,最有价值的是确认了碱基配对原则,这是DNA复制、转录和反转录的分子基础,亦是遗传信息传递和表达的分子基础。2.核小体(nucleosome):染色质的基本结构亚基,由约200bp的DNA和组蛋白八聚体所组成。每个核小体含有约200bp的DNA,核心组蛋白H2A、H2B、H3和H4各2份拷贝,1份拷贝的H1组蛋白位于核小体外侧
2、。H1组蛋白不同组织和物种之间有明显的差异(在酵母中不存在)。微球菌核酸酶(micrococcalnuclease)处理染色体可得到单个核小体。每个核小体有2圈DNA。3.染色体(chromosome):是指在细胞分裂期出现的一种能被碱性染料强烈染色,并具有一定形态、结构特征的物体。携带很多基因的分离单位。只有在细胞分裂中才可见的形态单位。4.染色体的组成:组蛋白,非组蛋白,DNA,少量RNA5.组蛋白的特性(组蛋白分为H1、H2A、H2B、H3、H4):(1)进化上的极端保守性(2)无组织特异性(3)肽链上AA分布的不对称性(4)组蛋白的修饰作用(5)富含赖氨酸的组蛋白H5。6.原核
3、生物基因组结构特点:(1)基因组小;大多只有一条染色体,且DNA含量(2)结构简练;不转录部分很少且常是控制基因表达的序列(3)存在转录单元;多顺反子mRNA,这些功能相关的RNA和蛋白质基因协同表达。(4)有重叠基因;同一段DNA能携带两种一同的蛋白质信息,主要是:一个基因完全存在于另一个基因内。部分重叠:两个基因只有一个碱基对的重叠。7.C值(C-value):单倍体基因组中DNA的总量.在真核生物中,每种生物的单倍体,基因组的DNA总量总是恒定的,称为C-值8.C值矛盾(C-valueparadox):一个有机体的C值与它的编码能力缺乏相关性称为C值矛盾。9.一个DNA分子可能含
4、多个复制子。在复制的启动位点具有起始点(origin),在复制的终止位点具有终点(terminus)。起始点仅作用于所在复制子。10.质粒一般是一个自主环状的DNA基因组,构成一个独立复制子;原核生物基因组中一般只含一个复制子,在唯一的起始点启动就会引起整个基因组复制;真核生物基因组含多个复制子(一般40-100kb/个)。11.复制叉移动方向的确定:放射性自显影法;单向复制;双向复制。12.环状DNA的复制:θ-复制;滚环复制;D-环复制。13.拓扑异构酶的种类分为Ⅰ型和Ⅱ型。原核拓扑构酶Ⅰ:切断一条DNA链,形成酶-DNA共价中间物而使超螺旋DNA松弛,然后再将切断的单链DNA连接
5、起来。每次改变一个连环数;拓扑异构酶Ⅱ:使DNA的两条链同时发生断裂和再连接,使正超螺旋转化为负超螺旋,每次改变两个连接数。14.原核生物(大肠杆菌)DNA聚合酶的种类及其功能:(1)DNA聚合酶I:可以被蛋白酶切成两段,C端的2/3区域,又称为Klenow片段,同时具有DNA聚合酶活性和3’-5’核酸外切酶活性(校正错配核苷酸),既可合成DNA链,又能降解DNA;N端的1/3具有5’-3’核酸外切酶活性(切除RNA引物)。(2)DNA聚合酶II:具有3’-5’核酸外切酶活性,目前认为主要是起修复DNA的作用。(3)DNA聚合酶III:具有DNA聚合酶活性和3’-5’核酸外切酶活性,是
6、大肠杆菌DNA复制中链延长反应的主导聚合酶。15.DNA聚合酶造成的复制错误可分为两类:移码【frameshift指一个核苷酸的插入或缺失】和替换【substitution指掺入错误核苷酸(不正确配对)】。16.DNA的损伤修复:错配修复;切除修复;DNA直接修复;重组修复;SOS反应诱导的修复。错配修复(Mismatchrepair):原核细胞内存在Dam甲基化酶,能使位于5`GATC序列中腺苷酸的N6位甲基化。复制后DNA在短期内(数分钟)为半甲基化的GATC序列,一旦发现错配碱基,即将未甲基化链切除一段包含错误碱基的序列,并以甲基化的链为模板进行修复。DNA直接修复(direct
7、repair):生物体内存在多种DNA损伤以后而并不需要切除碱基或核苷酸的机制,把损伤的碱基回复到原来状态的一种修复方式称为DNA的直接修复。重组修复(Recombinationrepair):又被称为“复制后修复”VV10级现代分子生物学期末复习刘康,它发生在复制之后。机体细胞对在复制起始时沿未修复的DNA损伤部位可以先复制再修复,即先跳过该损伤部位,在新合成链中留下一个对应于损伤序列的缺口,该缺口由DNA重组来修复。即从同源DNA的母链上将
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