微生物实验报告--霉菌的培养及形态观察.doc

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1、霉菌的培养及形态观察生命科学学院生科三班郑小煜201100140069同组者：刘梦迪、赵莉、高瑞2012年月14日一、实验冃的和要求1＞学习并掌握霉菌形态观察法一小室培养。2、初步了解四类霉菌的基本形态特征。3、学习并掌握马铃薯培养基的配制方法和载玻片培养的基本技术。4、巩固显微镜操作技术及无菌操作技术。二、实验原理1＞霉菌菌丝体由基内菌丝、气生菌丝和繁殖菌丝组成，其菌丝比细菌粗几倍到几十倍，可以釆取直接制片和透明胶带法观察，也可以采取载玻片培养观察法，通过无菌操作将薄层培养基琼脂置于载玻片上，接种后盖上盖玻片培养，使菌丝体在盖玻片和载玻片之间

2、的培养基中生长，将培养物直接置于显微镜下可观察到霉菌自然生长状态并可连续观察不同发育期的菌体结构特征变化。2、霉菌菌丝体(尤其是繁殖菌丝)及砲子的形态特征是识别不同种类霉菌的重要依据。霉菌与人类的生活息息相关，女2根霉(Rhizopussp.)是酿造工作中常用糖化菌;毛霉(Mucorsp.)常出现在药酒中，能糖化淀粉并能生成少量乙醇，产生蛋白酶。黑曲霉(Aspergillusniger)是重要的发酵工业菌种,可生产淀粉酶、酸性蛋白酶、纤维素酶等;青霉(Penicilliumsp.)在丁.业上,它可用于生产柠檬酸，延胡索酸，葡萄糖酸等有机酸和酶制

3、剂；最著名的抗生素一青霉素就是从青霉的某些品系中提取出来的。3、本实验采用载玻片培养观察法，通过无菌操作将薄层培养基琼脂置于载玻片上，接种后盖上盖玻片培养，使菌丝体在载玻片和盖玻片之间的营养基中生长，将培养物直接放在显微镜下观察霉菌在自然生长下的形态特征。三、实验材料1、菌种：在马铃薯琼脂斜面上培养7天的根霉、毛霉、黑曲霉和青霉。2、培养基：马铃薯培养基3、仪器和其他用品：20%甘油、移液管（5mL）2支、马铃薯、蔗糖、琼脂、纱布、平皿、解剖刀、银子、载玻片、盖玻片、玻璃棒、接种环、U型玻棒、显微镜等。四、实验步骤1、马铃薯琼脂薄层平板的制备（

4、1）将马铃薯去皮，称量约30g,切成小块煮沸半个小时。（2）用纱布过滤，再加入2g蔗糖及2g琼脂，溶化后补足水至lOOmLo（3）将配置好的培养基倒入试管中约100mL,塞紧棉塞，用牛皮纸包好并做上记号。（4）将上述试管置于高压蒸汽灭菌锅内于121°C屮灭菌30mino（5）取出试管，通过无菌操作将培养基倒入已灭菌的平皿屮，制成马铃薯琼脂薄层平板。2、配置20%甘油溶液（1）用己灭菌的移液管取10mL无水甘油于烧杯中。（2）加入蒸馆水至50mL即配置好20%的甘油溶液。3、霉菌制片（载玻片培养观察法）（1）培养小室准备及灭菌：在平皿底铺一张略小

5、于皿底的圆滤纸片，在其上放一个U型玻棒，在U型玻棒上放一块载玻片和四块盖玻片，盖上皿盖，与121。C灭菌30min,烘干备用。（2）琼脂块制备：通过无菌操作，用解剖刀由马铃薯琼脂薄层平板上切下ICE?左右的琼脂快，将其移至培养小室的载玻片•上，盖玻片之下，每片两块。（3）接种：通过无菌操作，用接种针从黑曲霉、根霉、毛霉或青霉马铃薯琼脂平板培养物中挑取很少量他子，接种于培养小室中琼脂块边缘上，将盖玻片覆盖在琼脂块上。（4）培养：通过无菌操作，在培养小室中圆滤纸片上加3~5mL灭菌的20%甘油（用于保持湿度），盖上皿盖，于28°C培养。（5）镜检：

6、根据需要于不同时间取出载玻片用低倍镜和高倍镜镜检。五、实验绘图根霉青霉黑曲霉毛霉六、实验结果分析1、根霉：菌丝无隔单细胞，有假根、匍匐菌丝，假根着生处直立向上，包囊梗其顶端膨大为抱子囊，抱囊底部为半球形囊轴，有性繁殖，接合砲子。2、青霉：菌丝有横隔，分生抱子梗顶端不膨大，可多次分支形成几轮，对称或不对称分生小梗，小梗顶端有分生抱子，分生抱子有隔，扫帚状。3＞黑曲霉：菌丝有隔，分生砲子梗顶端膨大形成球状，顶囊表面可辐射状生出一层或两层小梗，小境上生有成串的褐黑色的球状分生抱子，分生砲子梗无隔，有足细胞。4、毛霉：菌丝无隔，无匍匐丝、假根等，抱囊梗

7、直接由菌丝生出，一般单生，抱囊梗顶端有球形抱囊。七、实验注意事项1、在直接制片观察法中，用锻子取菌和用解剖针分散菌丝时耍细心，尽量减少菌丝断裂及形态被破坏，盖盖玻片时避免气泡产生。2、在载玻片培养观察中，注意无菌操作，接种量要少并尽可能将分散鞄子接种在琼脂块边缘，避免培养后菌丝过于密集影响观察。3、观察时应适当调整微调，这样可以看清菌丝体在各个方位的立体图像。4、培养吋要注意无菌操作，以防杂菌影响所需要观察的霉菌的生长，影响观察。八、实验思考题1、黑曲霉和根霉在形态特征上有何区别？根霉属：菌丝体产生匍匐枝，匍匐枝末端长有假根。这是与毛霉属区别的

8、主耍形态特征。根霉具有很强的糖化酶活力，能使淀粉分解为糖，是酿酒工业常用的糖化菌。码霉属：分枝并具有横隔，分生抱子从分化了的菌丝（具有厚壁的足细胞）上