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时间:2020-02-06
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1、第八章吸光光度法计划学时:4学时本章知识要点:1.光的基本性质,可见光吸收光谱的产生及特征。2.吸光光度法的基本原理。3.比色、分光光度法仪器的原理、构造。4.显色反应及影响因素。5.光度法测量误差及测量条件的选择6.吸光光度法在定量分析方法应用一、物质对光的选择性吸收吸光光度法是基于被测物质分子对光具有选择吸收的特性而建立的分析方法。§8-1吸光光度法基本原理本章主要讨论:在溶液中进行的可见吸光光度法。可见光:是指人眼所能感觉到的波长范围为360~750nm的电磁波光的波粒二象性波动性粒子性(波长)(频率)E(能
2、量)h:6.625610-34J.s不同波长的光具有不同的能量,波长越短,能量越高;波长越长能量越低。(一)单色光、复合光、光的互补光单色光复合光光的互补具有相同波长的光由不同波长的单色光组成。两种不同颜色的单色光按一定的强度比例混合得到白光,那么就称这两种单色光为互补色光青蓝白光(二)物质对光的选择性吸收一般情况下,物质的分子都处于能量最低和最稳定的基态。当用光照射某物质后,如果光具有的能量恰与物质分子的某一能级差相等时,这一波长的光即可被分子吸收。由于不同物质的分子其组成和结构不同,故能极差也不同,而各物质只能吸
3、收与它们分子内部能级差相当的光辐射,所以不同物质对不同波长光的吸收具有选择性。由于透射光中其他颜色仍然两两互补为白光,所以物质呈现出的颜色恰恰是它所吸收光的互补色。例如:KMnO4溶液呈紫红色,是因为选择性地吸收了白光中的绿青色,呈现出的颜色是它所吸收光的互补色。物质的颜色与光的关系完全吸收完全透过吸收黄色光光谱示意表观现象示意以不同波长的单色光依次照射某一吸光物质,并测量该物质在每一波长处对光吸收程度的大小(吸光度),以波长为横坐标,吸光度A为纵坐标作图,即可得到一条吸光度随波长变化的曲线,称之为吸收曲线或吸收光谱
4、。吸收曲线中吸光度最大值处(吸收峰)对应的波长称为最大吸收波长,以max表示。(三)吸收曲线(吸收光谱)定性分析基础定量分析基础物质对光的选择吸收ABAAC增大吸收曲线---定性分析与定量分析的基础在一定的实验条件下,物质对光的吸收与物质的浓度成正比。吸光光度法的特点吸光光度法属仪器分析,其特点是:(1).灵敏度高。(适于微量组分10-3%~1%、痕量组分10-5%~10-4%分析)(2).准确度较高。(测量的相对误差为2—5%,这对微量组分来说,所引起的绝对误差并不大)(3).操作简便快速。(4).应用广泛。许
5、多金属离子都可用此法分析,某些有机物的定性分析,某些物理化学常数及络合物组成的测定.透光率(透射比)和吸光度透光率:T取值为0.0%~100.0%入射光I0透射光It吸光度溶液对光的吸收程度A取值为~0二.朗伯—比尔定律当一束平行单色光垂直照射到某均匀、非散射的溶液时,溶液的吸光度A与被测物浓度成正比,与液层厚度成正比。是吸光光度法定量分析的理论依据。K:比例常数b:溶液厚度,光程,cmc:吸光物质的浓度,g/L,mol/L朗伯—比尔定律K:比例常数c:mol/LK=摩尔吸光系数,L·mol–1·cm-1c:g/L
6、K=a吸光系数,L·g–1·cm-1I01A=lg—=lg—ItT则:A=-lgT或T=10-A=10-εbc通常以max下的摩尔吸光系数max来衡量分光光度法测定该物质可能达到的最大灵敏度max灵敏度>104<103方法灵敏方法不灵敏ε物理意义:当吸光物质浓度为1mol/L,吸收介质厚度为1cm时,吸光物质对某波长的吸光度。反映吸光物质对光的吸收能力。ε在一定条件下是一常数。①ε摩尔吸收系数(用来表示吸光光度法的灵敏度)当光度仪器的检出极限(即光度计所能检出的最小吸光度)为A=0.001时,单位截面积
7、光程内所能检出的吸光物质的最低含量称为桑德尔灵敏度。单位为g/cm2②桑德尔灵敏度(s)(用来表示吸光光度法的灵敏度)吸光度A的加和性若溶液中含有不止一种吸光物质,则总吸光度等于各个组分吸光度之和:A=A1+A2+..........+An4.有一浓度为2.00×10-4mol/L的有色溶液,在某吸收波长处,于3.00cm的吸收池中测得其吸光度为0.120。将此溶液稀释一倍,在相同波长处,于5.00cm的吸收池中测得其吸光度仍为0.120。问此溶液是否符合比尔定律?为什么?1.吸光光度法是基于物质__________
8、________而建立的分析方法2.分光光度法中,定量的依据是_____________物质对光的选择性吸收朗伯—比尔定律1.比色分析中,用1cm的比色皿测得的透光率为T,若改用2cm的比色皿测得的透光率为( )。A.2TB.T/2C.T2DT1/25.某化合物A在287nm处有强吸收,将其配制成4.0mg/L溶液,用1cm比色皿
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