临床医学论文 人骨形成蛋白7基因修饰的兔骨髓基质干细胞异位成骨实验.doc

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1、临床医学论文•人骨形成蛋白7基因修饰的兔骨髓基质干细胞异位成骨实验作者：闫露，罗二平，鱼兵，栗艳，沈敏，范清宇【摘要】［目的］通过人骨形成蛋白7(humanbonemorphogeneticprotein7,BMP7)基因修饰的兔骨髓基质干细胞(mesenchymalstemcel1s,MSCs)与聚乳酸.疑基乙酸(polycleclidecoplycoclide,PLGA)支架复合，进行自体皮下异位成骨实验，探索BMP-7基因治疗与组织工程技术相结合的可行性。［方法］PLGA与腺病毒Ad-BMP-7感染后的兔MSCs共培养，电镜观察了解细胞在PLGA

2、上黏附、生长和合成分泌骨基质成分的情况；将转染基因的细胞和未转染基因的细胞分别与PLGA支架复合，构建组织工程化骨并植入体内，通过组织观察新骨形成情况。［结果］制备得到的PLGA为疏松多孔的网格样结构，具有一•定的韧性和强度。将腺病毒感染的骨髓基质干细胞接种于修剪成一定形状的PLGA上，经电镜观察可见细胞贴附于材料表面和孔隙内并增殖。异位成骨实验证实空白对照PLGA孔隙内无新骨形成，对照细胞组内有部分新生骨形成，rfn'AdBMP7实验组形成的新生骨组织面积更大(P<0.05)o［结论］应用hBMP7基因修饰的MSCs作为骨组织工程的种子细胞，可望取得

3、更强的成骨能力。【关键词】基因治疗；骨形成蛋白；组织工程Abstract：[Objective]hBMP7genetherapycombinedwithIissueengineeringtechniqueswasexploredtoimproveosteogenesisinanectopicboneformationmodelinrabbits.[Method]PLGA(withdiameterof150〜300umandporosityof90%)waspreparedandautologousbonemarrowstromalcells(bMSCs

4、)infectedbyadenoviruscarringhBMP7gcnc(AdBMP7)wereseededontoit.Scanningelectronicmicroscopingwereusedtoobservecel1matrixinteraction.ThecellsinfectedandnoninfectedwerecombinedwithPLGAataconcentrationof5X106cclls/mltoconstructtissueengineeredbonesrespectively.Theywerefurtherimplant

5、edinto8rabbitssubcutaneouslyusingPLGAasblankcontrol(8implantspergroup).Sixweeksaftersurgery,theimplantswereevaluatedwithhistologicalstainingandcomputerizedanalysisofnewboneformation.[Rcsult]PLGApreparedwasagrid1ikeporousstructure,withdefiniteducti1ityandstrength,andcouldbetrimme

6、dintodifferentmodels.AdenovirusinfectedMSCsseededontoPLGAshowedhighlevelofpro!iferation,andmasssynthesisofcel1matrixwasobservedwithelectronicmicroscoping.Intheectopicboneformationmodel,PLGAalonecouldnotinducenewboneformation.ThenewboneareaformedinthenoninfectedMSCsgroupwas28.6±6

7、.l%,whileAdBMP7groupwas57.5±5.7%,whichwashigherthanthatoftheformersignificantly(P<0.05).[Conclusion]hBMP7genemodifiedMSCscouldenhanceectopicnewboneformationinrabbits・TheseresultsindicatedthattheinfectionofMSCswithhBMP7adenovirusmightbesuitableforbonetissueengineeringapplications

8、・Keywords：genetherapy；bonemorphogeneticprotein；