秋水仙素处理对芦笋达宝利四倍体诱导效果的影响.pdf

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1、北方园艺2017(02):23~30·试验研究·DOI:10.11937/bfyy.201702005秋水仙素处理对芦笋“达宝利”四倍体诱导效果的影响鹿志伟1,2,侯晓婉1,高建明3,张燕梅1,2,周文钊1,2,易克贤4(1.中国热带农业科学院南亚热带作物研究所,广东湛江524091;2.湛江市热带作物遗传改良重点实验室,广东湛江524091;3.中国热带农业科学院热带生物技术研究所,海南海口571101;4.中国热带农业科学院环境与植物保护研究所,海南海口571101)摘要:以芦笋“达宝利”露白种子为试

2、材,秋水仙素(添加2%DMSO)处理浓度和处理时间作为诱导因子,设计多个梯度的正交实验,研究秋水仙素对芦笋四倍体诱导率的影响,以期获得最佳的芦笋多倍体诱导条件。结果表明:最佳的秋水仙素处理组合为0.15%的秋水仙素(添加2%DMSO)处理16h,诱导率高达28.33%;经鉴定发现二倍体芦笋的染色体数目为20条,而四倍体染色体数目为40条;与二倍体相比,四倍体芦笋植株粗壮、叶片长度和直径增加,气孔细胞密度减少,气孔细胞体积增大,叶绿体数目和叶绿素含量增加。关键词:芦笋;四倍体;秋水仙素;诱导;育种中图分类号

3、:S644.603.6文献标识码:A文章编号:1001-0009(2017)02-0023-08[9-11]芦笋(AsparagusofficinalisL.)属百合亚目天好的效果。目前在国内有关芦笋多倍体诱变方[1]门冬科多年生草本植物。作为世界十大名贵蔬菜面的报道很少,只有少数几人有过相关研究,如张元之一,其地上可食用茎部分具有低热量、味道鲜美、[12]国等采用多种化学诱变剂对芦笋露白种子进行多质感脆嫩、富含多种营养物质以及活性成分等优点,倍体诱导,并得到了芦笋四倍体;郑思乡等[13]利用秋[2]深受

4、国内外人士所喜爱。但是随着国内外市场对水仙素对芦笋试管苗进行多倍体诱导,并建立了芦芦笋需求量的日益增加,以及芦笋生产上茎枯病、根笋的组培快繁体系;陈春桦[14]利用秋水仙素对芦笋腐病以及其它病虫害和种植模式的不合理等问题的露白种子和幼苗进行处理,得到了四倍体植株并进出现,导致目前芦笋逐渐出现了供不应求的现象,抗行了形态学等方面的鉴定。在国外,有关芦笋育种病、高产新品种的培育已迫在眉睫。方面的研究侧重于杂交育种技术,对芦笋多倍体诱多倍体即含有2组或者2组以上同源染色体组[15-17]变育种方面的研究很少。[

5、3]的生物个体,多倍体植物与二倍体相比具有植株该研究拟在前人研究的基础上,从处理浓度和[4-7]更加粗壮,营养含量增加,抗逆性增强等优势。处理时间2个方面来进一步探究秋水仙素对芦笋多多倍体诱导常用的方法即化学诱变,主要的诱变剂倍体的诱导作用,经流式细胞仪鉴定后,分别对二倍有氨磺乐灵、秋水仙素、除草剂、生物碱等,其中秋水体和四倍体芦笋植株的形态学、细胞学、染色体水平[8]仙素是众多诱变剂中诱导效果最好的试剂之一,以及叶绿素含量等参数进行综合对比分析,研究二且在冬葱、白杨木、洋槐和西瓜等作物上均取得了良者的差

6、异性,从而为下一步芦笋多倍体育种的进行和推广奠定理论依据。第一作者简介:鹿志伟(1990-),男,硕士研究生,研究方向为作物育种。E-mail:luzhiweihn@126.com.1材料与方法责任作者:易克贤(1964-),男,博士,研究员,现主要从事作物1.1试验材料遗传育种等研究工作。E-mail:yikexian@126.com.供试芦笋品种“达宝利”(‘DcPaoliF1’,2n=基金项目:湛江市热带作物遗传改良重点实验室建设资助项目(2015A06005);海南省应用技术研发与示范推广专项资助

7、2x=20)为市售。项目(ZDXM2015047)。1.2试验方法收稿日期:2016-09-271.2.1露白种子处理取“达宝利”芦笋种子23·试验研究·北方园艺2017(02):23~30[18]3600颗,于30℃条件下蒸馏水浸种2d,期间每1.3.2染色体计数鉴定对经流式细胞仪鉴定过天换1次蒸馏水。2d后将“达宝利”芦笋种子分别的四倍体芦笋苗再次进行染色体水平的鉴定,选择放入干净的托盘中,同时在托盘中喷洒一些蒸馏水09:00—12:00(该时段细胞生长旺盛,显微镜下看到以保持湿润环境,随后用保鲜膜密

8、封起来,每隔6h有丝分裂中期相的机会比较大),取芦笋茎尖,染色观察1次芦笋种子露白情况。体制片采用茎尖敲片技术,选择视野内染色体形态1.2.2秋水仙素处理芦笋露白种子以前人的研标准、分散良好的细胞有丝分裂中期分裂相进行拍[12,14]究为基础,该研究采用添加2%DMSO(二甲基照记录。具体步骤:1)切取生长旺盛时段芦笋茎尖;亚砜)的秋水仙素溶液作为芦笋多倍体的诱导剂,选-1饱和的8-羟基喹啉预处理4h,蒸馏2)0.002mol

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