课题3　血红蛋白的提取和分离.docx

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1、课题3血红蛋白的提取和分离1.通常用哺乳动物的血液来提取和分离血红蛋白，下列叙述中正确的是(　　)A．实验时向新鲜的血液中加入柠檬酸钠的目的是防止血红蛋白变性B．洗涤红细胞的目的是避免细胞粘连在一起C．分离红细胞时要进行较长时间的高速离心D．分离后血红蛋白还要通过凝胶色谱法将样品进一步纯化2.下列说法不正确的是(　　)A．在一定范围内，缓冲溶液能够抵制外界的酸和碱对溶液pH的影响，维持pH基本不变B．缓冲溶液通常由1～2种缓冲剂溶解于水中配制而成C．电泳是指带电粒子在电场的作用下发生迁移的过程D．透析袋能使大分子自由进出，而将小分子保留在袋内3.下列关于凝胶色谱柱的装填的说法，不正确的是(　　

2、)A．交联葡聚糖凝胶(G-75)中“G”表示凝胶的交联程度，膨胀程度及分离范围，75表示凝胶得水值B．色谱柱内不能有气泡存在，一旦发现有气泡，必须重装C．用300mL的物质的量浓度为20mmol/L的磷酸缓冲液充分洗涤平衡凝胶12hD．凝胶用自来水充分溶胀后，配成凝胶悬浮液4.蛋白质的提取和分离分为哪几步，依次是(　　)A．样品处理、凝胶色谱操作、SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳B．样品处理、凝胶色谱操作、纯化C．样品处理、粗分离、纯化、纯度鉴定D．样品处理、纯化、粗分离、纯度鉴定5.在血红蛋白分离过程中，使用缓冲液的作用是(　　)A．维持溶液浓度不变B．维持溶液酸碱度不变C．催化蛋白质分离过程顺利

3、完成D．无实际意义6.下列关于样品的加入和洗脱的叙述，正确的是(　　)A．先加入1mL透析后的样品B．加样前要使缓冲液缓慢下降全部流出C．如果红色区带均匀一致地移动，说明色谱柱制作成功D．洗脱时可以用缓冲液也可以用清水7.凝胶色谱柱制作成功的标志是(　　)A．凝胶装填紧密、均匀B．凝胶色谱柱中有气泡C．洗脱中，红色区带均匀一致移动D．洗脱中，红色区带偏向左边移动8.洗涤红细胞时，离心所采用的方法是(　　)A．低速长时间离心B．低速短时间离心C．高速长时间离心D．高速短时间离心9.对在凝胶柱上加入样品和洗脱的操作，不正确的是(　　)A．加样前要使柱内凝胶面上的缓冲液下降到与凝胶面平齐B．让吸管管

4、口沿管壁环绕移动，贴壁加样至色谱柱顶端，不要破坏凝胶面C．打开下端出口，待样品完全进入凝胶层后，直接连接缓冲液，洗脱瓶开始洗脱D．待红色的蛋白质接近色谱柱底端时，每5mL收集一管，连续收集流出液10.凝胶柱制作的顺序一般是(　　)①橡皮塞打孔　②挖凹穴　③装玻璃管　④盖尼龙网⑤盖尼龙纱　⑥将橡皮塞插入玻璃管　⑦接尼龙管、装螺旋夹　⑧柱顶插入安装玻璃管的橡皮塞A．①③④⑤⑥⑧⑦②B．①②③④⑤⑥⑦⑧C．①②③④⑥⑤⑧⑦D．①②③⑦⑥⑤⑧④11.下列操作正确的是(　　)A．分离红细胞时采用低速长时间离心B．红细胞释放出血红蛋白只需要加入蒸馏水即可C．分离血红蛋白溶液是低速短时间离心D．透析时要用2

5、0mmol/L的磷酸缓冲液，透析12h12.下列有关提取和分离血红蛋白的叙述，错误的是(　　)A．样品的处理就是通过一系列操作收集到血红蛋白溶液B．通过透析可以去除样品中分子质量较大的杂质，此为样品的粗提取C．可通过凝胶色谱法将相对分子质量大的杂质蛋白除去，即样品的纯化D．可通过SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定血红蛋白的纯度13.在血红蛋白的整个提取过程中，不断用磷酸缓冲液处理的目的是(　　)A．防止血红蛋白被氧化B．血红蛋白是一种两性物质，需要酸中和C．磷酸缓冲液会加速血红蛋白的提取过程D．让血红蛋白处在稳定的pH范围内，维持其结构和功能14.将释放出的血红蛋白以2000r/min的速度离心1

6、0min后，可以看到试管中的溶液分为4层，其中哪一层是血红蛋白的水溶液(　　)A．第一层无色透明B．第二层白色C．第三层红色透明D．第四层暗红色15.下列关于蛋白质提取和分离实验中样品处理步骤的描述，正确的是(　　)A．红细胞的洗涤：加入蒸馏水，缓慢搅拌，低速短时间离心B．血红蛋白的释放：加入生理盐水和甲苯，置于磁力搅拌器上充分搅拌C．分离血红蛋白：将搅拌好的混合液离心，过滤后，用分液漏斗分离D．透析：将血红蛋白溶液装入透析袋，然后置于pH为4.0的磷酸缓冲液中透析12h16.利用凝胶色谱法分离蛋白质时，蛋白质洗脱出来的顺序是(　　)①相对分子质量最大的　②相对分子质量最小的③相对分子质量适中

7、的A．①②③B．③②①C．①③②D．②①③17.下列关于血红蛋白的提取和分离的叙述中，错误的是(　　)A．红细胞的洗涤效果与洗涤次数、离心速度和离心时间有关B．凝胶柱中适量气泡的存在会提高分离的效果C．凝胶色谱法是一种根据相对分子质量的大小来分离蛋白质的方法D．判断纯化的蛋白质是否达到要求可以采用电泳法18.下列各项中，除哪项外均为电泳使样品中各分子分离的原因(　　)A．分子带电性质的差异B．分子