复习与测试 (3).ppt

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1、专题2微生物的培养与应用复习复习要点1.培养基的制备2.无菌技术3.平板划线法和稀释涂布平板法的比较4.分离分解尿素的细菌和分离分解纤维素的微生物方法比较5.稀释涂布平板法计数一、培养基的制备1.基本成分（1）碳源：提供碳元素的物质，如CO2、NaHCO3、糖类、脂肪酸、石油、花生粉饼等。（2）氮源：提供氮元素的物质，如N2、NH3、尿素、牛肉膏、蛋白胨等。（3）水：主要来源于培养基、大气、代谢产物。（4）无机盐：主要来源于培养基、大气。2种类（1）按物理性质分（是否加凝固剂琼脂）培养基、培养基、培养基（2）按化学成分分天然培养基：含化

2、学成分不明的天然物质合成培养基：培养基成分明确或用一定化学物质配制(3)按用途分培养基：添加某物质，抑制杂菌生长，促进所需微生物的生长培养基：根据微生物的代谢特点，在培养基中加入某种指示剂3.配制原则(1)目的要明确：根据微生物种类、培养目的等确定配制的培养基种类。(2)营养要协调：注意各种营养物质的浓度和比例。(3)pH要适宜：细菌为，放线菌为，真菌为。4．培养基的制备计算→称量→溶化→→倒平板液体固体半固体选择鉴别6.5～7.57.5～8.55.0～6.0灭菌【例题讲解】高温淀粉酶在大规模工业生产中有很大的实用性。研究者从热泉中筛选

3、出了能高效生产高温淀粉酶的嗜热菌，其筛选过程如下图所示。(1)Ⅰ号培养基从物理状态来看，属于固体培养基，配制时要加入________作为凝固剂，从用途来看属于选择培养基，应以________作为唯一碳源。(2)配置固体培养基的基本步骤是()A.计算、称量、倒平板、溶化、灭菌B.计算、称量、溶化、倒平板、灭菌C.计算、称量、溶化、灭菌、倒平板D.计算、称量、灭菌、溶化、倒平板(3)溶化时，烧杯中加入琼脂后要不停地________，防止琼脂糊底引起烧杯破裂。对培养基灭菌的方法一般为____________________。(4)①过程是__

4、________，②过程所使用的接种方法是________________法。淀粉C搅拌高压蒸气灭菌稀释涂布平板琼脂二、无菌技术项目条件结果常用方法应用范围消毒较为温和的物理或化学方法仅杀死物体表面或内部的部分对人体有害的微生物煮沸消毒法日常用品巴氏消毒法不耐高温的液体化学药剂消毒法用酒精擦拭双手，用氯气消毒水源灭菌强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子灼烧灭菌法接种工具干热灭菌法玻璃器皿、金属工具高压蒸汽灭菌法培养基及容器的灭菌1.消毒和灭菌的区别2.不同对象的无菌操作方法(连线)方法类型对象①灼烧灭菌②干热灭菌③巴氏

5、消毒④紫外线⑤化学药物⑥高压蒸汽灭菌a.消毒b.灭菌Ⅰ.接种针（环）Ⅱ.培养皿Ⅲ.操作者的衣着和手Ⅳ.水源地【例题讲解】细菌培养过程中分别采用了高压蒸汽、酒精、火焰灼烧等几种不同的处理，这些方法依次用于杀灭哪些部位的杂菌()A.接种环、手、培养基B.高压锅、手、接种环C.培养基、手、接种环D.接种环、手、高压锅C三、平板划线法和稀释涂布平板法的比较项目优点缺点适用范围平板划线法观察菌落特征，对混合菌进行分离不能计数适用于好氧菌稀释涂布平板法可以计数，可以观察菌落特征吸收量较少，平板不干燥效果不好，容易蔓延适用于厌氧菌和兼性厌氧菌【例题讲

6、解】下图中甲是稀释涂布平板法中的部分操作，乙是平板划线法的操作结果。下列叙述中错误的是()A.甲中涂布前要将涂布器灼烧，冷却后才能取菌液B.对于浓度较高的菌液，如甲中的稀释倍数仅为102，则所得的菌落不一定是由单一的细胞或孢子繁殖而成C.乙培养皿中所得的菌落都符合要求D.乙中的连续划线的起点是上一次划线的末端C四、两种分离方法比较项目土壤中分解尿素的细菌的分离分解纤维素的微生物的分离筛选方法原理代表过程鉴别方法脲酶C1、CX酶葡萄糖苷酶使用以尿素为唯一氮源的选择培养基进行培养利用富含纤维素的选择培养基进行培养土壤中不能分解尿素的微生物不

7、能正常生长，能够分解尿素的微生物能利用尿素为氮源正常生长，从而起到选择作用因为培养基中含有丰富的纤维素，因此能够分解纤维素的微生物具有更多的生存机会而大量繁殖CO(NH2)2＋H2OCO2＋2NH3纤维素纤维二糖葡萄糖在培养基中加入酚红指示剂，若pH升高，指示剂变红刚果红染色法，即通过是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌【例题讲解】下表为两种微生物的培养基配方：A组KH2PO4Na2HPO4MgSO4·7H2O葡萄糖尿素琼脂1.4g2.1g0.2g10.0g1.0g15.0gB组纤维素粉NaNO3Na2HPO4·7H2OKH2PO4MgSO

8、4·7H2OKCl酵母膏水解酪素5g1g1.2g0.9g0.5g0.5g0.5g0.5g注：上述两种培养基中的物质溶解后，均用蒸馏水定容至1000mL。（1）从功能上来看，上述两种培养基均属于_______