辣椒素对体外肝细胞脂质代谢的影响研究.pdf

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1、1450重庆医学2017年4月第46卷第11期论著·基础研究doi:10.3969/j.issn.1671-8348.2017.11.003*辣椒素对体外肝细胞脂质代谢的影响研究孙玉1,刘佳2#,宁波1,杨朝霞1△(1.重庆医科大学附属第二医院消化内科400010;2.湖北省武汉市普仁医院消化与肝病科430081)[摘要]目的探讨辣椒素对脂肪变肝细胞内脂质沉积的影响及自噬表达情况,为脂肪性肝病防治的研究提供新的思路和靶点。方法用油酸(40μg/mL)诱导肝原代细胞LO2细胞株建立非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)细胞模型。实验分为空白对照组、

2、油酸组、辣椒素组[油酸+辣椒素(100μmol/L)]。油红O染色和三酰甘油试剂盒检测肝细胞内脂肪变程度;Westernblot检测自噬体标记分子p62和LC3的表达水平并计算LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值。结果40μg/mL油酸处理LO2细胞24h后,油红O染色观察,油酸组肝细胞中可见大小不等的橘红色脂滴,而空白对照组无明显橘红色脂滴形成,油酸在体外成功建立NAFLD模型。与油酸组相比,辣椒素组肝细胞内三酰甘油水平显著降低(P<0.05),脂滴明显减少,p62蛋白水平明显降低(P<0.05),而LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值明显上调(P<0.05

3、)。结论在体外利用油酸诱导LO2细胞株建立NAFLD模型,辣椒素刺激NAFLD细胞,上调NAFLD细胞自噬水平,减少细胞内脂质沉积,但具体机制还需进一步研究。[关键词]油酸;辣椒辣素;非酒精性脂肪性肝病[中图分类号]R575.5[文献标识码]A[文章编号]1671-8348(2017)11-1450-04Effectsofcapsaicinonlipidmetabolismoflivercellsinvitro*1,LiuJia2#,NingBo1,YangZhaoxia1△SunYu(1.DepartmentofGastroenterol

4、ogy,theSecondAffiliatedHospitalofChongqingMedicalUniversity,Chongqing,400010,China;2.DepartmentofGastroenterologyandHepatic,PurenHospitalofWuhanCity,Wuhan430081,China)[Abstract]ObjectiveToobservetheeffectofcapsaicinonlipiddepositioninlivercellsandtheexpressionofautophagy,t

5、oprovidenewideasandtargetsforthestudyoffattyliverdisease.MethodsThemodelofnonalcoholicfattyliverdisease(NAFLD)wasestablishedbyinducingLGFcelllineofliverprimarycellswitholeicacid(40μg/mL).Theexperimentwasdividedintoblankcontrolgroup,oleicacidgroup,capsaicingroup[oleicacid+c

6、apsaicin(100μmol/L)].ThelevelofintracellularlipidwasdetectedbyoilredOstainingandtriglyceride(TG)kit.Westernboltwasusedtodetecttheexpressionlevelofautophagymarkermoleculep62andLC3,andtocalculatetheratioofLC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ.ResultsAftertreatedwith40μg/mLoleicacidfor24h,theoilredOst

7、ai-ningshowedthatorange-redlipiddropletswerefoundintheoleicacidgroup,buttherewasnoobviousorange-redlipiddropletfor-mationintheblankgroup,whichsuggestingthattheNAFLDcellmodelwasestablishedsuccessfullybyusing40μg/mLoleicacidinvitro.OilredOstainingwasobserved,thecellsinthecap

8、saicingroupweresignificantlylessthantheoleicacidgroup,andthecontentoftriglycerideintheliv

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