卡诺氏液的作用.doc

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1、卡诺氏固定液(Carnoy'sFluid)适用于一般植物组织和细胞的固定,常用于根尖,花药压片及子房石蜡切片等.有极快的渗透力,根尖材料固定15—20min即可,花药则需1h左右,此液固定最多不超过24h,固定后用95%酒精冲洗至不含冰醋酸为止;如果材料不马上用,需转入70%酒精中保存.固定液的重要特性是能迅速穿透细胞,将其固定并维持染色体结构的完整性,还要能够增强染色体的嗜碱性,达到优良染色效果。配方:无水酒精3份:冰醋酸1份或无水乙醇6份,氯仿3份,冰醋酸1份。龙胆紫,其1~2%溶液俗称紫药水,是人们所熟悉的外用药。龙胆紫为一种碱性

2、阳离子染料,因其阳离子能与细菌蛋白质的羧基结合,影响其代谢而产生抑菌作用。它能抑制革兰氏阳性菌,特别是葡萄球菌、白喉杆菌,对白色念珠菌也有较好的抗菌作用。它杀菌力强,对组织没有刺激性,也没有毒性和副作用。醋酸洋红常被用作核、染色体的固定和染色剂。在“观察植物细胞有丝分裂”(即“观察根尖分生区组织细胞”)时,对染色体进行染色,需要用碱性染液,此时可以使用醋酸洋红或龙胆紫染液。改良苯酚品红染色液对果蝇唾液腺染色体的染色效果与醋酸染洋高中生物试验中试剂和药品的作用如下:1、斐林试剂作用:鉴定还原性糖:C6H12O6、果糖、麦芽糖、乳糖等。还原

3、性糖与斐林试剂发生作用,生成砖红色沉淀。如用于鉴定组织液中有否还原性糖、糖尿病人尿成分分析、酶专一性探索等。2、班氏尿糖定性试剂使用方法同斐林试剂,所不同的是班氏试剂可长期使用。3、双缩脲试剂作用:鉴定蛋白质,蛋白质与双缩脲试剂发生作用,可产生紫色反应。也可用于鉴定多肽。4、苏丹Ⅲ作用:鉴定脂肪,脂肪可以被苏丹Ⅲ染成橘黄色(或被苏丹Ⅳ染成红色)。5、质量分数为15%的盐酸和体积分数为95%的酒精溶液的混合液作用:用于洋葱根尖的解离,即使组织中的细胞相互分离开来。能杀死细胞固定。6、质量浓度为0.01g/mL的或0.02g/mL龙胆紫溶液

4、(或醋酸洋红溶液)作用:使细胞核内的染色体着色,便于观察。7、质量浓度为0.3g/ml的蔗糖溶液作用:观察成熟植物细胞质分离时用。经此处理细胞仍具活性。8、质量浓度为0.1mg/ml的亚甲基蓝溶液作用:(1)用于观察根对矿质元素离子的交换吸附观察;(2)用于检测水中细菌情况,根据亚甲基蓝褪色情况,判断水质被细菌污染情况。是活体染色剂。9、丙酮是有机溶剂,在叶绿体中色素提取时,用于溶解叶绿体中的色素。可用酒精替代,不过提取色素时将绿叶放入酒精中隔水加热10、层析液是一种脂溶性很强的有机溶剂,叶绿体中的色素在层析液中的溶解度不同:溶解度高的

5、随层析液在滤纸上扩散很快;溶解度低的随层析液在滤纸上扩散得慢。代用品:93号汽油、四氯化碳11、SiO2、CaCO3作用:加入少许SiO2是为了研磨得充分;加入少许CaCO3是为了防止在研磨时叶绿体中的色素受到破坏。12、碘液作用:用来测定淀粉,淀粉遇碘后,形成紫色的复合物。13、二苯胺作用:DNA遇二苯胺(沸水浴)会染成蓝色。14、NaOH作用:用于吸收CO2(验证光合作用需要CO2)或改变溶液的pH,15、Ca(OH)2作用:鉴定CO2(验证呼吸作用产生CO2)。16、NaHCO3作用:提供CO2等。17、检验染色体的染色剂:碱性染

6、料(龙胆紫或醋酸洋红)⒙检验线粒体的染色剂:活性染料(健那绿)一。同位素示踪法,是利用放射性核素作为示踪剂对研究对象进行标记的微量分析的方法。常用的标记元素有:(1)14C:常用于标记CO2,葡萄糖,生长素等物质中的C,也可用与标记生长素的运输方向(2)18O:常用于标记光合作用和呼吸作用过程中的H2O,CO2,O2,葡萄糖等,(3)3H:经常用于标记核苷酸示踪DNA,RNA的分布(4)15N:常用于标记无机盐,示踪在自然界中的N循环,也可用来标记氨基酸等(5)32P:常用于标记核酸,标记含P的无机盐可示踪无机盐在植物体内的利用状况,也

7、可用来标记DNA的复制情况(6)35S:标记蛋白质,在研究遗传的物质基础实验中标记噬菌体淀粉――碘液(蓝色)还原性糖――斐林试剂班氏试剂(砖红色)蛋白质――被蛋白酶水解、双缩脲试剂(紫红色)脂肪――苏丹Ⅲ染液(橘黄色)、苏丹Ⅳ染液(红色)DNA――二苯胺(蓝色)、甲基绿、改良苯酚品红溶液RNA――吡罗红染色体――龙胆紫溶液,醋酸洋红溶液CO2――Ca(OH)2溶液(澄清石灰水变浑浊)、溴麝香草酚蓝水溶液酒精――重铬酸钾溶液乳酸――pH试纸线粒体――健那绿染液其它化学试剂:蒸馏水、生理盐水、盐酸(8%、15%)、蔗糖(0.3g/mL)、

8、FeCl3(3.5%)、淀粉酶溶液、碳酸钙、层析液、卡诺氏液、NaCl(0.9%、0.14mol/L)等。酒精(95%解离、DNA的提;、50%脂肪的鉴定时洗去浮色;无水乙醇提取色素;0%消毒)改良苯酚品红

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