尿液微量蛋白检测的临床意义.ppt

《尿液微量蛋白检测的临床意义.ppt》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。

1、尿液微量蛋白检测和临床意义蔡晓平艾迪康医学检验中心“五项”还是“六项”过敏原4项目清楚：“定性”还是“定量”最好能写出单个项目名称！HPV检测：HPV6-11、HPV16-18需要取2管分泌物标本C肽/胰岛素释放试验：需要抽5管血5标本少送：主要内容尿微量白蛋白尿IgG尿β2－微球蛋白尿转铁蛋白尿α1－微球蛋白尿视黄醇结合蛋白分子量：69000分子直径：3.6nmPI:4.9肾小球滤过膜：不滤过肾小管重吸收：少量一、尿微量白蛋白理化性质：分子量：77000分子直径：3.8nmPI:5.2肾小球滤过膜：不滤过肾小管重吸收：少量二、尿转铁蛋白理化性质：分子量：150000分子直

2、径：10-50nmPI:5.8-7.2肾小球滤过膜：不滤过肾小管重吸收：少量三、尿免疫球蛋白IgG理化性质：分子量：11800分子直径：3.4-3.8nmPI:4.9肾小球滤过膜：自由滤过肾小管重吸收：几乎全部四、尿β2微球蛋白理化性质：分子量：26000-33000分子直径：3.6nmPI:3.6-4.4肾小球滤过膜：自由滤过肾小管重吸收：99.9％五、尿α1微球蛋白理化性质：分子量：21000分子直径：3.8nmPI:4.4-4.8肾小球滤过膜：自由滤过肾小管重吸收：95-99％六、尿视黄醇结合蛋白理化性质：尿微量蛋白的检测方法传统测定微量蛋白的方法有酶联免疫吸附试验(ELISA)和放射

3、免疫分析法(RIA)等,其检测精度较差,操作繁杂。免疫散射比浊法操作简便,测量精度较高,结果更准确,但是必须使用特定蛋白分析仪,仪器和试剂昂贵，给使用带来一定的影响，而透射比浊法则可用于各种自动化分析仪，具有速度快、省试剂、适于批量检测的优点为临床上高血压和糖尿病肾损害的早期诊断提供了一个更为快速、简便的方法。免疫透射比浊法原理：利用抗原（白蛋白）和特异性抗体（羊抗人白蛋白抗血清）相结合，形成不溶性免疫复合物，使反应液产生混浊，其浊度高低即透光度减少、吸光度增加反映血清样本中白蛋白的浓度，可由校准品所作的浓度－吸光度相应曲线算出。免疫透射比浊法影响免疫比浊测定的主要因素抗原、抗体比例与浊度关

4、系：抗原过量，出现“带现象”，IC分子小，且可发生再解离，浊度下降，光散射减少。抗体过量，IC形成随抗原量增加到抗原抗体最适比例时达高峰。抗体须过量但又必须适量，抗体浓度是测定关键。免疫透射比浊法影响免疫比浊测定的主要因素抗体质量：特异性、效价、亲和力、R型抗体高亲和性抗体的抗原结合点与抗原表位的空间构型上非常适合，两者结合牢固，不容易解离。反之，低亲和性抗体与抗原形成的复合物较易解离。免疫透射比浊法影响免疫比浊测定的主要因素R型抗体以家兔免疫血清为代表，具有较宽的抗原抗体合适比例范围，只在抗原过量时，才易出现溶性免疫复合物，大多数动物的免疫血均属此型。H型抗体以马免疫血清为代表，其抗原与抗

5、体的合适比例范围较窄，抗原或抗体过量，均可形成可溶性免疫复合物。人和许多大动物的抗血清皆属H。免疫透射比浊法影响免疫比浊测定的主要因素反应溶液：pH6.5~8.5，适当浓度电解质（中和抗原抗体复合物表面电荷，促进凝聚）、离子强度（大，IC形成快）；一般常用磷酸盐缓冲液。免疫透射比浊法影响免疫比浊测定的主要因素增浊剂：非离子型亲水剂如聚乙二醇（PEG）、吐温-20等，以PEG6000最好，浓度一般为3%~4%。浓度过高可致非特异沉淀。免疫透射比浊法免疫比浊法测定的注意事项：1.标本3.定标2.试剂4.线性免疫透射比浊法尿微量白蛋白检测方法检测方法：原理：利用抗原（白蛋白）和特异性抗体（羊抗人白

6、蛋白抗血清）相结合，形成不溶性免疫复合物，使反应液产生混浊，其浊度高低即透光度减少、吸光度增加反映血清样本中白蛋白的浓度，可由校准品所作的剂量－相应曲线算出。微量蛋白检测临床意义正常肾小球基底膜具有3~4nm的微孔,并带有一层负电荷,即具有孔径屏障和电荷屏障,使血浆中带负电荷的中等分子及大分子蛋白质不易通过。在正常情况下,肾小球滤液中的小分子蛋白质95%~99%可通过肾小管重吸收,因而尿液中蛋白质含量很少。正常生理情况下,尿中这些蛋白质含量仅为微克或毫微克水平,在各种致病因子作用下,肾小球滤过膜和肾小管发生结构和功能损伤,使尿液中蛋白质过高,超过了肾小管的重吸收功能而出现蛋白尿。（1）标本由

7、临床运送至实验室要尽可能快，必须分离出血清（浆）后运送；（2）标本运送要注意防止标本外溢、蒸发和污染（标本管要盖盖子）；（3）足量。四、标本保存与运送：每一个标本都是唯一的，不可替代的！每一个标本都是危险的，具有潜在传染性！肾小球滤过膜示意图微量白蛋白检测临床意义微量清蛋白尿对早期肾损害诊断具有重要意义。实践证明,单一指标有其局限性。因为早期肾损害不仅是肾小球损害,有的可以是肾小管功能的受损,也可以是两者