第十章吸光光度法2.ppt

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1、第十章、吸光光度法Al3+Cu2+KMnO4Ni2+Fe3+通过比较溶液颜色深浅而求得其浓度的分析方法称为比色分析法。比色分析的基本依据是有色物质对光的选择性吸收作用。第一节、吸光光度法概述吸光光度法是基于物质对光的选择性吸收而建立起来的分析方法，包括：比色分析法，可见光度法，紫外分光光度法，红外分光光度法。比色分析法和分光光度法特点:(1)、灵敏度高测定的最低浓度可达10-5~10-6mol/L，相当于含量0.001~0.0001%的微量组分.(2)、准确度较高分光光度法的相对误差为2~5%.(3)、操作简便，测定速度快(

2、4)、应用广泛第二节、吸光光度法的基本原理一、互补色光白光：复合光复合光单色光单色器单色光1＋单色光2白光互补色光白光二、物质的颜色和对光的选择吸收(1)、光吸收程度最大处的波长，称为最大吸收波长，常用λmax表示.(2)、光吸收曲线与物质特性有关，这些特性客作为物质定性鉴定的依据.(3)、组成量度不同的同种物质的溶液，在一定波长处吸光度随溶液的组成量度增加而增大，这个特性可作为物质定量分析的依据.IoItIaIo=Ia+It+IrIr设入射光，吸收光，透射光和反射光的强度依次为Io，Ia，It，Ir，则他们之间的关系为:第

3、三节光吸收的基本定律一、朗伯定律溶液对光的吸收程度与液层厚度的成正比。二、比耳定律溶液对光的吸收程度与浓度成正比。K为比例常数，它与入射光的波长，有色物质的性质和溶液的温度等因数有关.上式表示当一束平行单色光通过均匀的溶液时，溶液对光的吸收程度与溶液的组成量度和液层厚度的乘积成正比.这一定律称为朗伯-比耳定律，也称为光吸收定律.三、朗伯-比耳定律四、透光率，吸光度，吸光系数，摩尔吸光系数当液层厚度b的单位为cm，组成量度c的单位为g/L时，则常数K用a表示，它的单位为L/g·cm，a称为吸光系数.当b的单位为cm，组成量度c

4、的单位为mol/L时，则常数K用ε表示，它的单位为L/mol·cm，ε称为摩尔吸光系数.摩尔吸光系数ε时有色物质在一定波长下的特征常数，它可以衡量显色反应的灵敏度.ε值越大，表示该有色物质对该波长光的吸收能力越强，显色反应越灵敏.第四节、吸光光度法的仪器部件一、目视比色法用肉眼比较被测溶液同标准溶液颜色深浅，以确定被测物质含量的方法，称为玛纳斯比色法.最常用的目视比色法是标准系列法.标准系列法的优点是仪器简单，操作简便，而且可在复合光下进行测定.其缺点是配制标准色阶比较费时，由于某些有色溶液不够稳定，常常现用现配.C1C2C

5、3C4C5Cx二、光电比色法与分光光度法(一)、基本原理和特点1、标准曲线法光度法与目视法比较，其优点是:用光电池代替肉眼进行测量，消除了肉眼的主观误差，提高了分析结果的准确度.2、比较法.(二)光度计的基本部件一般光度计是由光源，滤光片，比色皿，光电池和检流计等五大部件组成。1、光源2、单色器1、滤色片目前普遍使用的是国产型光电比色计，有三种配套的滤光片（红色650，绿色530，蓝色440）2、棱镜3、光栅1000条/mm3、比色皿(吸收池)4、光电池或光电管5、检流计(二)、分光光度计1、72型可见光分光光度计2、75型

6、紫外分光光度计721型可见分光光度计特点：棱镜单色器。T.A直读。使用消光片，可供高含量比色测定。技术指标：波长范围：360~800nm波长精度：±3nm(360~600nm)表面刻度：（T）0~100％（A）0~2722型可见分光光度计特点：能在可见光谱区域内对物质作定性定量分析。采用光栅单色器、具有波长精度高，单色性好等优点。采用3位LED数字显示，T.A.C直读。波长范围：330－800nm波长准确度：±2nm752型紫外可见分光光度计特点：采用全息闪耀光栅单色器，具有波长精度高，单色性好，杂散光低等优点。能自动切换钨

7、卤灯和氘灯。采用3位LED数字显示，具有T.A.C直读能。技术指标:波长范围：200－800nm稳定性：暗电流漂移0.5％(τ)3min754型紫外可见分光光度计特点:自动调整”0”和调整”100”具有超群的测量读数重现性和稳定性.由微处理机控制的打印机可作实时记录.可使用直线回归测量线,具有高准确度的浓度运算程序.732型可见分光光度计自动调整“0”“100”，可直接消除比色皿配对误差。测量读数准确性高，重现性和稳定性佳。有浓度直读，线性回归，定时打印，GOTOλ以及光谱扫描等高级功能。7230g型可见分光光度计自动调零、

8、自动调满度、自动建立线性方程、τ、A、C自动切换，浓度直读。比色室能放置100nm比色皿，并配有托架。具有自动调节的波长调整机构，调整时无须打 开机壳。灯源采用固定电压、灵敏度在全波长范围内由微机自动控制。第五节显色反应和显色条件的选择一、显色反应Fe3++3NCS-=Fe(NCS)3(血