细菌培养及检测.ppt

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1、细菌及其培养和检测的学习汇报目录第一讲微生物细菌学第二讲细菌培养第三讲大肠杆菌第四讲金黄色葡萄球菌第五讲真菌学及其检测第六讲微生物学及其检测第一讲微生物细菌学细菌的定义细菌的形态细菌的结构细菌的生理细菌的定义细菌是一类具有细胞壁的单细胞原核型微生物。通常使用显微测微尺来测量细菌的大小，以微米（μm）作为测量单位细菌的形态1.球形双球菌：肺炎双球菌2.链球菌：乳酸链球菌3.葡萄球菌：金黄色葡萄球菌细菌的结构基本结构：细胞壁、细胞膜、细胞浆、核质特殊结构：荚膜、鞭毛、菌毛、芽孢............................................

2、.....球菌形态细菌的结构及功能基本结构由外到内细菌的依次是细胞壁、细胞膜、细胞浆和核质。特殊结构有荚膜、鞭毛、菌毛和芽孢。其中能维持细菌的固有形态的结构是细胞壁，控制遗传性状的是核质，与细菌的毒力有关的结构是荚膜和菌毛，抵抗力强的是芽孢，决定细菌有无运动性的结构是鞭毛。芽孢菌体细菌的生理水分（70～90％）：游离水和结合水固形物(10～30％）：有机物（蛋白质、核酸、糖类、脂类、其他）和无机物细菌的化学组成1、自养菌：自养菌具有完备的酶系统，合成能力较强，能以简单的无机碳化物作为碳源，合成菌体所需的有机物质。2、异养菌：异养菌不具备完备的酶系统，合成能力较

3、差，必须利用有机物作为碳源，其代谢所需能量大多从有机物氧化中获得。致病菌多属异养菌，寄生菌多属自养菌。细菌的营养类型水、含碳化合物、含氮化合物、无无机盐细菌的营养物质1、细菌繁殖生长的条件：营养物质（五种营养成分）、温度（最适生长温度37℃）、pH（最适7.2～7.6）、渗透压（多在等渗条件下）、气体（根据细菌呼吸类型）2、细菌的繁殖方式：简单的二分裂细菌的生长繁殖℃第二讲细菌培养根据某种细菌的营养需要而选择多种原料配制而成的培养基，不仅含有这种细菌生长繁殖所需要的各种营养物质，还要有适宜的PH。本实验所用的牛肉膏蛋白胨培养基，应用较广泛，适于芽孢杆菌、金黄色

4、葡萄球菌等多种细菌的培养。配置好的培养基必须经过灭菌。对不同的材料应当采取不同的灭菌方法。培养基一般采用高压蒸汽灭菌法，就是将待灭菌的培养基放入密闭的高压灭菌锅内，通过加热是锅内的冷空气排进以后。关闭排气阀并继续加热，这是锅内的压力就会升高，最终使菌体蛋白质凝固变性，从而达到灭菌的目的。接种环是用火焰灼烧灭菌的。将某种菌种在彻底灭菌的培养基上，经过一段时间的培养后，就能够得到生长良好的细菌群体，它们在培养基上会呈现一定的形态特征。1、通过对牛肉膏蛋白胨培养基的配置，了解配置培养基的一般步骤和方法。2、了解灭菌的基本原理，以及实验中常用的灭菌方法。3、初步学会细

5、菌培养的基本技术。一、细菌培养的实验原理二、目的要求大肠杆菌的生长状态芽孢杆菌或金黄色葡萄球菌、牛肉膏、蛋白胨、琼脂。天平、角匙、200mL烧杯、试管、漏斗、量筒、玻璃棒、滴管、胶管、弹簧夹、铁架台、酒精灯、石棉网、三脚架、火柴、纱布、棉花、牛皮纸、线绳、标签、接种环、精密pH试纸（或pH计）、金属小筐、高压蒸汽灭菌锅、恒温箱NaCl、1mol/L的NaOH溶液、体积分数为75%的酒精溶液、蒸馏水。三、材料用具四、细菌培养的方法和步骤（五）、培养（四）、接种（三）、搁置斜面（二）、灭菌（一）、培养基的配置用天平称取0.5g牛肉膏、1g蛋白胨、0.5gNaCl、

6、2g琼脂。将称好的牛肉膏、蛋白胨和NaCl放入烧杯。称量向上述烧杯中加入蒸馏水100ml，用玻璃棒搅匀后，放到酒精灯上加热。当牛肉膏和蛋白胨溶化后，加入琼脂，并继续用微火加热，在琼脂溶化的过程中，要控制火力的大小，并且不断搅拌，以免培养基溢出或烧焦。待琼脂安全溶化后，补加蒸馏水至100ml。溶化用滴管逐滴滴入1mol/L的NaCl溶液，边滴边搅拌，并随时用pH试纸测pH，直到pH为7.4~7.6为止。调pH将培养基趁热分类到洁净的试管中，培养基的高度约为试管高度的1/5.注意:分装时不要将培养基沾在管口和试管上段，以免引起污染。分装培养基分装完毕以后，在管口上

7、加一个棉塞。棉塞能防止杂菌污染，保证通气良好。加棉塞时，应使棉塞长度的2/3哎试管口内。加棉塞（一）、培养基的配置每10支试管用线绳捆成一捆，并且在管口外面包上一层牛皮纸，然后，用线绳扎好。在每捆试管外挂上标签，注明培养基名称、配制日期和制作者姓名。包扎1打开高压蒸汽灭菌锅，将里面的灭菌桶取出，向锅内加水（最好用开水），水面与底架平齐为宜。23456排出锅内的冷空气。接通电源，当压力上升到49KPa时，打开排气阀放气，当压力降到0是时，关闭排气阀。重复上述放气过程一次，以彻底排出锅内的冷空气。当锅内的压力上升到98KPa时，控制火力大小，使压力维持在98KPa

8、左右20min。切断电源。将扎好的试管