HPLC各个部件基本原理.ppt

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1、HPLC原理介绍reserviorinjectorpumpcolumndetectorDatasystemreserviorinjectorpumpcolumndetectorDatasystem流动相脱气吹氦脱气法加热回流法抽真空脱气法超声波脱气法在线真空脱气法HP-1100HPLC在线脱气结构示意图1-高压输液泵;2-贮液罐;3-膜过滤器;4-塑料膜管线;5-传感器;6-控制电路;7-电磁阀;8-真空泵;9-脱气后流动相至过滤器;10-脱气单元溶剂过滤头的清洗1.取下过滤头放在(1:4,V/V)的硝酸溶液烧杯中超声清洗15分钟;2.取出后用蒸馏水超声清洗10分钟;3.用吸球

2、吹出过滤头中的液体;4.再用蒸馏水超声清洗10分钟;5.用吸球吹净过滤头中的水份;6.将过滤头重新插入溶剂瓶中(正相系统注意将过滤头烘干)流程泵体材料耐腐蚀泵腔的体积要小，以便快速更换溶剂能在高压下连续工作,耐压40-50MPa.cm2压力平稳，无脉冲高压输液泵输出流量稳定，重复性高,输出流量范围宽高压输液泵恒流泵恒压泵注射型泵往复型泵双泵头往复式柱塞泵双柱塞往复式串联泵往复型泵工作原理图双泵头往复式柱塞泵1-流动相入口;2,3-带有单向阀的泵头;4-脉冲缓冲器;5-偏心轮;6-活塞;7-电动机;8-单向阀;9-至进样口双柱塞往复式串联泵1-贮液罐;2-泵I(柱塞I);3-单向

3、阀;4-阻尼器;5-泵II(柱塞II);6-至色谱柱;为什么要冲洗泵头呢?1-低压计量泵;1A,1B-时间比例电磁阀;2-微处理机;3-混合器;4-高压输液泵;5-至色谱柱6-反馈控制器;7-混合室;8-流量计信号;9-混合溶剂出口高压梯度低压梯度1-程序控制器;2-溶剂A;3-溶剂B;4-高压泵A;5-高压泵B;恒流泵中气泡的排除打开放空阀,按仪器前面板的”溃洗耳恭听”功能键,用大流量溶剂冲洗系统直到流出的液体连续,证明气泡已经排除;如果用”冲洗”状态仍不能吸液,可以用吸耳球或注射器在排液口抽吸,直至液体流出;如果仍然无液体流出,可能是阀球阀座粘连,取出单向阀,向单向阀两端分

4、别吹气,一通一堵为正常,两端均堵说明阀球座粘连,需清洗阀球阀座.5重新连接色谱柱，设定适当流速，当流动相流出约30倍于色谱柱体积，并且检测器基线平衡后，流动相更换完毕流动相的更换——更换互溶流动相1将新流动相置于储液瓶中2打开放空阀，启动泵使新的流动相从入空阀出口流出20ml左右3关闭放空阀，然后将进样阀与色谱柱相连接端卸开，用小容器放置于过样阀的出口处4启动恒流泵，让流动相从进样阀出口流出10ml左右流动相的更换——换缓冲液流动相1用水更换色谱系统中缓冲液2用水含水量量10%~60%范围的溶剂冲洗色谱柱中的盐3用新流动相更换水或冲洗色谱柱溶剂流程进样装置停流进样装置六通阀进样

5、装置自动进样器上一页流程高效液相色谱检测器紫外检测器折光指数检测器电导检测器荧光检测器蒸发激光检测器可变波长的紫外吸收检测器二极管阵列检测器工作原理1.电动机2.振动机3.色谱柱4.贮槽5.支架6.固定相干法装柱装置等比重匀浆装柱设备流程示意图THEENDTHANKYOU