凝集、沉淀反应.ppt

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1、凝集、沉淀反应实验目的1掌握直接凝集反应的原理意义及操作方法2了解双向琼脂扩散试验的原理意义及操作方法实验内容1直接凝集反应玻片法2双向琼脂扩散试验实验原理直接凝集反应：颗粒性抗原悬液与其相应抗体，在有适量电解质的环境中，两者直接特异性结合，进一步凝集成肉眼可见的凝集块。沉淀反应：可溶性抗原与相应抗体特异性结合，两者比例适当并有电解质存在及其一定的温度条件下，经一定的时间，可形成肉眼可见的沉淀物，在琼脂板上双方结合出现白色沉淀线。实验用品琼脂板，打孔器，酒精灯，毛细吸管，诊断血清，对照抗原，待检血清，湿盒，37℃温箱，双凹玻片，伤寒诊

2、断血清，生理盐水，待检菌液等。实验方法直接凝集反应玻片法1先标记双凹玻片，两侧分别为1，2号，在1号凹内加入伤寒诊断血清1滴，在2号凹内加入生理盐水1滴。2分别加入待检菌液于两凹内各1滴3摇动混匀2分钟，观察结果双向琼脂扩散试验1铺板：将溶化之1﹪琼脂5ml铺于洁净玻片上。2打孔：在琼脂板上打7个孔。3封底：把琼脂板通过火焰三次。4加样：把抗体1滴加于中央孔，把对照抗原加于上下两孔（6点，12点），把待检血清（肝癌病人血清）加于右侧孔内，左侧孔留作空白对照。5孵育：将加样后的琼脂板放在湿盒内，放入37℃温箱孵育24h，取出观察结果。实

3、验结果与分析：1直接凝集反应玻片法：1号凹内出现凝集颗粒，2号凹内均匀混浊不出现颗粒。2双向琼脂扩散试验：两对照抗原孔和抗体孔之间出现白色沉淀线，待检血清孔（2点，4点）和中央抗体孔之间亦出现白色沉淀线为阳性反应实验注意事项：1直接凝集反应玻片法摇动玻片时不要把两凹内液体混在一起。2双向琼脂扩散试验要注意加样要加满而不溢出为止。作业1写出实验报告2分析凝集反应的结果和意义3绘出双向琼脂扩散试验结果图