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时间:2020-01-19
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1、姓名:xxx学号:xxxxx指导老师:xx高效液相色谱法测定人血中比阿培南的浓度主要内容选题背景、意义实验目的实验方法:a.材料b.方法与结果C.结论d.讨论选题背景及意义:碳青霉烯类(Carbapenems)属于β-内酰胺全新结构的抗生素。具有超广谱强效抗菌作用,经临床应用证明对各种细菌感染疗效优异,毒副反应少。意义比阿培南临床上主要用于治疗呼吸道、泌尿系统、腹腔及盆腔的感染,人血浆比阿培南浓度的高效液相色谱测定法(HPLC)的建立为临床应用奠定了基础。实验目的:建立高效液相色谱测定人血中比阿培南浓度的方法。1.材料1.1试验药品a
2、注射用比阿培南(哈药集团制药总厂,规格:0.3g,批号:090401);b比阿培南对照品(南京先声东元制药有限公司,批号:92-090502);C阿昔洛韦对照品(中国药品生物制品检定所,批号:140630-200602,含量100.1%)1.2仪器设备安捷伦1200液相色谱仪(G1322A在线脱气机、G1311A高压四元泵、G1329A自动进样器、G1316A柱温箱、G1314BVWD检测器)MS/204S型电子分析天平(瑞士MettlerToledo公司1.3试剂乙腈(色谱纯),乙酸铵、硫酸铵、3-吗啉丙磺酸(MOPS)均为分析纯。
3、实验用水为Milli-Q超纯水2.方法与结果2.1色谱条件:色谱柱:分析柱:UltimateAQ-C18(4.6mm×250mm,5m);预柱:C18保护柱(43.0mmI.D.美国Phenomenex公司);流动相:乙酸铵水溶液(50mmol,pH=5.00)-乙腈(97.5:2.5);检测波长:300nm;流速:1mL/min;柱温:30℃,进样量:20L。2.2标准溶液和内标溶液的配制2.2.1比阿培南标准溶液的配制2.2.2阿昔洛韦(内标)溶液的配制2.3血浆样品处理方法内标20µl旋涡30s30%硫酸铵600µl1mi
4、n旋涡5min(16000r/min)吸取200µl上清液进样20µl离心血浆样品400µl系统适应性试验ABC比阿培南标准工作曲线直线回归方程为:Y=-0.026X+8.017(r=0.9992)结果表明,比阿培南浓度在0.30g/mL-40.00g/mL范围内,线性良好。血浆中比阿培南的定量下限为0.30g/mL。精密度实验与绝对回收率试验加入浓度(μg/mL)测得浓度(μg/mL)日内精密度(%)日间精密度(%)回收率(%)0.60.60±0.022.44.983.766.06±0.030.5391.44040.12±0.
5、140.42.891.7稳定性试验加入浓度RSD%(μg/mL)室温放置2h室温放置4h3次冻融循环冷冻放置40d0.65.66.22.33.362.83.52.22.7402.63.222.5结论:本试验建立的人血浆中比阿培南的HPLC测定方法,在0.30g/mL-40.00g/mL的浓度范围内,线性良好,精密度高,准确性好。表明该方法灵敏、准确、可靠,专属性强,可适用于注射用比阿培南人体药代动力学试验的研究。讨论致谢!欢迎各位老师对我的论文进行批评与建议Thanks!
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