金黄色葡萄球菌检验 编制说明.doc

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1、《食品安全国家标准食品微生物学检验金黄色葡萄球菌检验》(征求意见稿)编制说明一、标准起草的基本情况（包括简要的起草过程、主要起草单位、起草人等）1、简要起草过程⑴确立标准整合的基本原则，在原国标、SN/T0172-2010、SN/T2154-2008的基础上，收集FDA，ISO和AOAC金黄色葡萄球菌检验方法。⑵比较各种方法的差异，在方法的实验比对、验证基础上，制定出标准的讨论稿。⑶将标准讨论稿提交专家组审查。⑷发出《征求意见稿》征求意见，汇总专家意见，对标准文本进行完善。⑸提交《食品安全国家标准食品微生物学检验金黄色葡萄

2、球菌检验》（送审稿）、《编制说明》和《征求意见汇总表》供食品安全国家标准审评委员会审议。2、标准起草单位、起草人本标准起草单位为上海市疾病预防控制中心、协助单位为上海市出入境检验检疫局、国家食品安全风险评估中心、福建省疾病预防控制中心、广西省疾病预防控制中心和吉林省疾病预防控制中心。参与起草人员为：顾其芳、韩伟、郭云昌、马群飞、李秀桂、刘桂华、於颖、朱颖莹、鲁珺琰。二、标准的重要内容及主要修改情况1、标准的重要内容本标准正文包括4部分3种方法，1-3部分为范围、设备和材料、培养基和试剂，3种检测方法为第一法金黄色葡萄球菌定

3、性检验，第二法金黄色葡萄球菌平板计数法，第三法金黄色葡萄球菌MPN计数法，每种方法包括检验程序、操作步骤和结果报告；附录A、附录B和附录C均为规范性附录，附录A是试剂和培养基，附录B是葡萄球菌肠毒素，附录C是金黄色葡萄球菌最可能数（MPN）检索表。2、修订内容本标准与GB4789.10-2010相比主要修订了如下内容：⑴修改了标准的范围产毒的葡萄球菌是个世界性卫生问题2。由于产毒的葡萄球菌一般血浆凝固酶阳性，ISO对葡萄球菌的标准定义为凝固酶阳性的葡萄球菌检验，原国标也是检测了凝固酶阳性的金黄色葡萄球菌，但没有标明范围。为

4、了规范我们把标准的范围明确了凝固酶阳性的金黄色葡萄球菌。采用革兰氏染色、溶血试验、血浆凝固酶三个项目的实验来鉴定凝固酶阳性的金黄色葡萄球菌。⑵修改了第一法和第三法培养用的增菌液，统一规范为7.5%氯化钠肉汤，删除了10%氯化钠胰酪胨大豆肉汤。FDA、ISO等国际标准均无定性方法，我们实验采用原国标7.5%氯化钠肉汤和10%氯化钠胰酪胨大豆肉汤二种增菌液做增菌效果比较，最后采纳7.5%氯化钠肉汤。⑶增加了“第一法金黄色葡萄球菌定性检验”中用RPF平板的分离方法；⑷增加了“第二法金黄色葡萄球菌平板计数法”中接种RPF平板的方法

5、；⑸增加了“第三法金黄色葡萄球菌MPN计数法”中接种RPF平板的方法；分离平板增加了SN/T2154-2008采用的不需经过凝固酶阳性试验确认的葡萄球菌分离平板--RPF平板，这也是ISO标准采用的分离平板。原理是凝固酶阳性的葡萄球菌产生的凝固酶将培养基中的纤维蛋白原分解为不溶性纤维蛋白，使菌落外围出现沉淀晕环。这个平板的优点是菌落观察更容易。由于培养基中已含有兔血浆，因此，在此培养基上生长的典型金黄色葡萄球菌不需再做血浆凝固酶就可确认。三、国际标准情况1.定性方法ISO、FDA、AOAC均无定性方法。2.定量方法ISO通

6、常采用Baird-Parker平板计数法、RPF平板计数法和MPN法，MPN法采用的增菌液为10%氯化钠胰酪胨大豆肉汤；AOAC通常采用改良Baird-Parker平板计数法，3M纸片法；FDA采用Baird-Parker平板计数法、MPN法，MPN法采用的增菌液为10%氯化钠胰酪胨大豆肉汤；、四、其他需要说明的事项无。2