DNA是主要的遗传物质.ppt

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时间:2020-01-24

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1、能够证明DNA或RNA是遗传物质的最关键的实验设计思路是什么?设法将DNA(RNA)与蛋白质分离开来,单独地直接地观察它们的作用。思考:肺炎双球菌的转化实验和噬菌体侵染细菌的实验是如何实现这一思路的?一、人类对遗传物质的探索过程1、肺炎双球菌转化实验:1)格里菲思体内转化实验小鼠不死亡小鼠死亡小鼠不死亡R型活细菌注射小鼠体内S型活细菌注射小鼠体内加热杀死后的S型细菌注射小鼠体内加热杀死后的S型细菌+R型活细菌注射小鼠体内小鼠患败血病死亡,结论:加热杀死的S型细菌内有某种转化因子DNA是遗传物质小鼠患败血病死亡.R型+S型DNA的粗提取原理(1)利用DNA的

2、溶解性 ①DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度NaCl中溶解度不同,盐浓度为0.14mol/l时,DNA溶解度最小。 ②DNA不溶于酒精溶液,某些蛋白质则溶于酒精。 (2)利用DNA的耐受性 ①蛋白酶水解:蛋白酶能水解蛋白质,但是对DNA没有影响。 ②高温变性:大多数蛋白质不能忍受60℃—80℃的高温,而DNA在80℃以上才会变性。 ③洗涤剂能够瓦解细胞膜,但对DNA没有影响。PCR(聚合酶链式反应)技术:a、DNA变性(90℃以上,如95℃):双链DNA模板在热作用下,_____断裂,形成___________b、退火(复性50℃左右,如55℃):系统温度

3、降低,引物与DNA模板结合,形成局部________。c、延伸(72℃左右):在Taq酶的作用下,从引物的5′端→3′端延伸,合成与模板互补的________。氢键单链DNA双链DNA链格里菲思(F.Griffith)用肺炎双球菌在小鼠身上进行了著名的转化实验,此实验结果A.证明了DNA是遗传物质B.证明了RNA是遗传物质C.没有具体证明哪一种物质是遗传物质D.证明了蛋白质是遗传物质√注意:仅格里菲思实验既不能证明DNA是遗传物质,也不能证明蛋白质不是遗传物质实验思路:分离出S型活细菌中的DNA、RNA、蛋白质等物质,分别与R型细菌混合培养,观察培养基上菌

4、落的特征。1.艾弗里肺炎双球菌的体外转化实验艾弗里的实验分别与R型活细菌混合培养RRRR+SDNA蛋白质荚膜多糖DNA+DNA酶S型活细菌结论:DNA是使R型细菌产生稳定的遗传变化的物质,也就是说,DNA是遗传物质。而蛋白质、多糖等物质不是遗传物质Madebyoxl肺炎双球菌转化,从变异的来源上来讲,转化的原理是什么?转化作用可以看成广义上的基因重组。2、噬菌体侵染细菌实验---DNA是遗传物质的有力证据蛋白质外壳DNA分子噬菌体是一种专门寄生在细菌体内的病毒1952年赫尔希和蔡斯研究方法:放射性同位素标记法用35S标记蛋白质,用32P标记DNA,分组对比

5、实验此实验用同位素标记法,巧妙地将噬菌体的核酸(DNA)和蛋白质分开,单独、直接观察两者在遗传上的作用。用32P标记DNA:因噬菌体DNA含有,蛋白质一般没有35S标记蛋白质:因噬菌体蛋白质含有DNA没有的特殊元素S噬菌体侵染细菌的实验如何标记噬菌体:先标记细菌,分别用含有35S和32P的培养基培养大肠杆菌,从而获得分别被35S和32P标记的细菌;再标记噬菌体,分别用上述细菌培养噬菌体,得到DNA含有标记或蛋白质含有标记的噬菌体。噬菌体侵染细菌的实验——赫尔希和蔡斯的实验放射性同位素标记噬菌体短时保温充分搅拌上清液沉淀物离心2.噬菌体侵染细菌的实验上清液侵

6、染后留在细菌体外的T2噬菌体的蛋白质外壳和未侵染的T2噬菌体沉淀物含有被T2噬菌体侵染的大肠杆菌.搅拌的目的是:使吸附在细菌上的噬菌体与细菌分离与格里菲斯肺炎双球菌转化实验相比,本实验更具有说服力。原因是:本实验把DNA与蛋白质分开,从而可以直接、单独地去观察DNA和蛋白质的作用。实验过程中,保温的时间不宜过长,原因是:培养时间过长,复制增殖后的噬菌体从大肠杆菌体内释放培养液中,经离心后分布于上清液中,影响实验结果的分析离心的目的是:使菌液分层,上清液中析出重量较经的侵染后留在细菌体外的T2噬菌体的蛋白质外壳和未侵染的T2噬菌体,而沉淀物中留下被T2噬菌体

7、侵染的大肠杆菌。从噬菌体侵染细菌的实验可以得出哪些结论?①DNA是遗传物质,而蛋白质不是遗传物质②DNA能自我复制③DNA能指导蛋白质的合成1、两个经典实验的思路基本相同,都是设法把DNA和蛋白质等各种成分________,_________地去观察DNA的作用;单独、直接有无细胞结构分开3、细菌是原核生物,噬菌体是细菌病毒,所以两者在结构上最大的区别是________________;5、两个实验都证明了DNA是遗传物质;但是都不能证明DNA是主要的遗传物质几个需要特别注意的问题:4、培养病毒只能用相应类型的活体培养基,因为病毒是营寄生生活的。2、处理方

8、式有别:艾弗里实验:噬菌体侵染细菌实验:直接分离同位素标记法感谢各

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